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Process development for the obtention and use of recombinant glycosidases: expression, modelling and immobilisation

El objetivo general de la presente tesis doctoral es el desarrollo de herramientas para la
obtencion, produccion y aplicacion de dos enzimas glicosidicas: �¿-L-arabinofuranosidasa
proveniente del hongo Aspergillus niger (Abf) y �À-D-glucosidasa (Bgl), proveniente de la
levadura Candida molischiana. Estas hidrolasas se emplean en la liberacion de azucares en
procesos de conversion de biomasa y en la industria alimentaria, pero tambien en la sintesis de
aminoglicosidos, glicoconjugados y oligosacaridos, compuestos de alto valor anadido para la
industria quimico-farmaceutica. Las enzimas se han expresado en la levadura metilotrofica
Pichia pastoris, y se han purificado para caracterizar sus propiedades bioquimicas. Asimismo,
se ha comprobado su capacidad para catalizar reacciones de transglicosilacion con alto
rendimiento. En relacion a su produccion, se ha establecido y validado un modelo basado en
restricciones del metabolismo de Pichia pastoris, evaluando su consistencia mediante analisis
de flujos metabolicos posibilistico. El modelo permite estimar la tasa de crecimiento y la
distribucion de flujos intracelulares a partir de unos pocos flujos extracelulares medidos
experimentalmente. Adicionalmente, el modelo se ha extendido para estimar la productividad
de proteina recombinante, y se ha empleado para analizar diferentes condiciones de cultivo de
las cepas transgenicas que sobreproducen las enzimas Abf y Bgl. Finalmente, las enzimas se
han inmobilizado en organosilicas bimodales de la familia UVM-7. Los biocatalizadores
resultantes se han caracterizado bioquimica y fisico-quimicamente y se han evaluado en
diferentes aplicaciones de interes biotecnologico. / Tortajada Serra, M. (2012). Process development for the obtention and use of recombinant glycosidases: expression, modelling and immobilisation [Tesis doctoral no publicada]. Universitat Politècnica de València. https://doi.org/10.4995/Thesis/10251/16800 / Palancia

Identiferoai:union.ndltd.org:upv.es/oai:riunet.upv.es:10251/16800
Date23 July 2012
CreatorsTortajada Serra, Marta
ContributorsPicó Marco, Jesús Andrés, Ramon Vidal, Daniel, Universitat Politècnica de València. Departamento de Ingeniería de Sistemas y Automática - Departament d'Enginyeria de Sistemes i Automàtica
PublisherUniversitat Politècnica de València
Source SetsUniversitat Politècnica de València
LanguageEnglish
Detected LanguageSpanish
Typeinfo:eu-repo/semantics/doctoralThesis, info:eu-repo/semantics/acceptedVersion
SourceRiunet
Rightshttp://rightsstatements.org/vocab/InC/1.0/, info:eu-repo/semantics/openAccess

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