Arabidopsis thaliana, s’est adaptée à la variété des niveaux de Pi dans le sol en développant 9transporteurs de phosphates, membres de la famille PHT1, intervenant dans l’acquisition de cet ionpar les racines et sa translocation. Ces protéines révèlent une très forte homologie de séquence entre elles (plus que 61%). La présence de certains transporteurs de type PHT1 dans différents types d’organes ainsi que le chevauchement fréquent entre les divers membres de la famille PHT1 témoigne de la complexité de leurs rôles. De plus, leur redondance génétique et fonctionnelle empêche l’analyse de leur rôle spécifique. En vue de s’affranchir de ces obstacles, notre approche combine plusieurs stratégies génétiques avec l’insertion d’une construction RNAi inactivant plusieurs membres de la famille PHT1 et en particulier le cluster localisé sur le chromosome 5 (PHT1;1/1;2/1;3). Ces outils génétiques ont révélé aussi le fonctionnement des protéines PHT1 à la fois en tant que transporteurs à basse et à haute affinité, ce qui suggère que leur activité est contrôlée au niveau post-traductionnel. En cas de carence en Pi, ces lignées affichent des modifications physiologiques (biomasse, rendement,…) dues à une forte réduction affectant l’activité de l’influx en phosphate (80 à 96%). Ce travail suggère que la redondance génétique et les mécanismes de compensations pourraient protéger la plante de l’inactivation de PHT1. Il a aussi révélé que la perception systémique du Pi est déclenchée par des mécanismes en aval de l’activité des PHT1. / Arabidopsis thaliana absorb inorganic phosphate (Pi) from the soil through an active transport process mediated by the 9 members of the PHT1 family. These proteins share a high level of similarity (greater than 61%), with overlapping expression patterns. The resulting genetic and functional redundancy prevents the analysis of their specific roles. To overcome this difficulty, our approach combined several mutations with gene silencing to inactivate multiple members of the PHT1 family, including a cluster of genes localized on chromosome 5 (PHT1;1, PHT1;2 and PHT1;3). Physiological analyses of these lines established that these three genes, along with PHT1;4, are the main contributors to Pi uptake. Furthermore, PHT1;1 plays an important role in translocation from roots to leaves in high phosphate conditions. These genetic tools also revealed that some PHT1 transporters likely exhibit a dual affinity for phosphate, suggesting that their activity is posttranslationally controlled. These lines display significant phosphate deficiency-related phenotypes (e.g. biomass and yield) due to a massive (80 to 96%) reduction in phosphate uptake activities. These defects limited the amount of internal Pi pool, inducing compensatory mechanisms triggered by the systemic Pi starvation response. Such reactions have been uncoupled from PHT1 activity suggesting that systemic Pi sensing is most probably acting downstream of PHT1.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:theses.fr/2016AIXM4074 |
| Date | 25 November 2016 |
| Creators | Ayadi Robert, Amal |
| Contributors | Aix-Marseille, Nussaume, Laurent, Gargouri-Bouzid, Radhia |
| Source Sets | Dépôt national des thèses électroniques françaises |
| Language | French |
| Detected Language | French |
| Type | Electronic Thesis or Dissertation, Text |
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