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Aedes albopictus (Skuse), comunemente detta Zanzara Tigre, ha invaso, negli ultimi anni, molti paesi, soprattutto in modo passivo attraverso il commercio di pneumatici usati. Questa specie è particolarmente adatta all'applicazione della tecnica dell'insetto sterile (SIT), basata su allevamento massale, sterilizzazione e rilascio in campo di un gran numero di maschi della specie vettrice. I maschi sterili rilasciati devono essere in grado di volare, di disperdersi sul territorio, di sopravvivere, di essere sessualmente attivi abbastanza a lungo per coprire il tempo tra una fase di rilascio e la successiva, di individuare le femmine vergini selvatiche e competere con successo per l'accoppiamento con i maschi selvatici. La dispersione e la sopravvivenza dei maschi di Ae. albopictus allevati in laboratorio, sono state studiate mediante tecniche di marcatura, rilascio e ricattura. Le catture sono state eseguite da tecnici specializzati, in un raggio di 350 m dal sito di rilascio. Gli esperimenti condotti hanno dimostrato che i maschi sono in grado di disperdersi, dal sito di rilascio, per circa 200 m ma la loro longevità in campo è fortemente dipendente dalle condizioni climatiche. In studi di semi-campo e di campo è stato valutato uno speciale dispositivo progettato per essere incluso nella stazione di rilascio dei maschi in grado di fornire loro fonti energetiche per migliorarne le prestazioni. I risultati ottenuti sono stati positivi. Studi di competitività sono stati condotti in tunnel costruiti in un ambiente naturale al fine di validare un protocollo per studi sulla competitività dei maschi in questo modello sperimentale. Maschi irraggiati mediante l'applicazione di raggi gamma alla dose di 30 Gy sono stati messi in competizione con maschi fertili per l'accoppiamento con femmine vergini con diversi rapporti. I risultati ottenuti hanno dimostrato le buone prestazioni e l'affidabilità di questo modello sperimentale rimanendo però irrisolto il problema dell’elevata variabilità. / Aedes albopictus (Skuse), the Asian Tiger Mosquito, has invaded several countries in recent years, mainly passively exploiting the trade of used tyres. This species is particularly suitable for the application of the sterile insect technique (SIT), based on the mass-rearing, sterilization and release into the natural habitat of large numbers of males of the target vector species. The released sterile males must be able to fly, to disperse enough from the release station to cover the target area, to survive and be sexually active long enough to cover the time between successive releases, to locate the virgin wild females and successfully compete for mating with the wild males. The dispersal and survival of laboratory-reared Ae. albopictus males were investigated during by mark-release recapture techniques. Recaptures were performed by skilled technicians, within a radius of 350 m from the release site. The experiments output showed that males were able to disperse an average of 200 m from the release point but their longevity was strongly dependent from climatic condition. Evaluation of special designed device to be included in the release station in order to supply energetic sources to improve male performances was tested in semi-field and field conditions obtaining satisfactory results. Mating competitiveness trials have been conducted in net-screened enclosures built in a natural shaded environment in order to validate a protocol for competitiveness studies in this experimental model. Males were radio-sterilized by applying gamma radiations at the dose 30 Gy and testes against fertile males for mating competitiveness with virgin females with different ratio. Results demonstrated that the green houses provided good performance and reliability of the experimental model but high variability remains an issues to be resolved.

