Mestrado em Medicina e Oncologia Molecular / Master Degree Course in Molecular and Oncology Medicine / Os oncocitomas renais são constituídos por células cujo citoplasma contém
numerosas mitocôndrias, morfológica e bioquimicamente anormais (células oxifílicas,
oncocíticas ou células de Hürthle). Tumores com fenótipo oncocítico, condicionado pela
acumulação de mitocôndrias, podem ocorrer em diversos órgãos, preferencialmente em
tecidos com baixo índice proliferativo. Na tireóide, onde são denominados tumores de
células de Hürthle, foram identificadas alterações do ADN mitocondrial (mtDNA) e de
um gene nuclear que codifica uma proteína mitocondrial (GRIM-19), com diferenças
significativas em comparação com tumores não oncocíticos. Nos oncocitomas renais
não há, até à data, estudos que descrevam a ocorrência destas alterações.
A acumulação de mitocôndrias no citoplasma das células pode ser consequência
de uma alteração primária no mtDNA que codifica enzimas mitocondriais, ou
provocada por mutações no ADN nuclear (nDNA) que codifica proteínas mitocondriais.
Na tentativa de perceber melhor a tumorigénese dos tumores oncocíticos em
geral e dos oncocitomas renais em particular, estudámos uma série de 14 oncocitomas
renais e o parênquima renal não neoplásico adjacente, no que diz respeito a algumas
alterações do mtDNA e do nDNA. Foi efectuada a reavaliação do material anátomopatológico
e fez-se extracção de ADN dos tecidos obtidos após microdissecção do
material incluído em parafina. Foram pesquisadas alterações do mtDNA como a
delecção comum, mutações na região D-loop e nas subunidades 6 e 8 do complexo V
(ATPase). As alterações do GRIM-19 foram avaliadas por estudo imuno-histoquímico.
A delecção comum foi detectada em 78,6% dos oncocitomas renais e em 50%
dos casos também no parênquima não neoplásico. Verificou-se instabilidade na região
não codificadora D-loop em 42,9% dos tumores. Foram identificadas mutações
somáticas da ATPase 6 e/ou 8 em 14,3% dos casos. A expressão de GRIM-19 nos
oncocitomas renais foi discretamente menos intensa do que a observada nas células dos
túbulos proximais adjacentes.
As alterações encontradas no mtDNA de oncocitomas renais não se afastam
substancialmente das observadas anteriormente no estudo de tumores de células de
Hürthle da tireóide, tanto no que diz respeito ao tipo de alterações, como à sua
frequência.
Estudo das alterações do ADN mitocondrial e do GRIM-19 em oncocitomas renais:
Comparação com os tumores de células de Hürthle da tireóide
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A homogeneidade celular fenotípica dos oncocitomas renais e a notável
transformação oncocítica observada no parênquima renal não neoplásico na maioria
(12/14) dos casos estudados leva a presumir que o evento carcinogénico deverá ter
ocorrido numa célula com anomalia prévia do mtDNA ou do nDNA que codifica
enzimas mitocondriais. Esta hipótese é favorecida pela existência da delecção comum
no parênquima renal não neoplásico numa maior percentagem de casos (50%) que a
observada no parênquima não neoplásico tireoideu nos casos de tumores de células de
Hürthle (25-33%). É possível que a delecção comum seja um marcador das alterações
que ocorrem na biogénese mitocondrial nestas condições.
As mutações na ATPase 6 parecem ocorrer preferencialmente nos tumores de
células oxifílicas, pelo menos do rim e da tireóide. Os nossos resultados não favorecem
a existência de um papel determinante para a instabilidade na região não codificadora
D-loop na transformação oncocítica, apesar dessa alteração estar presente em 42,9% dos
tumores. É provável que as mutações na região D-loop resultem, sobretudo, da
produção aumentada de espécies reactivas de oxigénio pelas células tumorais em geral.
