Πρόσφατα δεδομένα υποδεικνύουν ότι η έκφραση του p75NTR και των Trk υποδοχέων των νευροτροφινών (TrkA, TrkB, TrkC) είναι ιδιαίτερα σημαντική όχι μόνο στη νευρωνική επιβίωση κατά τη διάρκεια της ανάπτυξης και την ενήλικο ζωή αλλά και σε ποικίλες κυτταρικές διαδικασίες όπως η ανοσολογική απάντηση του οργανισμού σε φλεγμονές. Ο σκοπός αυτής της μελέτης ήταν να ερευνήσει την κυτταρική εντόπιση και κατανομή του p75NTR και των Trk υποδοχέων των νευροτροφινών στην ελκώδη κολίτιδα σε σύγκριση με το φυσιολογικό έντερο του ενήλικα ανθρώπου χρησιμοποιώντας την ανοσοϊστοχημική μέθοδο. Στη μελέτη συμπεριελήφθησαν 45 περιπτώσεις ελκώδους κολίτιδας και 5 δείγματα φυσιολογικού εντέρου. Παρατηρήθηκε αύξηση της έκφρασης όσον αφορά τους TrkA υποδοχείς τόσο στο επιθήλιο όσο και στα κύτταρα του εντερικού νευρικού συστήματος στο φλεγμονώδες σε σχέση με το φυσιολογικό έντερο. Έντονη έκφραση των TrkB υποδοχέων ταυτοποιήθηκε στο μυϊκό τοίχωμα των αγγείων και στα εντεροενδοκρινή κύτταρα του επιθηλίου στο φλεγμονώδες και στο φυσιολογικό έντερο. Μειωμένη έκφραση, τόσο στο επιθήλιο όσο και στο εντερικό νευρικό σύστημα, όσον αφορά την έκφραση των TrkB και TrkC υποδοχέων παρατηρήθηκε στις περιπτώσεις ελκώδους κολίτιδας σε σχέση με το φυσιολογικό έντερο. Ο p75NTR παρουσίασε έκφραση αποκλειστικά στα πλέγματα του νευρικού συστήματος, τόσο στο φυσιολογικό όσο και στο φλεγμονώδες έντερο. Τα παραπάνω αποτελέσματα υποδεικνύουν ότι οι νευροτροφίνες μέσω της δέσμευσής τους με τους Trk υποδοχείς και τον p75NTR πιθανόν εμπλέκονται στην παθογένεια των φλεγμονών όπως η ελκώδης κολίτιδα κατά την ενήλικο ζωή. / -

Σκοπός: Ο νεοεννευρωμένος μεσοσπονδύλιος δίσκος (ΜΔ), κλινικά θεωρείται μια σημαντική πηγή πόνου στους ασθενείς με οσφυαλγία. Η ταυτοποίηση των νεοσχηματιζόμενων νεύρων, που εκφράζουν τους υποδοχείς των νευροτροφινών, στην εκφύλιση του ΜΔ, σπονδυλικών επιπέδων που αναφέρονται ως πηγή δισκογενή πόνου και η συσχέτισή τους με το ενδοκανναβινοειδές σύστημα αναλγησίας, αποτελεί το αντικείμενο αυτής της μελέτης. Υλικό και μέθοδος: Συλλέχθηκαν 50 ανθρώπινοι ΜΔ ή τμήματα αυτών, μετά από δισκεκτομή σε χειρουργεία κήλης και εκφυλιστικών παθήσεων της Οσφυϊκής Μοίρας της Σπονδυλικής Στήλης (ΟΜΣΣ). Εφαρμόσθηκε ανοσοϊστοχημεία για την ανίχνευση νευρικών ινών, στους ΜΔ, αφού διαπιστώθηκε η εκφύλισή τους. Συσχετίσθηκε η ανάπτυξη νευρικών ινών των εκφυλισμένων ΜΔ με την έκφραση των υψηλής και χαμηλής συγγένειας υποδοχέων των νευροτροφινών, TrkA, TrkB, TrkC και p75, αντίστοιχα. Στα περιστατικά με ανάπτυξη νευρικών ινών ανιχνεύθηκε ανοσοϊστοχημικά η έκφραση του υποδοχέα CB1 των ενδοκανναβινοειδών. Αποτελέσματα: Η εκτεταμένη νεύρωση στον ΜΔ που φέρεται στον έσω ινώδη δακτύλιο (ΙΔ) και μπορεί να φτάνει μέχρι τον πηκτοειδή πυρήνα (ΠΠ), φαίνεται να είναι εξαρτώμενη από τους υποδοχείς των νευροτροφινών TrkA, TrkB, TrkC και p75. Μικρά αιμοφόρα αγγεία συνοδεύουν τις νευρικές ίνες στα σπονδυλικά επίπεδα του