Tuta absoluta (Meyrick) è un lepidottero originario dell’America meridionale, infeudato a pomodoro e ad altre solanacee coltivate e spontanee. Con l’attività trofica le larve causano mine fogliari e gallerie nei frutti, con conseguenti ingenti danni alle colture. T. absoluta è stato segnalato per la prima volta in Italia nel 2008 e in Piemonte nel 2009. Pertanto le ricerche sono state condotte per rilevarne la distribuzione in Piemonte, studiarne l’andamento di popolazione in condizioni naturali e controllate, e valutare l’efficacia di differenti mezzi di lotta al fine di definire le strategie di difesa. Il monitoraggio, condotto nel 2010, ha evidenziato come T. absoluta sia ormai largamente diffuso sul territorio regionale già pochi mesi dopo la segnalazione. L’insetto ha mostrato di prediligere condizioni climatiche più miti; infatti è stato ritrovato con maggiore frequenza nelle aree più calde. Il fitofago ha raggiunto densità di popolazione elevate a partire dalla seconda metà dell’estate, a ulteriore dimostrazione che, in una regione a clima temperato come il Piemonte, T. absoluta dà origine a infestazioni economicamente rilevanti solo dopo il culmine della stagione estiva. Per definire le strategie di lotta, sono state condotte prove in laboratorio, semi-campo e campo volte a valutare la tossicità nei confronti del lepidottero di preparati a base di emamectina benzoato, rynaxypyr, spinosad e Bacillus thuringiensis Berliner. In campo è stata verificata anche l’efficacia del miride dicifino Macrolophus pygmaeus (Rambur), reperibile in commercio. In tutte le prove, è stata riscontrata una maggiore efficacia di rynaxypyr ed emamectina benzoato. In campo M. pygmaeus ha mostrato difficoltà d’insediamento ed è stato in grado di contenere efficacemente il fitofago soltanto con bassi livelli d’infestazione. Per contro è stata costantemente osservata la presenza naturale di un altro miride dicifino Dicyphus errans (Wolff), che in laboratorio ha mostrato di non essere particolarmente disturbato dalle sostanze saggiate. / The tomato borer Tuta absoluta (Meyrick) is a pest native to from South America, infesting tomato and other cultivated and wild Solanaceae species. With their trophic activity larvae produce large foliar mines and galleries on fruits, causing severe damage on the crops. T. absoluta was reported for the first time in Italy in 2008 and in Piedmont (NW Italy) in 2009. Therefore, the research activities were aimed at assessing the distribution in Piedmont and the population dynamics with natural and artificial infestation, and evaluating different control measures to implement effective control strategies. In the sampling in 2010, T. absoluta proved to be widespread in the regional area already a few months after its first report. The tomato borer showed to prefer mild climatic conditions; it was found more frequently in warmer areas. T. absoluta reached high population densities after the second half of summer, further confirming that, in a cold area as Piedmont, it can cause severe economic damage only after the peak of summer. Laboratory, semi-field and field trials were carried out to evaluate the toxicity of emamectin benzoate, rynaxypyr, spinosad and Bacillus thuringiensis Berliner. In the field, the effectiveness of Macrolophus pygmaeus (Rambur) (Hemiptera: Myridae) was also assessed. In all the trials, rynaxypyr and emamectin benzoate showed the highest efficacy. M. pygmaeus exhibited some difficulties to establish, and was able to control effectively the pest only with low infestation levels. On the other hand, the natural presence of another predatory bug, Dicyphus errans (Wolff) (Hemiptera: Myridae), was observed. Moreover, D. errans was not heavily affected by the side effects of the active ingredients tested against T. absoluta in laboratory conditions.

Dal 1999 presso il laboratorio del Centro Agricoltura Ambiente “G. Nicoli” a Crevalcore (BO) è in corso una sperimentazione finalizzata a verificare la possibilità di attuare la tecnica del maschio sterile (SIT) in Italia contro Aedes albopictus. Alcuni aspetti per migliorare l’efficienza di questa struttura pilota, oggetto della presente ricerca, sono stati: 1) studio degli effetti di determinati costituenti della dieta larvale a) sullo sviluppo larvale stesso, per individuare intervalli limite di densità larvale e di concentrazione di cibo in cui è possibile lo sviluppo di tale specie, e b) sulla qualità dei maschi adulti ottenuti; 2) la valutazione di attrezzatura per l’allevamento massale e 3) la possibilità di migliorare la dieta larvale mediante integrazione di carboidrati. Dalle prove di valutazione della dieta larvale si è potuto osservare che, per quanto riguarda i parametri larvali, le due diete denominate “IAEA” (1 e 2) sono risultate più efficaci rispetto alla dieta standard “CAA”. Tali diete sono perciò da preferirsi nel loro possibile impiego in biofabbriche per l’allevamento massale. Le prove condotte sugli adulti allevati con le diverse diete hanno suggerito la necessità di valutare una possibile integrazione di componenti per migliorarne la longevità. Risulta altresì opportuno continuare la ricerca per ottimizzare la dieta larvale così da ottenere maschi di elevata qualità. Grazie ai risultati ottenuti dalle prove per valutare l’impiego di attrezzatura massale (vassoi di grandi dimensioni e carrello) si è potuto definire un modello per l’allevamento di Ae. albopictus con parametri standardizzati di densità larvale, dose di dieta, temperatura dell’acqua di allevamento, percentuale di maschi passati al setacciamento e rendimento di allevamento. Prove future saranno necessarie per testare altri componenti della dieta ricchi in carboidrati, quali saccarosio, da aggiungere alla dieta larvale per migliorare