1 |
[en] PROTEOMIC ASPECTS AND TRACE-ELEMENT ACCUMULATION IN FISH BILE: POTENTIAL BIOLOGICAL MARKER FOR ENVIRONMENTAL EXPOSURE? / [pt] ASPECTOS PROTEÔMICOS E DETERMINAÇÃO DE ELEMENTOS-TRAÇO EM BÍLIS DE PEIXE: POTENCIAL MARCADOR BIOLÓGICO DE EXPOSIÇÃO AMBIENTAL?RACHEL ANN HAUSER DAVIS 01 June 2012 (has links)
[pt] A bílis de peixe é um fluido biológico com grande potencial como biomarcador de exposição ambiental a metais e misturas complexas. Este trabalho verificou o potencial desta matriz em situações de contaminação ambiental por metais e analisou aspectos proteômicos. Duas espécies de peixe (Mugil liza – Tainhas, e Tilapia rendalli – Tilápias) foram coletadas de diferentes locais. Indivíduos de tilápia foram expostos a concentrações sub-letais de Cu em laboratório. A bílis foi analisada com relação ao seu conteúdo de elementos-traço (Cd, Cu, Pb, Zn, Ni, Mn), e testes estatísticos demonstram que esta matriz pode ser utilizada para biomonitoramento de exposição de metais ao invés do fígado, sendo mais vantajosa que esta última por ser uma matriz menos complexa, o que facilita o seu pré-tratamento, além de não haver necessidade de sacrificar o animal. Diferentes protocolos de clean-up foram testados com objetivo de analisar a bílis por eletroforese 1D e 2D e zimografias para a detecção de enzimas. O protocolo final de clean-up inclui sonicação, centrifugação, deslipidificação e dessalinização. A presença de metalotioneínas foi analisada nesta matriz, através de eletroforeses 1D, 2D, espectrofotometria e SEC-HPLC-ICP-MS, e foi verificada que existe realmente expressão destas proteínas na bílis, inclusive com o mesmo comportamento reportado no fígado, de expressão aumentada em situações de contaminação ambiental. Também foi verificada a existência de metaloproteases de matriz na bílis através de zimografias gelatinolíticas, que também apresentaram potencial biomarcador de contaminação ambiental, pois algumas bandas gelatinolíticas estiveram presentes apenas em um local contaminado quando comparado a um lugar controle. Este trabalho verificou a existência de dois biomarcadores protéicos em bílis de peixe, um específico à contaminação por metais (metalotioneínas) e um não-específico (metaloproteases de matriz), além da possibilidade de uso da bílis de peixe como biomarcador à exposição a metais pela determinação das concentrações de elementos-traço nesta matriz. / [en] Fish bile is a biological fluid with great potential as a biomarker of environmental exposure to metals and complex mixtures. This study verified the potential of this matrix in environmental contamination situations by metals and analysed proteomic aspects. Two fish species (Mugil liza – mullets, and Tilapia rendalli – tilapias) were sampled from different locations. Tilapia individuals were exposed to sub-lethal Cu concentrations in the laboratory. Bile was analyzed regarding trace-element concentrations (Cd, Cu, Pb, Zn, Ni, Mn), and statistical techniques indicate that this matrix can be used in biomonitoring for metal exposure instead of liver, being more advantageous than the latter, since this is a less complex matrix, leading to easier pre-treatment, besides the possibility of not having to sacrifice the animal. Different clean-up protocols were tested with the aim of analysing bile by 1D and 2D electrophoresis and zymographies for protein and enzyme detection. The final clean-up protocol consists of sonication, centrifugation, delipidation and desalting. The presence of metallothioneins was analyzed in this matrix by 1D and 2D electrophoresis, spectrophotometry and SEC-HPLC-ICP-MS, and it was verified that there really is metallothionenin expression in bile, showing similar behaviour to that reported in liver, of increased expression in environmental contamination situations. We also verified the existence of matrix metalloproteases in bile by gelatinolinic zymographies, and these also showed potential as biomarkers for environmental contamination, since some gelatinolinic bands were present only in a contaminated site in comparison to a reference location. This study verified the existence of two protein biomarkers in fish bile, one specific to metal contamination (metallothioneins) and one non-specific (matrix metalloproteinases), besides the possibility of utilizing fish bile as a biomarker to metal exposure by the determination of trace-elements in this matrix.