ΜΔ που δίνουν δισκογενή πόνο και εκφράζουν επίσης τους υποδοχείς των νευροτροφινών. Ο CB1 υποδοχέας των ενδοκανναβινοειδών ταυτοποιήθηκε σε όλα τα περιστατικά που εμφάνιζαν ανάπτυξη νευρικών ινών. Βρέθηκε να εκφράζεται στα αγγεία που συνοδεύουν τις νευρικές ίνες και σε μερικά νεύρα. Δεν ταυτοποιήθηκε ανάπτυξη νευρικών ινών σε εκφυλισμένους ΜΔ σπονδυλικών επιπέδων που δεν αποτελούσαν αιτία δισκογενούς οσφυαλγίας. Συμπέρασμα: Η αλγοϊδιοδεκτική ανάπτυξη νευρικών ινών στον ΜΔ συνδέεται με την έκφραση των υποδοχέων των νευροτροφινών στις νεοσχηματιζόμενες νευρικές ίνες, δείχνοντας ότι όχι μόνο ο NGF, αλλά και άλλες νευροτροφίνες εμπλέκονται στην ανάπτυξη νευρικών ινών. Η έκφραση του CB1 υποδοχέα των ενδοκανναβινοειδών αποτελεί πεδίο έρευνας για τη θεραπεία του δισκογενή πόνου. / The current study was designed in order to detect immunohistochemically the expression of cannabinoid CB1 receptor and high and low affinity neurotrophin receptors TrkA, TrkB, TrkC and p75 respectively in human painful intervertebral disc (IVD). Previous data have shown an association between nerve ingrowth in human degenerated IVD and patient’s experience of pain. The nociceptive nerve ingrowth into painful IVD is causally linked with Nerve Growth Factor (NGF) production by blood vessels growing into the IVD. NGF causes further innervation and is involved in processes that result in an inflammatory hyperalgesia. There is evidence that cannabinoids show a neuronal CB1 receptor-mediated antihyperalgesic action and a separate inhibition of proinflammatory neuroimmune processes. A total of 50 IVD specimens after lumbar discectomy were included in the present study. The degeneration of IVD was identified and connected with clinical background of patients. An immunoperoxidase method on formalin-fixed, paraffin-embedded tissue sections and specific antibodies against CB1 and neurotrophin receptors (TrkA, TrkB, TrkC and p75) were used. Immunohistochemistry was also performed to detect neural and vascular markers: tubulin (βIII) and CD31. Neurotrophin receptors (TrkA, TrkB, TrkC and p75) expression was detected only in innervated degenerated IVD. Blood microvessels accompanied nerve fibers growing into IVD expressed also neurotrophin receptors. Furthermore, in some nerve fibers CB1 cannabinoid receptor expression was identified. Interestingly, CB1 receptor expression was detected in the majority of vessels accompanying nerve fibers. Nociceptive nerve ingrowth into degenerated IVD was strongly associated with all neurotrophin receptors expression indicating that not only NGF but also and others neurotrophins are involved in nerve ingrowth. Expression of CB1 cannabinoid receptor in innervated IVD suggests a possible therapeutic site of analgesic action. Additional studies would be necessary to clarify the functional role of CB1 cannabinoid receptor in degenerated intervertebral disc.

