<p>У оквиру ове докторске дисертације изведено је<br />испитивање различитих екстракционих поступака за<br />изоловање апигенина из цвета камилице, као и евалуација<br />биолошке активности добијених екстраката. Полазни<br />биљни материјал сачињавале су две групе латица<br />камилице: ферментисане и неферментисане (нативне).<br />Екстракција ферментисаних цветова је извођена применом<br />ултразвучне екстракције користећи етанол као екстрагенс,<br />а добијени екстракти су се одликовали изузетно високим<br />садржајем апигенина. Оптимизација екстракције је била<br />изведена применом методе одзивне површине. Применом<br />електрон-спин резонанце испитана је антирадикалска<br />активност екстраката. Додатно, фармаколошка вредност<br />добијених екстраката је потврђена и одређивањем њиховог<br />антимикробног и антипролиферативног потенцијала.<br />Нативни цветови камилице су екстраховани применом<br />различитих екстаркционих техника: микроталасне,<br />ултразвучне, Soxhlet екстракције као и екстракције<br />субкритичном водом. Eкстрaкција водом у субкритичном<br />стању се показала супериорнијом у односу на све остале<br />технике у погледу садржаја укупних фенола и флавоноида.<br />У циљу добијања екстраката са максималним садржајем<br />апигенина изведена је оптимизација овог екстракционог<br />процеса. Изоловање чистог апигенина је изведено из<br />екстракта добијеног под оптималним екстракцијом<br />условима (однос дрога:растварач 1:30, брзина мешања 3 Hz,<br />притисак 45 bar, температура 115ºC, време 30 мин,<br />концентрација модификатора 0,001 М) применом поступка<br />колонске хроматографије на стубу полиамида. Хемијски<br />профил као и садржај појединачних полифенолних<br />компонената у екстрактима добијеним на различитим<br />притисцима, температурама и уз присуство модификатора<br />различитих концентрација одређен је применом UHPLCDAD-<br />HESI-MS/MS. У свим анализираним екстрактима<br />детектован је велики број полифенолних компонената, док<br />је апигенин у свима био доминантно једињење. Садржај<br />апигенина у екстракту добијеном под оптималним<br />екстракционим условима је износио 1.700,34 mg/kg.<br />Применом седам различитих тестова извршена је<br />евалуација антиоксидативног и антирадикалског<br />потенцијала екстраката. Антимикробни потенцијал<br />екстраката је одређен за осам различитих микробних<br />линија. in vitro тестовима испитана је способност<br />инхибиције α-амилазе, α-глукозидазе и тирозиназе.<br />Деловањем на раст три хистолошки различите ћелијске<br />линије, испитана је антипролиферативна активност<br />екстраката добијених субкритичном водом.<br />Антимотилитетна активност обе групе екстраката<br />(ферментисаних и неферментисаних цветова) одређена је у<br />in vitro условима.</p> / <p>U okviru ove doktorske disertacije izvedeno je<br />ispitivanje različitih ekstrakcionih postupaka za<br />izolovanje apigenina iz cveta kamilice, kao i evaluacija<br />biološke aktivnosti dobijenih ekstrakata. Polazni<br />biljni materijal sačinjavale su dve grupe latica<br />kamilice: fermentisane i nefermentisane (nativne).<br />Ekstrakcija fermentisanih cvetova je izvođena primenom<br />ultrazvučne ekstrakcije koristeći etanol kao ekstragens,<br />a dobijeni ekstrakti su se odlikovali izuzetno visokim<br />sadržajem apigenina. Optimizacija ekstrakcije je bila<br />izvedena primenom metode odzivne površine. Primenom<br />elektron-spin rezonance ispitana je antiradikalska<br />aktivnost ekstrakata. Dodatno, farmakološka vrednost<br />dobijenih ekstrakata je potvrđena i određivanjem njihovog<br />antimikrobnog i antiproliferativnog potencijala.<br />Nativni cvetovi kamilice su ekstrahovani primenom<br />različitih ekstarkcionih tehnika: mikrotalasne,<br />ultrazvučne, Soxhlet ekstrakcije kao i ekstrakcije<br />subkritičnom vodom. Ekstrakcija vodom u subkritičnom<br />stanju se pokazala superiornijom u odnosu na sve ostale<br />tehnike u pogledu sadržaja ukupnih fenola i flavonoida.