Submitted by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2015-04-15T19:02:13Z No. of bitstreams: 1 Dissertação finalizada 15-05-14 Heverton Leandro Carneiro Dutra.pdf: 3315632 bytes, checksum: ba1df84d76a5e93b094eea244f5269c5 (MD5) / Approved for entry into archive by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2015-04-15T19:02:21Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação finalizada 15-05-14 Heverton Leandro Carneiro Dutra.pdf: 3315632 bytes, checksum: ba1df84d76a5e93b094eea244f5269c5 (MD5) / Approved for entry into archive by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2015-04-15T19:02:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação finalizada 15-05-14 Heverton Leandro Carneiro Dutra.pdf: 3315632 bytes, checksum: ba1df84d76a5e93b094eea244f5269c5 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-15T19:02:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação finalizada 15-05-14 Heverton Leandro Carneiro Dutra.pdf: 3315632 bytes, checksum: ba1df84d76a5e93b094eea244f5269c5 (MD5) Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil / Wolbachia constitui um gênero de bactérias endossimbiontes, gram-negativas, maternalmente transmitidas, intracelulares obrigatórias. Estima-se que cerca de 20 a 70% de todas as espécies de artrópodes conhecidas estão infectadas por estas alfaproteobactérias, as quais em seus hospedeiros causam uma série de efeitos biológicos incluindo “parasitismo reprodutivo”, o qual favorece a dispersão da bactéria na população de campo. Interessante notar que populações naturais de um dos mais importantes vetores de doença, Aedes aegypti, não estão infectadas por Wolbachia, mas quando duas cepas da bactéria, wMelPop e wMel foram independentemente inseridas nesta espécie, elas diminuíram significativamente a competência vetorial para os vírus DENV e Chikungunya. Recentemente, Wolbachia foi proposta como uma nova estratégia para reduzir a incidência da dengue (ED = www.eliminatedengue.org). Entretanto, o controle da dengue baseado em Wolbachia só será efetivo se a infecção bacteriana gerada em laboratório for capaz de se fixar na população de campo. Com isto em mente, nós avaliamos os efeitos das cepas wMelPop e wMel de Wolbachia em uma variedade de parâmetros biológicos de A. aegypti recém retrocruzados, contendo o background genético brasileiro, em preparação para liberações em campo, criados em diferentes condições estressantes. Para ambas as cepas estudadas, houve uma diferença significativa no tempo de desenvolvimento larval apenas na condição mais estressante, independente do sexo. Com relação à infecção por wMel, nós observamos uma série de mudanças fenotípicas, indo desde nenhum efeito aparente para alguns parâmetros (fecundidade e fertilidade), a parcialmente prejudiciais (longevidade e tamanho corpóreo na condição mais estressante), e parcialmente benéficos (níveis elevados de glicogênio, uma fonte chave de reserva nutricional, sob a condição mais estressante). Em termos dos níveis da infecção por Wolbachia, houve de forma geral, uma maior concentração da bactéria no background genético dos mosquitos brasileiros ao longo do tempo para a cepa wMel, comparado ao background genético dos mosquitos australianos, exibindo uma taxa de transmissão materna de 94%. A taxa de incompatibilidade citoplasmática no background genético dos mosquitos brasileiros foi de 99,51% para esta mesma cepa. Para a cepa mais virulenta, wMelPop, houve de forma surpreendente, efeitos fenotípicos benéficos: o tempo de desenvolvimento larval foi menor nos indivíduos infectados, os quis apresentaram um maior tamanho corpóreo e maior reserva de glicogênio na condição altamente estressante comparado a fêmeas não infectadas. Em conclusão, nosso trabalho salienta alguns dos efeitos fenotípicos chave de Wolbachia na biologia de A. aegypti brasileiros, aonde ela é capaz de se fixar sem causar mudanças prejudiciais à biologia do hospedeiro. Nós também acreditamos que o trabalho contribui com informações relevantes com relação aos efeitos benéficos da cepa wMel, sendo esta adequada para aplicação destes mosquitos infectados no campo para possivelmente controlar no futuro os surtos de dengue no Brasil. / Wolbachia constitutes a genus of obligate, intracellular, maternally-transmitted, gram-negative bacterial endosymbionts. It is estimated that between 20 to 70% of all known arthropods are infected by these alphaproteobacteria, which in their hosts cause a variety of biological effects including "reproductive parasitism", which favors the spread of the bacteria in wild populations. Interestingly, natural populations of one of the most important disease vectors, Aedes aegypti, do not harbor Wolbachia, but when two Wolbachia strains, wMelPop and wMel were independently inserted into this species, they have significantly reduced the mosquito vectorial competence for DENV and Chikungunya viruses. Recently, Wolbachia has been trialed as a novel strategy for reducing the incidence of dengue fever (ED = www.eliminatedengue.org). However, Wolbachia-based control of dengue will only be effective if the bacterial infection generated in the laboratory is able to fixate into wild mosquito