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Determinação simultânea de biomarcadores de função renal em urina utilizando dispositivos analítico microfluídico em papel /

Orientador: Helena Redigolo Pezza / Banca: Emanuel Carrilho / Banca: Aline Theodoro Toci / Resumo: O nitrogênio está presente no organismo humano principalmente como constituinte das proteínas e ácidos nucleicos. O catabolismo dessas substâncias forma compostos nitrogenados conhecidos como não - proteicos. Dentre os vários compostos nitroge nados não - proteicos conhecidos, o ácido úrico e a creatinina podem ser utilizados como biomarcadores da função renal em humanos. A creatinina é proveniente da reação não enzimática de desidratação da creatina ou da desfosforilação da fosfocreatina durante o processo de contração muscular; sua concentração é utilizada como marcador clínico para avaliar a função renal. O ácido úrico é formado a partir do metabolismo das bases purínicas, por ser um composto pouco solúvel, sua deposição nas juntas das extremida des ou em outros tecidos moles gera o caso clínico conhecido como gota. Dessa forma, a creatinina e o ácido úrico são constantemente dosados em exames laboratoriais de urina. As metodologias utilizadas para a dosagem desses dois compostos vão desde os méto dos clássicos, até a utilização de HPLC, eletroforese e análise em fluxo, ou seja, técnicas pouco portáteis e algumas de alto custo. Assim, a proposta do trabalho é o desenvolvimento de dispositivos analíticos microfluídicos em papel (μPAD) para a determin ação de creatinina e ácido úrico. Foram selecionados os reagentes cromogênicos para os dois analitos em estudo. Sendo o ácido pícrico em meio alcalino o reagente cromogênico para a creatinina e o Fe 3+ e 1,10 - Fenantrolina para o ácido úrico. As condições ex perimentais das duas reações foram otimizadas utilizando o planejamento fatorial do tipo 2³ e o planejamento composto central. Foram otimizados os fatores concentrações dos reagentes e tempo de aquecimento. A curva de calibração para o ácido úrico foi repe titiva, com equação de reta igual a A = 0,01651 + 0,0003864 C AU, com... / Abstract: Nitrogen is present in human organism mainly as a nucleic acid and proteins constituent. The catabolism of these substances forms nitrogen compounds known as nonproteinaceous. Amon g the many nonproteinaceous nitrogen compounds, uric acid and creatinine can be used as biomarkers of renal function in humans. Creatinine is derived from a non - enzymatic reaction of creatine dehydretion or dephosphorylation of phosphocreatine in the muscl e contraction process; creatinine concentration is used as clinic marker to evaluate the renal function. Uric acid is formed from metabolism of purine bases and, by being a slightly soluble compound, its deposition in the joints of the extremities or other soft tissues creates a case known as gout. In this way, creatinine and uric acid are constantly dosed in urine laboratory exams. The methodologies used to determine these two compounds range from classic methods, to the used of HPLC, electrophoresis and i n flow analysis, in other words, slightly portable techniques and, some of them, very expensive. Thus, this work proposes the development of microfluidic paper - based analytical devices (μPAD) to determinate creatinine and uric acid. Chromogenic reagents we re selected for both analytes in study. Picric acid in alkaline medium was chose for creatinine determination and Fe 3+ and 1,10 - phenantroline were chose for uric acid. Experimental conditions were optimized for both reactions using 2 3 factorial design and a central composite design. The factores optimized were reagents concentration and time of heating. The analytical curve to uric acid were repetitive, with a line equation equal to A = 0,01651 + 0,00038764 C AU, with determination coefficient (R²) equal to 0,997, and limit of detection equal to 16,5 mg L - 1 and limit of quantification equal to 54,9 mg L - 1 . Of the interferents tested, only ascorbic acid was shown to be interfering the reaction and... / Mestre

Identiferoai:union.ndltd.org:UNESP/oai:www.athena.biblioteca.unesp.br:UEP01-000863805
Date January 2016
CreatorsRossini, Eduardo Luiz.
ContributorsUniversidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" Instituto de Química.
PublisherAraraquara,
Source SetsUniversidade Estadual Paulista
LanguagePortuguese, Portuguese
Detected LanguagePortuguese
Typetext
Format125 f. :
RelationSistema requerido: Adobe Acrobat Reader

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