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Avaliação da atividade citotóxica de subfrações do látex de Euphorbia umbellata (Pax) Bruyns e eufol

Cruz, Luiza Stolz 03 March 2017 (has links)
Submitted by Eunice Novais (enovais@uepg.br) on 2018-03-12T18:21:00Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Luiza Stolz Cruz.pdf: 10331435 bytes, checksum: 9b1d4ec95714f86c9315354c7d388689 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-12T18:21:00Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Luiza Stolz Cruz.pdf: 10331435 bytes, checksum: 9b1d4ec95714f86c9315354c7d388689 (MD5) Previous issue date: 2017-03-03 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Euphorbia umbellata (Pax) Bruyns tem seu látex utilizado, etnofarmacologicamente, para tratamento de câncer, incluindo leucemias. Uma doença maligna que atinge os leucócitos, com alta incidência, sendo o tipo de câncer mais comum na infância. O tratamento quimioterápico é, na maioria dos casos, o mais recomendado, mas apresenta-se como terapia muito agressiva e com diversos efeitos colaterais. Por conseguinte, o objetivo deste trabalho foi o de avaliar o potencial citotóxico da fração hexano do látex de Euphorbia umbellata suas subfrações e da substância isolada, eufol, frente a linhagens modelo de leucemia. Para tanto as células, Jurkat e HL-60, foram tratadas por 72 horas com a fração hexano (1,25-75 μg/mL), subfrações éter de petróleo, diclorometano, etanol e metanol (1,25-75 μg/mL) e com o eufol (10-50 μg/mL), sendo sua viabilidade celular avaliada pelo ensaio de redução do MTT ao final deste período. Para a subfração diclorometano (mais ativa) foi avaliada a viabilidade celular no período de 24 e 48 horas, além de ter sido determinado o índice de seletividade. Cabe ressaltar que a fração hexano e as subfrações foram obtidas por fracionamento em extrator de Soxhlet, enquanto o eufol, por precipitação ácida, seguida de cromatografia em coluna, e sendo identificado por ressonância magnética nuclear e espectrometria de massas. A fração hexano e as subfrações resultantes foram analisadas por cromatografia gasosa acoplada ao espectrômetro de massas. A avaliação cromatográfica das subfrações permitiu sugerir 10 substâncias, os triterpenos: eufol; lanosterol; cicloartenol; tirucalol; taraxasterol e lupeol, os diterpenos: forbol-12,13,20- triacetato; 4-β forbol e 3-desoxo-3- 16-dihidroxi-12-desoxiforbol-3-13-16-20- tetracetato, e o esteroide sitosterol. Como resultado do ensaio citotóxico obteve-se, para a fração hexano uma CI50 de 0,061 ± 1,226 μg/mL para as células HL-60 e 4,624 ± 1,088 μg/mL para células Jurkat; para o eufol uma CI50 de 21,031 ± 1,778 μg/mL (HL-60) e 35,925 ± 5,011 μg/mL (Jurkat). Dentre as subfrações a diclorometano apresentou o melhor perfil de resposta com valores de 0,005±0,098 μg/mL (HL-60) e 0,200±0,957 μg/mL (Jurkat), revelando que o tratamento é tempo dependente. Ademais a subfração diclorometano mostrouse seletiva para o tratamento de leucemia com índices de seletividade superior a 2. Portanto, conclui-se que a subfração diclorometano é a promissora para o tratamento de leucemia, possivelmente por ação sinérgica dos terpenos nela presente. / Euphorbia umbellata (Pax) Bruyns has its latex used, ethno-pharmacologically, for the treatment of cancer, including leukemias. A malignant disease that affects leukocytes, with high incidence, being the most common type of cancer in childhood. Chemotherapy treatment is, normally, the most recommended, but it presents as very aggressive therapy and with several side effects. Therefore, the objective of this work was to evaluate the cytotoxic potential of the hexane fraction of Euphorbia umbellata latex, the subfraction of that and the isolated substance, euphol, against leukemia model lines. For this, the cells, Jurkat and HL-60, were treated for 72 hours with the hexane fraction (1.25-75 μg/mL), subfractions petroleum ether, dichloromethane, ethanol and methanol (1.25-75 μg/mL), and euphol (10-50 μg/mL), and their cell viability was evaluated by the assay of MTT reduction at the end of this period. For the dichloromethane subfraction (the most active), the cell viability was evaluated in the period of 24 and 48 hours, in addition, the selectivity index was determined. It should be noted that the hexane fraction and subfractions