population. With this in mind, we evaluated the effects of the wMelPop and wMel strains of Wolbachia on a variety of biological parameters of recently backcrossed Brazilian A. aegypti mosquitoes genetic background, in preparation for field releases, reared under different stress conditions. For both strains studied, there was a significant difference in larval development time only in the most stressful condition, where infected individuals developed more rapidly than uninfected, regardless of sex. With respect to the wMel infection, we observed several phenotypic changes, ranging from no effect at all for some parameters (fecundity, fertility), to partially detrimental (longevity and body size in highest stress condition), and partially beneficial effects (increased levels of glycogen, a key nutritional reserve, under the highest stress condition). In terms of Wolbachia infection levels, there was generally a higher bacterial concentration in the Brazilian genetic background over time for the wMel strain compared to the Australian genetic background, exhibiting a maternal transmission rate of 94%. The wMel rate of cytoplasmic incompatibility in the Brazilian genetic background was 99.51%. For the more virulent strain, wMelPop, there were surprisingly beneficial phenotypic effects: larval development time was lower in infected individuals, which also had an increased body size and glycogen content in highest stress condition compared to uninfected females. In conclusion, our work highlights some of the key phenotypic effects of Wolbachia on the biology of Brazilian A. aegypti, where it is able to reach fixation without causing detrimental changes to its host biology. We also think it contributes with relevant information regarding the beneficial effects of the wMel strain, being suitable for the application of these infected mosquitoes in the field and possibly control dengue outbreaks in the future in Brazil.

Submitted by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2013-01-25T11:29:24Z No. of bitstreams: 1 Ana Carolina dias bocewicz.pdf: 1333710 bytes, checksum: 1ed913d74cacbe095b6cb7c6c894b4e6 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-01-25T11:29:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ana Carolina dias bocewicz.pdf: 1333710 bytes, checksum: 1ed913d74cacbe095b6cb7c6c894b4e6 (MD5) Previous issue date: 2009 / Os dados recentes de incidência da dengue no Brasil indicam que a prevenção da proliferação dos vetores da doença não tem sido efetiva, apesar dos esforços governamentais e da crescente alocação de recursos para o seu controle. Ênfase tem sido dada ao controle da transmissão por meio do combate ao mosquito Aedes aegypti e à diminuição da letalidade da doença, melhorando a qualidade das redes de atenção à saúde e seus serviços médicos. Este estudo situa-se na vertente do controle vetorial, buscando contribuir para a promoção da proficiência de comportamentos preventivos na área da saúde. Usando um modelo experimental de barreira física (evidengue®), o presente estudo elaborou um catálogo de categorias de proficiência de vedação de pratos de vasos de plantas. Posteriormente este catálogo foi avaliado experimentalmente, adaptado a um folheto e a um vídeo, e aplicado por estes meios a um procedimento de instrução da proficiência de vedação em quatro turmas de estudantes de ensino médio. A avaliação obedeceu a um delineamento experimental por meio do qual uma aula expositiva sobre a dengue (A) foi conjugada ao folheto (F) e ao vídeo (V), sendo uma turma exposta à condição A+F, outra à A+V e outra à A+V+F. A quarta turma (controle) foi submetida apenas a A. Imediatamente após o procedimento de instrução, os estudantes das quatro turmas foram solicitados a demonstrar individualmente a colocação da evidengue em um prato de vasos de planta. Duas duplas de observadores independentes registraram a ocorrência ou não-ocorrência de cada categoria por meio de uma lista de verificação (check-list). Medidas de concordância entre observadores foram obtidas e resultaram em índices de concordância superiores a 79%. A comparação da proficiência alcançada pelos alunos nas quatro condições de instrução mostra que a condição A+V+F, que combinou a aula expositiva à instrução explícita da proficiência por meio do folheto e do vídeo, resultou em níveis de proficiência significativamente mais elevados do que nas outras condições. Dada a constatação de numerosos estudos de que a conscientização das populações a respeito da gravidade do problema da dengue raramente se traduz em ações de efetivo controle vetorial, parece clara a necessidade da pesquisa de técnicas instrucionais de comportamentos que sejam diretamente relacionadas a este objetivo. O presente estudo parece indicar que a busca de uma tecnologia de instrução da proficiência de comportamentos preventivos na área da saúde pode caminhar paralelamente ao desenvolvimento de recursos tecnológicos destinados a prevenir a proliferação dos vetores da doença. / Recent data on the incidence of dengue in Brazil indicate that the prevention of the disease vectors’ proliferation has not been effective, despite government’s efforts and the increasing amount of financial