|
2 |
[en] DETERMINATION OF METALS (CU, FE, ZN, PB, CD AND NI) IN TISSUES OF MARINE ORGANISMS FROM ILHA GRANDE BAY, RJ, BRAZIL / [pt] DETERMINAÇÃO DE METAIS (CU, FE, ZN, PB, CD E NI) EM TECIDOS DE ORGANISMOS MARINHOS DA BAÍA DE ILHA GRANDE, RJ, BRASILRAQUEL TEIXEIRA LAVRADAS 05 October 2012 (has links)
[pt] Neste estudo, foram determinadas as concentrações de Cu, Fe, Zn, Cd, Pb e
Ni no tecido muscular e fígado de três espécies de peixe (Mugil liza – tainha,
iliófago; Micropogonias furnieri – corvina, carnívoro e Trichiurus lepturus –
peixe espada, piscívoro), no tecido muscular de uma espécie de camarão
(Farfantepenaeus brasiliensis – camarão rosa, onívoro) e também, no tecido
muscular, vísceras e ovos de uma espécie de siri (Callinectes spp. – siri azul,
onívoro) coletados na Baía da Ilha Grande. As concentrações dos elementos foram
determinadas por espectrometria de massa com fonte de plasma indutivamente
acoplado (ICP-MS). A metodologia analítica apresentou ótima exatidão e precisão
quando comparada com amostras certificadas (DORM-3 e TORT-2). As
concentrações de Cu, Zn, Cd, Ni e Pb apresentaram-se abaixo dos limites
estabelecidos pela legislação brasileira e americana para a ingestão humana de
pescado. As maiores concentrações de Cu, Fe, Zn, Cd, Ni e Pb foram observadas
nos crustáceos. Nos peixes, as maiores concentrações dos elementos analisados
foram observadas no fígado, e no siri, nas vísceras. O sexo dos indivíduos não
influenciou no acúmulo dos elementos para os peixes, porém influenciou na
acumulação de Cu, Fe, Zn, Cd e Ni no siri. Nos peixes, a maioria dos elementos
não apresentou correlação com o comprimento dos indivíduos, com exceção do
Pb, que apresentou correlação negativa na tainha e na corvina, e do cádmio, que
apresentou correlação negativa na corvina. Nos crustáceos, alguns elementos
também apresentaram correlação negativa com estes parâmetros, indicando que,
tanto nos peixes quanto nos crustáceos, estes elementos não foram acumulados ao
longo do crescimento. As concentrações encontradas foram diferentes nas
estações seca e chuvosa. / [en] In this study the concentrations of Cu, Fe, Zn, Cd, Pb and Ni were
determined in muscle tissue and liver of three fish species (Mugil liza – mullet,
illiophagus; Micropogonias furnieri – croaker, carnivorous, and Trichiurus
lepturus – cutlassfish, piscivore), in the muscle tissue of a shrimp species
(Farfantepenaeus brasiliensis – pink shrimp, omnivore) and in muscle tissue,
entrails and eggs of a soft crab (Callinectes spp. – siri azul, omnivore) sampled
from the Ilha Grande Bay. The concentrations of the elements were determined by
inductively coupled plasma mass spectrometry (ICP-MS). The methodology
showed good accuracy and precision when tested with certified reference
materials (DORM-3 and TORT-2). The concentrations of Cu, Zn, Cd, Ni and Pb
were below the limits established by the Brazilian and American legislation for
human ingestion of fish products. The highest concentrations of Cu, Fe, Zn, Pb,
Cd and Ni were found in the crustacean samples. In fish, the highest
concentrations were observed in the liver and, in the soft crab samples, in the
entrails. Sex did not influence element accumulation in fish, but influenced the
accumulation of Cu, Fe, Zn, Cd and Ni in the soft crab. In fish, most elements did
not show any correlation to length and weight, with the exception of Pb, which
showed negative correlations in mullet and croaker and Cd which showed
negative correlations in croaker. In crustaceans, some elements also presented
negative correlations to these parameters, indicating that both in fish and
crustaceans these elements are not accumulated during organism growth. The
concentrations of the elements analyzed were statistically different in the dry and
rainy seasons.
|
Page generated in 0.0418 seconds