were obtained by fractionation in Soxhlet extractor, while euphol by acid precipitation, followed by column chromatography, and being identified by nuclear magnetic resonance and mass spectrometry. The hexane fraction was partitioned and the resulting subfractions were analyzed by gas chromatography coupled to the mass spectrometer. The chromatographic evaluation of the subfractions allowed to suggest 10 substances, the triterpenes: euphol; lanosterol; cycloartenol; tirucallol; taraxasterol and lupeol, the diterpenes: phorbol-12,13,20-triacetate; 4- β-phorbol and 3-deoxo-3-16-dihydroxy-12-deoxyphorbol-3-13-16-20-tetracetate, and the steroid sitosterol. As a result of the cytotoxic assay, an IC50 of 0.061 ± 1.226 μg/mL was obtained for HL-60 cells and 4.624 ± 1.088 μg/mL for Jurkat cells; and for euphol an IC50 of 21.031 ± 1.778 μg/ml (HL-60) and 35.925 ± 5.011 μg/ml (Jurkat). Among the subfractions, the dichloromethane presented the best response profile with values of 0,005±0,098 μg/mL (HL-60) and 0,200±0,957 μg/mL (Jurkat), revealing that the treatment is time dependent. In addition, the dichloromethane subfraction was selective for the treatment of leukemia with indexes of selectivity superior to 2.Therefore, it is concluded that the subfraction dichloromethane is promising for the treatment of leukemia, possibly by synergistic action of the terpenes in it.
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Caracterização da vegetação, desempenho e seletividade de ovinos em caatinga raleada sob lotação contínua, Serra Talhada-PE

OLIVEIRA, Osniel Faria de 17 July 2012 (has links)
Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2017-05-16T11:49:39Z No. of bitstreams: 1 Osniel Faria de Oliveira.pdf: 2473892 bytes, checksum: ce5ce70228459fb50391d77d95ca9fcb (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-16T11:49:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Osniel Faria de Oliveira.pdf: 2473892 bytes, checksum: ce5ce70228459fb50391d77d95ca9fcb (MD5) Previous issue date: 2012-07-17 / The Caatinga is an important forage resource for the herd of Brazilian semiarid region. This study aimed to characterize the vegetation and animal performance, as well as the sheep selectivity throughout the year in thinning Caatinga in Serra Talhada-PE. The research included evaluation of vegetation and animal performance (sheep) at 38 hectares of Caatinga in a private farm. A fraction of the vegetation was previously thinned for cultivation of corn, beans and sorghum, and replaced by Cenchrus ciliaris L. and Urochloa mosambicensis Hack. Currently, the rangeland is used by crossbred sheep (Dorper x Santa Inês) which stay in the area during the year, at a fixed stocking rate. Response variables included herbage mass, herbage chemical composition, percentage of bare soil, plant height, percentage of litter, stocking rate, animal performance, herbage allowance, botanical composition of the rangeland and of the diet, and selectivity index. Herbage mass ranged from 422 ± 42 to 1262 ± 95 kg DM.ha-1 from January/2011 to January/2012, which led to decreased herbage allowance (5.1 ± 0.5 to 24.5 ± 1.8 kg DM/kg BW), along the season. The weight gain of the sheep was 2.0 ± 2.2 kg/head/period and 3.8 ± 4.0 kg/ha/period. The percentage of litter was higher at October/2011 (38.8 ± 4.1%) and January/2012 (41.4 ± 4.3%). High percentage of bare soil was observed, especially during the dry season, showing average 24.4 ± 1.5%, being higher than in January/2011 with 43.6 ± 5.9% and increased throughout the dry period. During the dry season, the concentrations of DM, NDF, ADF and TC in the forage increased, while the CP, MM and NFC decreased. The principal component analysis showed that over 79% of the total variation was explained by the first two principal components for the structural characteristics of rangeland and animal performance. Herbage mass was negatively correlated with litter and positively correlated with rainfall. The higher the plant height, the lower was the percentage of bare soil. Sheep live weight had negative correlation with herbage allowance and stocking rate. We observed high species diversity (63 species and 25 families) with predominance of shrub-tree, and in most cases, species of low forage value. The botanical composition of rangeland showed higher presence