le qualità degli adulti ottenuti senza provocare effetti negativi sui parametri dello sviluppo larvale. / Since 1999 the Centro Agricoltura Ambiente “G. Nicoli” in Crevalcore (BO) has been conducting research to evaluate the application of the sterile insect technique (SIT) together with other existing control methods to suppress Ae. albopictus. Some aspects to improve the efficiency of this pilot facility, object of the present research, were: 1) study of the effects of certain constituents of the larval diet a) on larval development, in order to determine the boundary conditions of larval density and concentration of food in which the development of such species is possible, and b) on the quality of adult males obtained; 2) the evaluation of equipment for the mass rearing and 3) the possibility of improving the larval diet by integration of carbohydrates. From the experiments on the larval diet it has been observed that, as regards larval development, the two "IAEA" diets were more effective than the "CAA" standard diet. Such diets are therefore to be preferred in their possible use for the mass rearing of Ae. albopictus. The tests carried out on the adults reared on the different diets have suggested the need to evaluate a possible integration with components to improve longevity. It is also appropriate to continue the research for the optimization of larval diet as a key factor for obtaining high-quality males. From the results achieved by testing the use of mass rearing equipment (large trays and rack) it was possible to define a model for the breeding of Ae. albopictus with standardized parameters of larval density, amount of diet, water temperature, percentage of males passed to the sieving and productivity. Future trials will be necessary to test other components rich in carbohydrates, such as sucrose, to be added to the larval diet to improve the quality of the adults without causing negative effects on larval development.

Diabrotica virgifera virgifera LeConte (Coleoptera: Chrysomelidae) è una specie esotica invasiva di origine centro americana e introdotta in Europa agli inizi degli anni ’90, in Italia nel 1998. Considerata negli Stati Uniti la principale avversità del mais (Zea mais L.), è oggi presente in quasi tutti i Paesi europei dove è presente tale coltura. Poiché il mais risulta l’ospite prioritario di Diabrotica, attualmente il principale metodo di contenimento consiste nella rotazione con una coltura non ospite. L’obiettivo del lavoro è stato quello di indagare sulle piante ospiti alternative al mais nel nostro ambiente, accertando il ruolo che possono avere le infestanti o altre Poaceae coltivate nella biologia della Diabrotica. Tali essenze sono state scelte tra specie mai sottoposte a sperimentazione e tra quelli già oggetto di indagini, ma su cui si sono ottenuti esiti discordi o non soddisfacenti. Sono state allestite prove con infestazione artificiale in ambiente controllato e prove in campo per valutare la sopravvivenza larvale e il completamento del ciclo, nonché le prestazioni biologiche degli individui ottenuti. Le ricerche hanno permesso di osservare sopravvivenza di Diabrotica su numerose graminacee, in particolare cereali. Tale capacità è confermata dalla presenza di larve di diversa età e in alcuni casi di pupe sulle specie ospiti alternative, sia con infestazione artificiale che in campo. Tuttavia crescita e sviluppo su queste piante sono stati più lenti del mais e gli stadi giovanili trovati hanno mostrato caratteristiche morfometriche inferiori rispetto a quelli del mais. Adulti non sono mai stati raccolti in campo, mentre questo si è verificato in condizioni controllate. Le specie che meritano maggior attenzione sono i cereali Triticum spelta e Panicum miliaceum e l’infestante Sorghum halepense. Si potrebbe dunque ipotizzare che alcune specie vegetali possano fungere da ospite secondario quando non è presente il mais riducendo l’efficacia dell’avvicendamento. / Diabrotica virgifera virgifera LeConte (Coleoptera: Chrysomelidae) is an invasive exotic species native to Central America and introduced in Europe in the ’90; in Italy if was found in 1998. In the US it is considered one of the most harmful pest of maize (Zea mais L.). In Europe it is now present in almost all the Countries where the maize is produced. Because maize is the preferred host of Diabrotica larvae, the most common control method consists in the rotation of maize with another non-host crop. The aim of this work was the study of the potential role of the alternative host plants in our habitat, with particular attention to other Poaceae and weeds. Species were selected among those never tested before or on which the results were disaccording between Authors. Tests with artificial infestation in glasshouse and with natural infestation in fields were conducted and survival, development and performance of Diabrotica were evaluated. Studies confirmed the capability of Diabrotica to survive on numerous Poaceae, with preference for cereals. Larvae of different stages and pupae were observed on different plant species, both with artificial and natural infestation. However, the development of Diabrotica on the alternative host plants was slower than on maize and preimmaginal stages showed lower values of morphometric characteristics than on maize. Adults from different hosts were captured only with artificial infestation, never in natural condition. Most interesting species as alternative host for Diabrotica are cereals (Triticum spelta and Panicum miliaceum) and the weed Sorghum halepense, very common in maize fields. We can hypothesize that these species could be used from Diabrotica in the absence of maize, reducing the efficiency of the crop rotation as eradication or control method.

