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[en] MICROSCOPY OF BIOFILMS FORMED ON A METALLIC SUBSTRATE IN THE PRESENCE OF OILY FLUIDS IN STATIC AND DYNAMIC SYSTEMS / [pt] MICROSCOPIA DE BIOFILMES EM SUBSTRATO METÁLICO FORMADO EM SISTEMAS ESTÁTICO E DINÂMICO NA PRESENÇA DE FLUIDO OLEOSOKARLA DE AVELLAR MOTA 12 January 2018 (has links)
[pt] Este trabalho teve por objetivo avaliar a morfologia de biofilmes, formados em
superfície de aço API 5L X80 submetida a um fluido com baixo BSW (Basic Sediment
Water), ou seja, baixo teor de água em óleo, através de análise por Microscopia
Eletrônica de Varredura (MEV), determinar a cinética e quantificar os grupos
bacterianos de formação destes biofilmes, e avaliar a biocorrosão causada por estes
microrganismos. Foram realizadas alterações no protocolo original de preparo de
amostras, com a finalidade de obter melhor definição das morfologias avaliadas.
Realizaram-se estudos dinâmicos (looping) e em condições estáticas, com e sem a
adição de agente biocida. Utilizando-se como fluido de processo o óleo coletado no
terminal da Petrobras em Barra do Furado que tem como característica um BSW de
aproximadamente 1 por cento de água. Para alcançar os objetivos descritos foram quantificadas
bactérias sésseis (bactérias facultativas heterotróficas, bactérias precipitantes do ferro,
bactérias anaeróbias heterotróficas e bactérias redutoras de sulfato) através da técnica do
número mais provável (NMP). A intensidade do processo corrosivo foi avaliada através
da análise dos pites formados nos cupons por microscopia óptica. A seqüência de
fixação com alteração do protocolo inicial, permitiu uma melhor preservação estrutural
do biofilme obtendo-se assim imagens com melhor resolução, tendo em vista que a
fixação primária com glutaraldeído fixa principalmente proteínas pelo estabelecimento
de ligações divalentes com grupamento amino, e a pós-fixação em tetróxido de ósmio
reage com os lipídios. Quanto a cinética, observou-se também que na presença de
fluido oleoso, a formação do biofilme só é detectada após 15 dias de exposição. A
adição do agente biocida inibiu o crescimento do biofilme, não sendo detectada a
presença de células cultiváveis após 7 dias em contato com o fluido contendo o agente
químico. / [en] This study aims to evaluate the morphology of biofilms formed on the surface of API 5L X80 steel exposed to a low BSW (Basic Sediment Water) fluid comprising oil of a low water content. The analisys was performed using scanning electron microscopy (SEM) in order to determine the formation kinetics, to quantify and identify the bacterial groups present as the film formed, and to evaluate the biocorrosion caused by these organisms. Modifications were made to the original sample preparation protocol,
in order to better define the film morphologies. Studies were undertaken applying either static or dynamic (looping) conditions, bith with and without the addition of biocides. The process fluid used was oil collected from the Petrobras Barra do Furado Terminal, characterized by its 1 percent BSW. The evaluation was performed quantifying the sessile bacteria present in the film (heterotrophic bacteria, iron bacteria, anaerobic bacteria e sulphate reducing bacteria) via the Most Probable Number (MPN) technique. The intensity of the corrosion process was determined by the analysis of pits forme in the testpieces, by optical microscopy. The application of a sample fixation sequence, in addition to modifications of the inicial sample preparation protocol, permitted the improved preservation of the biofilm structures, thereby permitting higher resolution images. The primary fixing agent, containing gluteraldehyde, principally fixes proteins,
by establishing divalent bonds with amino groups, while the post-fixation stage with osmium tetroxide invloves reactions with lipid groups.With regard to the film deposition kinetics, it was observed that biofilm formation could only be detected after 15 day s exposure to the oily fluid. The addition of a biocide, inhibited the growth of the film, no cultivatable cells being present after 7 days contact with the treated fluid.
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