of the following components: Malvaceaes (30.9%), “other species” (20.1%) and Cenchrus ciliaris L. (12.9%), which formed dissimilar groups. In the botanical composition of the sheep diet, via fecal samples by the micro histological technical, there was great participation of dicotyledonous, in average 59.6%. However, throughout selectivity index (SI) estimative, sheep selected more grasses during the rainy season (SI = 1.5) and dicotyledonous plants in the dry season (SI = 1.8). The Malvaceae was rejected (SI = 0.3) by sheep. In general, the Caatinga showed variation of herbage mass, botanical composition, chemical composition, animal performance and selectivity, throughout the year. It is recommended a management that contributes for maintenance of desirable species, leading to the increase of the rangeland carrying capacity. / A vegetação da Caatinga é um importante recurso forrageiro para o rebanho da região semiárida brasileira. Objetivou-se caracterizar a vegetação e o desempenho animal, bem como a seletividade de ovinos, ao longo do ano, em Caatinga raleada, no município de Serra Talhada-PE. Para tal, a pesquisa consistiu em levantamento de dados da vegetação e dos ovinos em 38 hectares de Caatinga em propriedade particular. Uma fração da vegetação foi anteriormente raleada para cultivo de milho, feijão e sorgo, e substituída por Cenchrus ciliaris L. e Urochloa mosambicensis Hack., sendo atualmente utilizada sob pastejo de ovinos mestiços (Santa Inês x Dorper) que permaneciam na pastagem nativa durante todo o ano, em número fixo. Foi avaliada a massa de forragem, composição bromatológica do pasto, porcentagem de solo descoberto, altura média de plantas, porcentagem de serrapilheira, taxa de lotação, desempenho animal, oferta de forragem, composição botânica da pastagem e da dieta e índice de seletividade. A massa de forragem variou de 422 ± 42 a 1.262 ± 95 kg de MS.ha-1 no período de janeiro/2011 a janeiro/2012, o que também ocasionou variação da oferta de forragem (5,1 ± 0,5 a 24,5 ± 1,8 kg de MS/kg PV) no período avaliado. Entretanto foi observado ganho de peso vivo dos ovinos (2,0 ± 2,2 kg/cabeça/ciclo e 3,8 ± 4,1 kg/ha/ciclo) em relação à massa de forragem. A porcentagem de serrapilheira foi maior nos meses de outubro/2011 (38,8 ± 4,1%) e janeiro/2012 (41,4 ± 4,3%). Para solo descoberto observou-se elevados valores, sobretudo ao longo do período seco, apresentando em média 24,4 ± 1,5 % em relação ao período total, sendo o maior valor observado em janeiro de 2011 (43,6 ± 5,9 %). Com o avanço do período seco, os teores de MS, FDN, FDA e CHOT do pasto aumentaram, enquanto que os teores de PB, MM e CNF diminuíram. A análise de componentes principais mostrou que mais de 79% da variação total foi explicada pelos dois primeiros componentes principais para as características estruturais do pasto e de desempenho animal. A massa de forragem foi correlacionada negativamente com a serrapilheira e positivamente com a precipitação pluvial. Quanto maior a altura das plantas menor foi a porcentagem de solo descoberto. O ganho de peso dos ovinos não apresentou correlação com a oferta de forragem. Foi observada grande diversidade florística (63 espécies e 25 famílias) na área experimental com predominância de porte arbustivo-arbóreo, e em sua maioria, espécies de baixo valor forrageiro. A composição botânica da pastagem apresentou, em média, maior presença dos componentes: Malváceas (30,9%), “outras espécies” (20,1%) e C. ciliaris L. (12,9%), os quais formaram grupos dissimilares na análise de componentes principais. A composição botânica da dieta de ovinos, através da análise de amostras fecais pela técnica microhistológica, apresentou grande participação das dicotiledôneas, em média 59,6%. Contudo, através do índice de seletividade (IS), os ovinos selecionaram mais gramíneas no período chuvoso (IS = 1,5) e dicotiledôneas no período seco (IS = 1,8). As Malváceas foram rejeitadas (IS = 0,3) pelos ovinos. De modo geral, a Caatinga apresentou variação de massa de forragem, composição botânica, composição bromatológica, desempenho e seletividade animal, ao longo do ano, recomendando-se manejos que contribuam para manutenção de espécies desejáveis, o que pode favorecer para o aumento da capacidade de suporte da pastagem nativa.

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