Gonocerus acuteangulatus (Hemiptera: Coreidae) è considerato uno dei principali fitofagi del nocciolo, in grado di causare con l’attività trofica pesanti perdite quali-quantitative di produzione. Nel triennio sono state quindi condotte indagini sulla bioetologia di G. acuteangulatus volte a: I) studiare comportamento alimentare ed effetti sulla produzione corilicola, II) identificare i feromoni e valutarne l’attività mediante biosaggi fisiologici e comportamentali in laboratorio, semi-campo e campo, III) rilevare le piante ospiti alternative al nocciolo. Mediante isolamento di adulti del coreide su rami di nocciolo con frutti è stata confermata l’assenza di correlazione fra entità del danno e numerosità degli individui presenti in corileto. Dalle analisi sensoriali su nocciole sane e danneggiate è emerso che le alterazioni causate delle punture di nutrizione sono rese più evidenti da conservazione e tostatura. Variazioni di tempi e temperature di tostatura potrebbero mitigare gli effetti del cimiciato. Nello studio dei feromoni, G. acuteangulatus, molto mobile nell’ambiente, è risultato poco adatto ai biosaggi in condizioni artificiali, come quelle in olfattometro e semi-campo. Le femmine sono tuttavia apparse attrattive per adulti di entrambi i sessi, mentre la miscela feromonale sintetizzata ha mostrato un’azione attrattiva, seppure non costante. Pertanto, ulteriori ripetizioni sono necessarie per convalidare questi risultati preliminari, modificando le condizioni di saggio in relazione alle caratteristiche della specie. Infine è stata accertata la preferenza del fitofago per alcune specie vegetali rispetto al nocciolo. Nel corso del triennio, popolazioni molto consistenti di G. acuteangulatus sono state rilevate su bosso, ciliegio di Santa Lucia, rosa selvatica, sanguinello, spino cervino, in corrispondenza del periodo di comparsa e maturazione dei frutti. Nell’impostazione di una strategia di difesa a basso impatto ambientale, l’attrattività di queste piante, in sinergia con eventuali feromoni di aggregazione, potrebbe essere utilmente sfruttata, per mantenere il coreide lontano dalla coltura. / Gonocerus acuteangulatus (Hemiptera: Coreidae) is one of the main hazelnut pest, responsible for detrimental effects on yield quality and quantity with its feeding activity. The three-year-research on bio-ethology of G. acuteangulatus was carried out to: i) study feeding behaviour and its effects on hazelnut yield, ii) identify pheromones and evaluate their activity in physiological and behavioural bioassays in laboratory, semi-field and field conditions, and iii) detect alternative host plants. Encaging adults on hazel branches with fruits allowed to confirm the absence of correlation between damage rate and number of individuals in the hazel orchard. Sensory tests on damaged and undamaged kernels pointed out that alterations due to bug feeding activity were more perceived following storage and roasting. Variation in roasting time and temperature could reduce damage effects. To evaluate behavioural responses to pheromones, laboratory and semi-field conditions, as for olfactometer, were not altogether suitable for G. acuteangulatus, very mobile in the natural environment. However, females were attractive for both sexes, while the synthetic pheromone blend showed a changeable attractiveness. Therefore, further replications are needed to validate these preliminary results, modifying bioassay conditions in relation to the species characteristics. Lastly, bug preference for some plant species compared with hazel was assessed. In the three-year-surveys, very abundant populations of G. acuteangulatus were found on box, St Lucie cherry, wild rose, common dogwood and buckthorn, during fruit ripening. To implement an environmentally-friendly control strategy, plant attractiveness, together with synergic activity of aggregation pheromones, could be usefully exploited to keep the bug away from the crop.