Οι νευροτροφίνες (ΝΤs), Nerve Growth Factor (NGF), Brain-Derived Neurotrophin Factor (BDNF), NΤ-3, ΝΤ-4, ΝΤ-5 και ΝΤ-6 ανήκουν σε μια οικογένεια πολυπεπτιδικών αυξητικών παραγόντων οι οποίοι απαιτούνται για την ανάπτυξη του νευρικού συστήματος στα σπονδυλωτά. Εμπλέκονται στην επιβίωση, στη διαφοροποίηση, στην ωρίμανση των νευρώνων, στη συναπτική πλαστικότητα, στη μάθηση, στη μνήμη, καθώς επίσης και στην έκφραση και ενεργότητα σημαντικών πρωτεϊνών, όπως ιοντικών καναλιών και νευροδιαβιβαστικών υποδοχέων. Οι λειτουργίες αυτές επιτελούνται μέσω της δέσμευσής τους σε δύο είδη μεμβρανικών υποδοχέων, της οικογένειας κινάσης-τυροσίνης TrkA, TrkB και TrkC (tropomyosinerelated kinase) και του pan-neurotrophin (με ικανότητα δέσμευσης με όλες τις νευροτροφίνες) υποδοχέα p75NTR που είναι μέλος των υποδοχέων Tumor Necrosis Factors (TNFs). Οι νευροτροφίνες εκφράζονται σε κύτταρα του Κ.Ν.Σ. και Π.Ν.Σ. αλλά και σε ιστούς-όργανα εκτός νευρικού συστήματος, όπως είναι η υπόφυση. Σκοπός της εργασίας ήταν να μελετήσουμε την έκφραση των υποδοχέων των νευροτροφινών με σύγχρονες μεθόδους ανοσοϊστοχημείας σε αδενώματα της υπόφυσης και να συσχετίσουμε την έκφρασή τους με τα κλινοκοπαθολογικά χαρακτηριστικά των ασθενών. Όλα τα αδενώματα της μελέτης που συμπεριλήφθησαν στη μελέτη (10ανδρών και 8 γυναικών) εμφάνισαν ανοσοϊστοχημική χρώση για τον υποδοχέα TrkA και συγκεκριμένα έντονη χρώση (+3) τα 9/18 (50%) των περιστατικών, μέτρια χρώση (+2) τα 8/18 (45%) των περιστατικών και ασθενή χρώση (+1) 1/18 (5%) των περιστατικών. Ο υποδοχέας TrkB εμφάνισε θετικότητα στο 83% (15/18) των περιπτώσεων. Τα 6/15 (40%) περιστατικά παρουσίασαν έντονη χρώση (+3), τα 4/15 (27%) περιστατικά μέτρια χρώση (+2) και τα 5/15 (33%) περιστατικά ασθενή χρώση (+1). Ανοσοϊστοχημική χρώση για τον υποδοχέα TrkB παρατηρήθηκε επίσης στα αγγεία 4/15 (27%) των αδενωμάτων. Τα 11/18 (61%) των αδενωμάτων παρουσίασαν ανοσοθετικότητα για τον TrkC και συγκεκριμένα τα 3/11 (27%) περιστατικά εμφάνισαν μέτρια χρώση (+2) και 8/11 (73%) περιστατικά ασθενή (+1). Χρώση για τον υποδοχέα TrkC εντοπίστηκε σε αγγεία σε 4/11 περιστατικά (36%). Τέλος έκφραση για τον p75 υποδοχέα δεν παρατηρήθηκε σε κανένα αδένωμα. Με δεδομένο ότι οι υποδοχείς TrkB και TrkC εκφράζονται στα αγγεία των αδενωμάτων, μελετήθηκε η έκφραση των υποδοχέων των νευροτροφινών σε σχέση με την αγγειογένεση, ένας μηχανισμός που αφορά άμεσα την πρόγνωση και την ανταπόκριση στην αντίστοιχη θεραπεία των όγκων. Μελετήθηκε η έκφραση του CD31(platelet endothelial cell adhesion molecule) και του VEGFR3 (Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 3). Ο παράγοντας VEGFR3 συμβάλλει επίσης και στην ανάπτυξη λεμφαγγείων στο στρώμα του όγκου επάγοντας την ανάπτυξή του. Η εκτίμηση της ανοσοεντόπισης για τον CD31 και τον VEGFR3 για κάθε νεόπλασμα έγινε κατόπιν επιλογής τριών αγγειοβριθέστερων περιοχών, την καταμέτρηση των αγγείων σε κάθε περιοχή και τον υπολογισμό του μέσου όρου (MCV Microvessel Count). Για τον παράγοντα VEGFR3 το 89% των περιστατικών ήταν θετικά εμφανίζοντας ένα εύρος MCV της τάξης των 2 έως 32,67, ενώ για τον παράγοντα CD31 το 100% των αδενωμάτων ήταν θετικά με MCV της τάξης των 4,67 έως 53,67. Δεν παρατηρήθηκε συσχέτιση του MCV με την έκφραση των υποδοχέων των νευροτροφινών. Οι υποδοχείς των νευροτροφινών ενώ εκφράζονται στη φυσιολογική υπόφυση συμμετέχοντας στην ανάπτυξη και στην επιβίωση των κυττάρων, δεν «σιωπούν» στα αδενώματά της. Το ερώτημα που γεννάται είναι αν δρουν ως παράγοντες διατήρησης της καλοήθειας ή αν συμβάλλουν στην ογκογένεση και στην μετέπειτα εξέλιξη των νεοπλασμάτων της υπόφυσης. Περαιτέρω μελέτες απαιτούνται για την διερεύνηση του ρόλου των νευροτροφινών μέσω των υποδοχέων τους στα αδενώματα υπόφυσης, στον άνθρωπο. / -