resources allocated to its control. Emphasis has been given to controlling the disease by three means: (a) the fight against the mosquito Aedes aegypti, (b) the reduction of the disease’s lethality and (c) the improvement of the quality of health care networks and its services. The present study places itself in the area of vector control, seeking to contribute to the promotion of proficiency skills of preventive health behaviors. Using an experimental model of physical barrier (evidengue®), the study produced a catalogue of proficiency categories for the sealing of flowerpot saucers. This catalogue was adapted to a folder and a video and was experimentally evaluated through an instruction procedure of proficiency skills in four classes of high school students. The evaluation followed an experimental design by which a lecture about dengue (L) was associated to the folder (F) and the video (V), being one class exposed to the condition L+F, another to the condition L+V, and the other to the condition L+V+F. The fourth class (control) was subjected only to L. Immediately after the instruction procedure, the students of the four classes were asked to demonstrate individually how to place the evidengue on a saucer of flowerpot. Two pairs of independent observers registered the occurrence or non-occurrence of each category of the catalogue by means of a check-list. Agreement measures between observers resulted in levels of agreement exceeding 79%. A comparison of the levels of proficiency achieved by the students in the four instruction conditions shows that the condition L+F+V – which associated the lecture to explicit instructions of proficiency through the folder and the video – yielded levels of proficiency significantly higher than the other conditions. Given that numerous studies have shown that the awareness of the seriousness of dengue rarely translates itself into actions for an effective vector control, it seems clear the need for the development of instructional techniques that are directly related to this objective. The present study suggests that the search for a technology of instruction of preventive health behaviors may be pursued together with the development of technological resources aimed at the prevention of the disease vectors’ proliferation.

Submitted by Stephany Silva (stephany.silva@cpqam.fiocruz.br) on 2016-09-16T13:46:13Z No. of bitstreams: 1 2015lima-kfa.pdf: 3114947 bytes, checksum: 0d9150a2df9afa75d5a290834a43483a (MD5) / Approved for entry into archive by Adagilson Silva (adagilson@cpqam.fiocruz.br) on 2016-09-16T19:22:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015lima-kfa.pdf: 3114947 bytes, checksum: 0d9150a2df9afa75d5a290834a43483a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-16T19:22:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015lima-kfa.pdf: 3114947 bytes, checksum: 0d9150a2df9afa75d5a290834a43483a (MD5) Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil / Este estudo avaliou o desempenho biológico e reprodutivo de machos de Aedes aegypti esterilizados por radiação gama e seu potencial para uso no controle da espécie, através da técnica do inseto estéril (TIE). A eficácia de esterilização de diferentes doses de radiação gama, 30, 40 e 50 Gy, foi avaliada em machos irradiados (MI) na fase de pupa. O seu efeito sobre a longevidade e competitividade de acasalamento dos MI, sobre a fecundidade e fertilidade das fêmeas acasaladas com estes machos, bem como de fêmeas também irradiadas (FI), foram parâmetros analisados. Os testes de competitividade foram conduzidos em gaiolas teladas (2 X 2 m) em condições simuladas de campo, onde foram liberados machos irradiados e machos não irradiados (MNI), nas seguintes proporções: 5:1, 10:1 e 15:1. Os resultados revelaram que o fitness biológico e reprodutivo dos mosquitos são afetados pela radiação, de modo que os efeitos são diretamente proporcionais a dose de radiação utilizada. O parâmetro de longevidade apresentou diferenças significativas, tanto quando os MI foram analisados de forma individual quanto em grupo. Para a maior dose, MI e FI viveram em média 19,6 ± 2,2 dias e 25,8 ± 2,2 dias, respectivamente, enquanto que no grupo controle, estes valores foram de 24,9 ± 2,5 dias e 30,4 ± 2,5 dias. Foi observado também um efeito da radiação na fecundidade das fêmeas irradiadas (FI), visto que 100 por cento delas não realizaram postura e na fertilidade de machos irradiados (MI), expostos às doses de 40 e 50 Gy, cujo cruzamento com fêmeas não irradiadas promoveu cerca de 80 por cento e 100 por cento de inviabilidade dos embriões. Nos experimentos de competitividade, na menor proporção (5:1) apenas 24,5 por cento dos ovos estavam inviáveis, enquanto que nas proporções maiores (10:1 e 15:1) este percentual aumentou para cerca de 80 por cento. Estes resultados sugerem que para a supressão de A. aegypti pela TIE, em campo, será necessária uma quantidade de machos estéreis, pelo menos, 10 vezes maior do que a de machos selvagens. Em conclusão, machos esterilizados por radiação gama parecem ser competitivos e com potencial para uso nas condições locais de campo, como um método espécie-específico de controle para A. aegypti (AU)