Stress can be defined as a condition in which the dynamic equilibrium of the body is disturbed and several studies have demonstrated the action of some corticosteroids modulating stress situations, such as reproduction. However, the role of corticosteroids in fish reproduction can be either positive or deleterious, depending on many variables. In the Astyanax genus, the same stress stimulus can successfully induce the reproduction in Astyanax altiparanae, but not in other species of the same genus. Therefore, the aim of this study was to analyze cortisol and progestogens plasma levels and receptor gene expression in the ovaries of A. altiparanae, a teleost species that successfully reproduce using crowding and water level drawdown as stimulus. Three experimental groups were considered: Stress (high stocking density and water level drawdown); human chorionic gonadotropin (hCG, a positive control); and Saline (a control group). Females were sampled at three different moments of the artificial reproduction experiment, initial, intermediary and at spawning. Indices of spawning performance as, fertilization rate, Gonadosomatic Index (GSI), as well as histological analysis of the ovaries were carried out. 17α-hydroxiprogesterone (17 OHP) and cortisol (CORT) levels were measured in plasma by ELISA. Additionally, the ovarian gene expression of CORT and 17 OHP receptors (CR and PR) were carried out by Real-time quantitative PCR. Females from Stress and hCG groups released a larger volume of eggs when compared with females from the Saline (Control) group. Females from Stress group presented a decrease in GSI and ovaries mass at spawning, and many post ovulatory follicles (POFs) were present in the ovaries after spawning. At the intermediary sampling, plasma levels of CORT increased in females from the Stress group, but not in the hCG and Saline groups. 17 OHP levels did not change during the experiment. PR gene was more expressed in females from hCG group throughout the experiment, but CR gene expression did not change. We suggest a possible role of CORT as an inducing agent in ovulation and/or spawning of A. altiparanae. CR and PR did not seem to be the candidates for triggering ovulation, so the relationship between the derivative of progesterone (17,20DHP) should be deeper studied, as well as the role of CORT and different progestagens in A. altiparanae reproduction / O estresse pode ser definido como uma condição na qual o equilíbrio dinâmico do corpo é perturbado e muitos estudos têm demonstrado a ação de alguns corticosteroides modulando situações de stress, tal como a reprodução. No entanto, o papel dos corticosteroides na reprodução de peixes pode ser positivo ou deletério, dependendo de muitas variáveis. No gênero Astyanax, o mesmo estímulo de estresse pode induzir com sucesso a reprodução em A. altiparanae, mas não em outras espécies do mesmo gênero. Portanto, o objetivo deste estudo foi analisar os níveis de cortisol e progestágenos no plasma e a expressão dos receptores destes esteroides nos ovários de A. altiparanae, espécie de teleósteo que consegue se reproduzir com sucesso usando o aumento da densidade e variação no nível da água como um estímulo. Três grupos experimentais foram considerados: Estresse (alta densidade de estocagem e intenso fluxo de água); Gonadotropina Coriônica Humana (hCG, um controle positivo); e Salina (grupo controle). As fêmeas foram amostradas em três diferentes momentos do experimento de reprodução artificial, inicial, intermediário e na desova. Índices de desempenho de desova como, taxa de fertilização, Índice Gonadossomático (IGS), bem como a análise histológica dos ovários foram considerados. Os níveis de 17α-hydroxiprogesterone (17 OHP) e cortisol (CORT) foram medidos em amostras de plasma por ELISA. Além disso, a expressão de genes de receptores de CORT (CR) e 17 OHP (PR) foram analisadas nos ovários por qPCR. Fêmeas dos grupos Estresse e hCG desovaram um volume maior de ovos quando comparadas às fêmeas do grupo Salina (controle). As fêmeas do grupo Estresse apresentaram também uma redução nos valores do IGS e na massa dos ovários no momento da desova, e muitos folículos pós - ovulatórios estavam presentes nos ovários após a desova. Na amostragem do período intermediário, os níveis plasmáticos de CORT aumentaram nas fêmeas do grupo de Estresse, mas não nos grupos de hCG e Salina. A concentração de 17OHP não se alterou durante o experimento ou entre os grupos. O PR foi mais expresso em fêmeas do grupo hCG ao longo do experimento, e a expressão do CR não se alterou. Sugerimos um possível papel de CORT como um agente indutor na ovulação e / ou de desova de A. altiparanae. No entanto, CR e PR não parecem ser os candidatos para desencadear a ovulação, de modo que a relação entre receptores derivados PR (17,20DHP) devem ser mais profundamente estudados, bem como a efetiva ação de CORT e diferentes progestágenos na reprodução de A. altiparanae
| Identifer | oai:union.ndltd.org:usp.br/oai:teses.usp.br:tde-14012016-161218 |
| Date | 25 August 2015 |
| Creators | Parreira, Walquiria da Silva Pedra |
| Contributors | Whitton, Renata Guimarães Moreira |
| Publisher | Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP |
| Source Sets | Universidade de São Paulo |
| Language | English |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | Dissertação de Mestrado |
| Format | application/pdf |
| Rights | Liberar o conteúdo para acesso público. |
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