<br />U cilju dobijanja ekstrakata sa maksimalnim sadržajem<br />apigenina izvedena je optimizacija ovog ekstrakcionog<br />procesa. Izolovanje čistog apigenina je izvedeno iz<br />ekstrakta dobijenog pod optimalnim ekstrakcijom<br />uslovima (odnos droga:rastvarač 1:30, brzina mešanja 3 Hz,<br />pritisak 45 bar, temperatura 115ºC, vreme 30 min,<br />koncentracija modifikatora 0,001 M) primenom postupka<br />kolonske hromatografije na stubu poliamida. Hemijski<br />profil kao i sadržaj pojedinačnih polifenolnih<br />komponenata u ekstraktima dobijenim na različitim<br />pritiscima, temperaturama i uz prisustvo modifikatora<br />različitih koncentracija određen je primenom UHPLCDAD-<br />HESI-MS/MS. U svim analiziranim ekstraktima<br />detektovan je veliki broj polifenolnih komponenata, dok<br />je apigenin u svima bio dominantno jedinjenje. Sadržaj<br />apigenina u ekstraktu dobijenom pod optimalnim<br />ekstrakcionim uslovima je iznosio 1.700,34 mg/kg.<br />Primenom sedam različitih testova izvršena je<br />evaluacija antioksidativnog i antiradikalskog<br />potencijala ekstrakata. Antimikrobni potencijal<br />ekstrakata je određen za osam različitih mikrobnih<br />linija. in vitro testovima ispitana je sposobnost<br />inhibicije α-amilaze, α-glukozidaze i tirozinaze.<br />Delovanjem na rast tri histološki različite ćelijske<br />linije, ispitana je antiproliferativna aktivnost<br />ekstrakata dobijenih subkritičnom vodom.<br />Antimotilitetna aktivnost obe grupe ekstrakata<br />(fermentisanih i nefermentisanih cvetova) određena je u<br />in vitro uslovima.</p> / <p>In the frame of this thesis different extraction approaches for<br />apigenin isolation from chamomile ligulate flowers were<br />examined and biological activity of obtained extracts was<br />evaluated. Starting plant samples included fermented and<br />nonfermented (native) flowers.<br />Extraction of fermented flowers was performed by using<br />ultrasound-assisted extraction with ethanol. The concentration<br />of apigenin was high in obtained extracts. Optimization of the<br />extraction procedures was performed by response surface<br />methodology. Antiradical activity of observed extracts was<br />examined by electron-spin resonance spectroscopy.<br />Furthermore, pharmacological potential of obtained extracts<br />was confirmed by determining their antimicrobial and<br />antiproliferative activity.<br />Native chamomile flowers were extracted by different<br />extraction techniques: microwave, ultrasound, Soxhlet and<br />subcritical water extraction. Subcritical water extraction<br />showed to be superior in comparison to other applied techniques<br />in respect to total phenols and flavonoids content. Optimization<br />of the subcritical water extraction was directed to maximization<br />of apigenin content. Isolation of pure apigenin from extracts<br />obtained under optimal extraction conditions (sample-tosolvent<br />ratio 1:30, agitation rate 3 Hz, temperature 115ºC,<br />pressure 45 bar, extraction time 30 min) was performed by<br />preparative chromatography. Chemical profiles and content of<br />individual polyphenolic components in extracts obtained at<br />different pressures, temperatures, and with different<br />concentrations of a modifier was determined by UHPLC-DADHESI-<br />MS/MS. In all analyzed extracts the great number of<br />polyphenolic components was detected while apigenin was the<br />dominant compound in all extracts. Content of apigenin in the<br />extract obtained under optimal extraction condition was<br />1,700.34 mg/kg. Antioxidant and antiradical potential of<br />extracts was evaluated according to different mechanisms.<br />Antimicrobial potential of extracts was determined against eight<br />different microbial strains. Ability of extracts to inhibit α-<br />amylase, α-glucosidase and tyrosinase was determined by in<br />vitro assays. Antiproliferative activity of subcritical water<br />extracts was defined by testing their influence on the growth of<br />three histologically different cell lines.<br />Anti-intestinal motility activity of both group of extracts (native<br />and fermented) was determined by in vivo experiments.</p>
| Identifer | oai:union.ndltd.org:uns.ac.rs/oai:CRISUNS:(BISIS)101724 |
| Date | 02 December 2016 |
| Creators | Cvetanović Aleksandra |
| Contributors | Švarc-Gajić Jaroslava, Zeković Zoran, Vesna Nikolić |
| Publisher | Univerzitet u Novom Sadu, Tehnološki fakultet Novi Sad, University of Novi Sad, Faculty of Technology at Novi Sad |
| Source Sets | University of Novi Sad |
| Language | Serbian |
| Detected Language | Unknown |
| Type | PhD thesis |
Page generated in 0.0069 seconds