A função principal do GRIM-19 na tumorigénese renal não parece estar
relacionada com a cadeia respiratória mitocondrial, ou pelo menos, não parece estar
relacionada com o fenótipo oncocítico, uma vez que a expressão de GRIM-19 está
significativamente mais afectada nos carcinomas de células renais que nos oncocitomas. / Renal oncocytomas are composed by cells whose cytoplasm is packed with an
abnormally high mumber of biochemically and morphologically deficient mitochondria
(oxyphilic, oncocytic or Hürthle cells). Tumours with an oncocytic fenotype, resulting
from mitochondria accumulation, may occur in many organs, predominantly in tissues
with low proliferation index. In the thyroid, where they are called Hürthle cell tumours,
our group has identified alterations in the mitochondrial DNA (mtDNA) and in a
nuclear gene that encodes for a mitochondrial protein (GRIM-19), with significant
differences when compared to non-oncocytic tumours. Regarding renal oncocytomas
there are no publications describing the occurrence of such alterations.
The mitochondria accumulation in the cytoplasm of cells may be the result of a
primary alteration in mtDNA that encodes for mitochondrial enzymes, or it can be a
consequence of mutations in nuclear DNA (nDNA) that encodes for mitochondrial
proteins.
In an attempt to contribute to a better understanding of the tumourigenesis of
oxyphilic cell tumours in general and of renal oncocytomas in particular, we studied 14
renal oncocytomas and the respective non neoplastic parenchyma regarding some
mtDNA and nDNA alterations. The cases were reviewed and DNA extraction was
performed in microdissected tissues obtained from the paraffin-embedded material. We
searched for mtDNA alterations such as the common deletion, mutations in the D-loop
non codifying region and in the subunits 6 and 8 of complex V (ATPase). GRIM-19
alterations were evaluated by immunohistochemistry.
The mtDNA common deletion was detected in 78.6% of renal oncocytomas and
in 50% of the cases in the respective non neoplastic parenchyma. Instability in the Dloop
region was detected in 42.9% of the tumours. We identified somatic mutations in
ATPase 6 and/or 8 in 14,3% of the cases. GRIM-19 expression was slightly less intense
in the oncocytomas than in the adjacent proximal renal tubules.
Our results do not differ substantially from those obtained in Hürthle cell
tumours of the thyroid, namely in the kind of alteration and its relative frequency.
The homogenous cellular fenotype of renal oncocytomas and the obvious
oncocytic transformation observed in the non neoplastic renal parenchyma in most of
the studied cases (12/14) indicates that the carcinogenic event must have occurred in a
Estudo das alterações do ADN mitocondrial e do GRIM-19 em oncocitomas renais:
Comparação com os tumores de células de Hürthle da tireóide
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cell with a previous anomaly of mtDNA and/or nDNA that encodes for mitochondrial
enzymes. This hypothesis is favoured by the presence of the common deletion in a
higher percentage of the non-neoplastic parenchyma of oncocytomas (50%) than in nonneoplastic
thyroid parenchyma in the cases of Hürthle cell tumours (25-33%). It is
possible that the common deletion may be an indirect biomarker of the alterations
occurring in mitochondrial biogenesis in these conditions.
Mutations in ATPase 6 seem to occur predominantly in oxiphylic cell tumours,
at least in kidney and thyroid. Our results do not favour the existence of a determinant
role for the instability of the non codifying D-loop region in the oncocytic
transformation, despite finding such alterations in 42.9% of the tumours. It is probable
that mutations in the D-loop region are mainly the result of increased reactive oxygen
species production by tumoural cells in general.
The main role of GRIM-19 in renal tumourigenesis does not seem to be related
to the mitochondrial respiratory chain, or at least, does not seem to be related with
oncocytic features, since the expression of GRIM-19 is significantly more affected in
renal cell carcinomas than in oncocytomas.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:up.pt/oai:repositorio-aberto.up.pt:10216/21976 |
| Date | 12 March 2008 |
| Creators | Portugal, Raquel Vilar |
| Publisher | Faculdade de Medicina da Universidade do Porto, FMUP |
| Source Sets | Universidade do Porto |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Unknown |
| Type | Dissertação |
| Format | application/pdf, application/pdf, application/pdf |
| Rights | openAccess |
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