Les anticorps anti-phospholipides (aPL), tels que les anticoagulants lupiques (LAC),
sont associés au développement récurrent de thromboses chez les patients atteints du lupus
érythémateux disséminé (LED). Il a été observé que des titres élevés d’auto-anticorps antilamine
B1 (anti-LB1), chez des patients porteurs de LAC, diminuent le risque de ces
manifestations thrombotiques. Toutefois, la relation existant entre la lamine B1 (LB1), les
anti-LB1 et la thromboprotection n’est toujours pas expliquée. Dans cette étude, nous avons
donc cherché à comprendre comment la LB1 et les anti-LB1 induisent cette
thromboprotection. Nous avons testé les effets d'anti-LB1 purifiés et de LB1 recombinante
sur l'activation des cellules endothéliales et des plaquettes. Nous avons été en mesure de
déterminer que la LB1, contrairement aux anti-LB1, possède une activité anti-plaquettaire. En
effet, la LB1 réduit l’activation et l’agrégation plaquettaires in vitro et in vivo. Cette activité
est due à une liaison directe de la LB1 aux plaquettes, suivie par une internalisation rapide
dans des vésicules de clathrine. Par co-immunoprécipitation, nous avons découvert que la
LB1 interagit avec le récepteur de l’insuline situé sur la membrane plaquettaire. La liaison de
la LB1 à ce récepteur entraîne vraisemblablement son internalisation et l'inhibition d'une des
cascades de signalisation normalement induite par le récepteur de l’insuline, menant
éventuellement à l’inhibition des fonctions plaquettaires. L’ajout d’anti-LB1 purifiés dans nos
expériences a permis d'augmenter de façon significative la persistance de la LB1 dans les
plaquettes, une observation confirmée par la détection de LB1 uniquement dans les lysats de
plaquettes prélevées chez des patients anti-LB1 positifs.
iv
Nos résultats suggèrent que la LB1 prend part aux mécanismes régulateurs des
processus d’hémostase chez des sujets sains et que la présence d’anti-LB1, chez les patients
lupiques, prolonge la persistance de cet auto-antigène dans les plaquettes, les empêchant ainsi
de s’activer. Ce mécanisme expliquerait la diminution du risque de thrombose chez les
patients LAC positifs porteurs d’anti-LB1 circulants. / Anti-phospholipid antibodies such as lupus anticoagulant antibodies (LAC) are
associated with recurrent thrombotic events in systemic lupus erythematosus (SLE) patients.
However, the risk of thrombosis in LAC positive patients is markedly reduced in the presence
of high titers of autoantibodies to lamin B1 (anti-LB1). To date, the implication of lamin B1
(LB1) and anti-LB1 in thromboprotection remains unclear. Our objective was to examine the
mechanism whereby LB1 and anti-LB1 induced thromboprotection. Functional platelet and
endothelial cell activation assays were used to determine the effects of recombinant LB1 and
affinity purified anti-LB1 on these two cell types. LB1, contrarily to anti-LB1, was found to
possess an intrinsic anti-platelet activity. This protein reduced the activation and aggregation
of platelets in vitro and in vivo. This activity was likely due to the direct binding of LB1 to
platelets, followed by its rapid internalization within clathrin coated-pits. Coimmunoprecipitation
revealed that LB1 interacted with the insulin receptor located within the
platelet membrane. The binding of LB1 to this receptor induced its internalization and
inhibited at least one of the phosphorylation cascade stimulated by the receptor, which in turn
inhibited platelet functions. The addition of affinity-purified anti-LB1 in our model markedly
increased the persistence of LB1 within platelets, a finding supported by the detection of LB1
only in platelets from anti-LB1 positive SLE patients.
Our results suggest that LB1 regulates haemostasis in normal subjects. The presence of
anti-LB1 in SLE patients prolongs the persistence of LB1 within platelets, thus possibly
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preventing further platelet activation. This mechanism likely explains the reduced risk of
thrombotic events in LAC positive SLE patients with circulating anti-LB1 autoantibodies.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:umontreal.ca/oai:papyrus.bib.umontreal.ca:1866/2807 |
| Date | 12 1900 |
| Creators | Christin-Piché, Marie-Soleil |
| Contributors | Raymond, Yves, Sénécal, Jean Luc |
| Source Sets | Université de Montréal |
| Language | French |
| Detected Language | French |
| Type | Thèse ou Mémoire numérique / Electronic Thesis or Dissertation |
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