In this study, some important aspects of the relationship between honey bees (Apis mellifera L.) and pesticides have been investigated. In the first part of the research, the effects of the exposure of honey bees to neonicotinoids and fipronil contaminated dusts were analyzed. In fact, considerable amounts of these pesticides, employed for maize seed dressing treatments, may be dispersed during the sowing operations, thus representing a way of intoxication for honey bees. In particular, a specific way of exposure to this pesticides formulation, the indirect contact, was taken into account. To this aim, we conducted different experimentations, in laboratory, in semi-field and in open field conditions in order to assess the effects on mortality, foraging behaviour, colony development and capacity of orientation. The real dispersal of contaminated dusts was previously assessed in specific filed trials. In the second part, the impact of various pesticides (chemical and biological) on honey bee biochemical-physiological changes, was evaluated. Different ways and durations of exposure to the tested products were also employed. Three experimentations were performed, combining Bt spores and deltamethrin, Bt spores and fipronil, difenoconazole and deltamethrin. Several important enzymes (GST, ALP, SOD, CAT, G6PDH, GAPDH) were selected in order to test the pesticides induced variations in their activity. In particular, these enzymes are involved in different pathways of detoxification, oxidative stress defence and energetic metabolism. The results showed a significant effect on mortality of neonicotinoids and fipronil contaminated dusts, both in laboratory and in semi-field trials. However, no effects were evidenced in honey bees orientation capacity. The analysis of different biochemical indicators highlighted some interesting physiological variations that can be linked to the pesticide exposure. We therefore stress the attention on the possibility of using such a methodology as a novel toxicity endpoint in environmental risk assessment.

The introduction of exotic species is one of the most important threats to biodiversity.This phenomenon may cause economic and environmental damage. To prevent these invasions there are institutions like EPPO. Nevertheless, the introduction of exotic pests is an increasing issue, difficult to control. Classic biological control, based on importation of natural enemies from the country of origin, has been successfully used for over 120 years, but it has also raised some criticism. My research work has focused on the study of the new associations occurring between indigenous parasitoids and three exotic pests introduced in Italy and Europe. The three target insects considered were: Cacyreus marshalli Butler (Lepidoptera: Lycaenidae), a pest of Geranium plants; Dryocosmus kuriphilus Yasumatsu (Hymenoptera: Cynipidae), a plague of Castanea sp. and Harmonia axyridis (Pallas) (Coleoptera: Coccinellidae). This ladybug has been introduced as a biological control agent, but since some years it considered as an invasive species. For C. marshalli I performed laboratory tests on acceptance and suitability of immature stages of this butterfly by Exorista larvarum (Diptera: Tachinidae) and Brachymeria tibialis (Hymenoptera: Chalcidicae). The experiments showed that these two parasitoids could be used to contain this pest. For D. kuriphilus I performed field samplings in an infested chestnut area, the samples were maintained in rearing chamber until gall wasp or parasitoids emergence. In the 3-year research many parasitoids of gall wasps were found; one of these, Torymus flavipes (Walker), was found in large number. For H. axyridis the research work included a first phase of field sampling, during which I searched indigenous parasitoids which had adapted to this new host; the only species found was Dinocampus coccinellae (Schrank) (Hymenoptera: Braconidae). Laboratory tests were performed on the wasp rearing, biology and capacity to contain H. axyridis. / L'introduzione di specie esotiche è una delle minacce più importanti per la biodiversità, tale fenomeno può causare danni economici e ambientali. Anche per controllare queste introduzioni sono state create apposite istituzioni come EPPO. Tuttavia, l'introduzione di insetti esotici nocivi è un problema crescente, difficile da contrastare. Il controllo biologico classico, basato sull’introduzione dei nemici naturali dal paese di origine, è stato utilizzato con successo per oltre 120 anni, ma ha anche sollevato alcune critiche. Il mio lavoro di ricerca è stato incentrato sullo studio delle nuove associazioni tra parassitoidi indigeni e tre insetti esotici introdotti in Italia e in Europa. I tre insetti studiati sono stati: Cacyreus marshalli Butler (Lepidoptera: Lycaenidae), nocivo per le piante di Geranium; Dryocosmus kuriphilus Yasumatsu (Hymenoptera: Cynipidae), dannoso al castagno e Harmonia axyridis (Pallas) (Coleoptera: Coccinellidae), coccinellide introdotto come agente di controllo biologico, ma da alcuni anni considerato come invasivo. Per C. marshalli sono stati effettuati degli esperimenti di laboratorio sulla accettabilità e l’idoneità di questo lepidottero da parte dei parassitoidi Exorista larvarum (Diptera: Tachinidae) e Brachymeria tibialis (Hymenoptera: Chalcididae). Gli esperimenti hanno dimostrato come questi due parassitoidi possano essere impiegati per il contenimento di questa specie. Per D. kuriphilus sono stati effettuati dei campionamenti in un castagneto infestato, i campioni sono stati mantenuti in celle climatizzate fino allo sfarfallamento del galligeno o dei parassitoidi. In tre anni di ricerca sono stati ritrovati molti parassitoidi, uno dei quali, Torymus flavipes (Walker), è stato rinvenuto in elevato numero. Per H. axyridis le ricerche prevedevano una fase di campo, per ricercare eventuali parassitoidi adattatisi a questo nuovo ospite; l’unica specie ritrovata è stata Dinocampus coccinellae (Schrank) (Hymenoptera: Braconidae). Con questa specie sono stati effettuati test per comprendere la sua biologia e la sua capacità di contenimento di H. axyridis, oltre che per migliorare le tecniche di allevamento.

