Seminario de Título para optar al Título de Ingeniera en Biotecnología Molecular. / La función supresora de las células T reguladoras (Tregs) puede tener efectos negativos
sobre la respuesta inmune antitumoral. Por lo tanto, es de gran importancia estudiar los
factores que alteran la eficiencia de su inhibición, de tal forma de poder mejorar las
terapias antitumorales. La alta heterogeneidad de las Tregs periféricas es uno de los
problemas que deben ser abordados para mejorar y desarrollar nuevas terapias
antitumorales. Dentro del subset de Tregs, nuevos marcadores superficiales para la
población T reguladora tipo 1 (Tr1) no-clásica han sido reportados recientemente,
permitiendo su identificación mediante la expresión de las moléculas CD49b y LAG-3 en
su superficie. El efecto terapéutico de la población identificada mediante estos marcadores
ya ha sido estudiado en modelos murinos de diabetes y de artritis inducida por colágeno,
en los cuales mostraron un efecto protector. Sin embargo, su rol en el contexto tumoral ha
sido poco estudiado. Es por esto por lo que buscamos caracterizar a la población Tr1,
identificada mediante la expresión de CD49b, en un modelo murino de melanoma.
Sorprendentemente, se encontró que su presencia parece estar fuertemente influenciada
por el microambiente en el cual se encuentra. Mientras que en los linfonodos drenantes de tumor (TdLNs) este subset compone tan solo el 4% del total de células T CD4+, en el
tumor alcanzan un 30% de las células T CD4+. Por otra parte, las Tregs convencionales
Foxp3+ (cTregs), componen alrededor de un 15% de los linfocitos que infiltran el tumor
(TILs) que expresan CD4, casi la mitad de lo observado para las Tr1. En cuanto a su
fenotipo, se observó que, aunque en menores niveles que las cTregs, alrededor del 50% y
30% de las Tr1 expresan Nrp1, en los TdLNs y en el tumor, respectivamente. Esta
molécula es un co-receptor de VEGF, y se ha descrito que es esencial para la estabilidad
y función del fenotipo supresor de las cTreg y para la progresión tumoral. Además, se
observó que las Tr1 muestran un patrón diferencial de expresión de ciertas moléculas
reguladoras, comparado con las cTregs: una mayor intensidad mediana de fluorescencia
de la ectonucleotidasa CD73 en el tumor, contrario a lo que se observa en los TdLNs, y
una menor producción de IL-10 en el tumor. Se encontró además que la capacidad
proliferativa de las cTregs es significativamente mayor a la de las Tr1, tanto en el tumor
como en los TdLNs. Así, nuestros resultados destacan las posibles diferencias entre los
mecanismos de inmunosupresión de los subsets de Tregs, los cuales pueden variar
dependiendo del microambiente (TdLNs versus tumor). / T regulatory cells (Tregs) suppressive function can have a detrimental effect on immune
responses against tumor cells. Thus, in order to improve actual anti-tumor therapies, it is
of great importance to study the factors altering their inhibition efficiency. The high
heterogeneity of peripheral Tregs is one of the problems that have to be addressed to
enhance and develop novel anti-tumoral therapies. Within the Tregs subsets, new surface
markers for the non-classical type 1 regulatory T cells population (Tr1) have been recently
reported, allowing their identification through the expression of the CD49b and LAG-3
molecules. Their therapeutic effect has already been studied in murine models of diabetes
and collagen-induced-arthritis, in which they displayed a protective effect. Nevertheless,
very few studies have focused on investigating their role in the tumoral context. Thus, we
sought to investigate the function of the Tr1 cell subset, identified through the expression
of CD49b, in a murine melanoma model. Surprisingly, we found that their presence seems
to be strongly influenced by the microenvironment they encounter. Whereas in the tumor
draining lymph nodes (TdLNs) this subset composes only around 4% of total CD4+ T
cells, in the tumor, they compose almost 30% of CD4+ T cells. On the other hand,
conventional Fopx3+ Tregs (cTregs) compose around 15% of CD4+ tumor-infiltrating T
cells, almost half of the percentage of Tr1 cells. Regarding their phenotype, we observed
that, although in lower levels than cTregs, around 50 and 30% of Tr1 cells express
Neuropilin-1 (Nrp1), in the TdLNs and in the tumor, respectively. Nrp1 is a VEGF co
receptor, which has been described to be essential for the stability and function of cTregs
suppressive phenotype and in tumor progression. Even more, we also observed that Tr1
cells show a differential pattern of expression of some regulatory molecules, compared to
cTregs: a higher median fluorescence of the ectonucleotidase CD73 in the tumor
microenvironment, contrary to what is seen in the TdLNs, and a lower production of IL
10 in the tumor. Furthermore, we found that the proliferative capacity of cTregs is
significantly higher to Tr1 cells, both in the tumor and in the TdLNs. Thus, our results
further highlight the possible differences between the immunosuppression mechanisms of
the Tregs subsets depending on the microenvironment (TdLNs versus tumor site).
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UCHILE/oai:repositorio.uchile.cl:2250/171116 |
| Date | January 2019 |
| Creators | Contreras Kallens, Pamina |
| Contributors | Pino Lagos, Karina, Sauma Mahaluf, Daniela |
| Publisher | Universidad de Chile |
| Source Sets | Universidad de Chile |
| Language | English |
| Detected Language | English |
| Type | Tesis |
| Rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Chile, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/cl/ |
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