Introduktion: Daratumumab är en monoklonal antikropp som används för att behandla patienter med multipelt myelom (MM), en typ av blodcancer som har sitt ursprung i B-lymfocyter. Daratumumab binder till CD38 som normalt uttrycks på erytrocyternas yta och ger upphov till panreaktivitet vid förenlighetsprövning, som kan maskera kliniskt signifikanta antikroppar. Ditiotreitol (DTT), ett reducerande lösningsmedel, denaturerar den extracellulära domänen av CD38 och därmed hämmar inbindning av daratumumab. DTT-behandling av testerytrocyter vid förenlighetsprövning möjliggör detektion av kliniskt relevanta alloantikroppar. Syfte: Att verifiera en metod för DTT-behandling av erytrocyter vid förenlighetsprövning, för att detektera alloantikroppar av klinisk relevans och lättare få fram blod till patienter som medicineras med Darzalex. Metod & materiel: I studien ingick två plasmaprover från patienter med daratumumab behandling. Testerytrocyterna behandlades med olika DTT mängd (80, 160 och 320 L). DTT-behandlade samt obehandlade testerytrocyter testades mot plasmaproverna, negativ kontroll (anti-K) och positiv kontroll (anti-C) vid olika dagar från tillredningsdatum. Resultat: Daratumumab interferens mot obehandlade testerytrocyter observerades. Reaktionen för samtliga DTT-behandlade testceller vid varje analystillfälle blev negativt, oavsett DTT mängd. Resultaten för den negativa kontrollen visade att det slog positivt vid DTT mängden 80 samt 160 µL och negativ vid 320 µL. Alla reaktioner för den positiva kontrollen var 4+ vid samtliga DTT mängder oavsett analysdag. Slutsats: DTT-behandling av erytrocyter inaktiverar CD38 som motverkar panreaktivitet vid serologiska analyser, för att upptäcka eventuella kliniskt signifikanta antikroppar hos patienter som behandlas med daratumumab. Den optimala DTT mängden är 320 µL/1 ml 1% testerytrocyt med upp till 15 dagars hållbarhet vid kylförvaring. / Introduction: Daratumumab is a monoclonal antibody used to treat patients with multiple myeloma (MM), a type of blood cancer that originates in B lymphocytes. Daratumumab binds to CD38, which is expressed on the surface of erythrocytes. This leads to panagglutination in compatibility testing and can mask clinically significant antibodies. Dithiothreitol (DTT), a reductant, denatures the extracellular domain of CD38, thereby inhibiting daratumumab from binding. DTT treatment of RBC-reagents enables the detection of clinically relevant alloantibodies. Purpose: To verify a method for DTT treatment of erythrocytes in compatibility testing, in order to detect alloantibodies of clinical relevance and to ensure that transfusion recipient with Darzalex medication receive compatible blood transfusion. Method: Two plasma samples from daratumumab treated patients were included. RBC-regents were treated with different amounts of DTT (80, 160 and 320 μL). DTT-treated and untreated RBC-reagents were tested against plasma samples, negative control (anti-K) and positive control (anti-C) on different days. Results: Daratumumab interference with untreated RBC-reagents were observed. DTT treated RBC-reagents however, showed negative reaction regardless of the amount of DTT used. Results for the negative control showed positive reaction with 80 and 160 µL DTT and negative at 320 µL. Reactions for the positive control were all 4+ no matter the amount of DTT and day it was analyzed. Conclusion: DTT treatment of erythrocytes inactivates CD38, which prevents panagglutination, to detect any clinically significant antibodies in patients with daratumumab treatment. The optimal DTT amount is 320 µL / 1 ml 1% RBC-reagents and a shelf life of up to 15 days when stored cold.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UPSALLA1/oai:DiVA.org:oru-92904 |
| Date | January 2021 |
| Creators | Ghilai, Merry |
| Publisher | Örebro universitet, Institutionen för hälsovetenskaper |
| Source Sets | DiVA Archive at Upsalla University |
| Language | Swedish |
| Detected Language | Swedish |
| Type | Student thesis, info:eu-repo/semantics/bachelorThesis, text |
| Format | application/pdf |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
Page generated in 0.0025 seconds