Invasive pests threaten agriculture and ecology of the invaded countries. To contrast and reduce their impact, entomologists develop specific and sustainable control strategies, which should target the pest and should not affect the surrounding environment. Therefore, a profound knowledge of pest biology and ecology is necessary to afford this task. During my PhD, I delved into three underexplored approaches that hold the potential to unveil crucial biological information and develop more effective pest management strategies tailored to specific species: metabolic rate, microbiota shifts and molecular divergences. Although these three aspects might sound secondary in the context of pest management, they are important descriptors of the insect biological processes as they determine both the internal balance and the external interaction of the organism. I analyzed these three aspects for three case studies on three invasive pests diffused on the Italian territory. None of these investigated topics had been previously examined in relation to the studied species, and the findings I obtained hold promise for advancing species-specific control strategies. The overarching objective of my PhD research was to demonstrate the significance of exploring overlooked aspects of pest species biology, thereby augmenting the wealth of information necessary to enhance control strategies. The metabolic rate aspect (Chapter 2) was addressed considering the spotted wing drosophila (Drosophila suzukii), an invasive species from eastern Asia that particularly threatens soft fruit crops. The study focused on measuring metabolic and water loss rates of D. suzukii flies captured at different sites located on an altitudinal gradient in Val dei Mocheni (Trentino, Italy) from early summer to fall. Respirometry was used to quantify the emission of carbon dioxide (CO2) and water (H2O) from individual flies, with the obtained CO2 values serving as a proxy for the metabolic rate. The study aimed to compare the metabolic and water loss rates among Drosophila populations, aiming to enhance the ecological understanding of this species and shed light on the metabolic and water management implications of living at different altitudes. Consequently, the results would provide insights into survivability, adaptability, pest distribution, and habitat suitability, offering valuable perspectives for management considerations. Concerning the microbiota aspect (Chapter 3), I analyzed the brown marmorated stink bug (Halyomorpha halys), an invasive polyphagous insect from Asia that threatens most crops. Populations of this bug are able to survive severe winters, although during this period of the year they don’t feed and they are subject to severe abiotic conditions, such as freezing. It is well known that, in general, bacterial microbiota can shift due to severe and prolonged conditions, but I find out that this is not the case for H. halys. Thus, targeting the bacterial microbiota could be a key factor for the management of this species. Moreover, I also searched for the presence of the microsporidian Nosema maddoxi and the overwintering consequences on its infection. The role of this microsporidian is still not clear, but it is supposed to be a parasite that negatively affects the ecology of H. halys. Findings of this study are also interesting for the sterile insect technique (SIT), since it has been suggested to be performed on overwintering wild males to overcome mass-rearing limitations in laboratory conditions, and therefore it is important to unravel microbial communities that characterize them to avoid accidental spreading of deleterious microbes. Ultimately, the molecular divergence aspect (Chapter 4) was tackled studying the molecular clock of a newly invasive species of leafhoppers, Arboridia dalmatina, that was very recently found in Puglia (Apulia, Italy). This species might be a threat for vineyards, since it can feed on grapevines’ leaves causing their decay. A phylogenetic and molecular clock analysis on the COI gene was performed to attempt to trace back the origin of this invasion and to understand the threats of this species. Overall, the three approaches I used unveiled under-explored aspects of the three studied species, pointing out key information on their biological processes that can be exploited to further improve their pest-specific management strategies. The work presented in this thesis further proves the importance of using these approaches to deeply figure out pests’ biology that can serve agricultural entomology purposes.