Orientador: Aguemi Kohayagawa / Banca: Alexandre Secorun Borges / Banca: Maria Lucia Gomes Lourenço / Banca: Maria Helena Matiko Akao Larsson / Banca: Wilson Roberto Fernandes / Resumo: O presente estudo pretendeu avaliar o efeito fisiológico do exercício sobre os marcadores cardíacos e de lipoperoxidação, o efeito da suplementação com vitamina E, e a determinação da albumina modificada pela isquemia (AMI) como um possível marcador de isquemia miocárdica em equinos sem treinamento prévio e submetidos ao exercício de rápida aceleração e curta duração (TRA) e de baixa intensidade e longa duração (TLD). Para tanto, foram utilizados 10 equinos, sendo cinco Árabes e cinco Crioulos, sem treinamento prévio, que realizaram o primeiro TRA e, sete dias depois, o TLD1. Em seguida, durante 52 dias os equinos receberam vitamina E (dl-alfa-tocoferol) na dose de 1.000 UI/dia e, posteriormente, realizaram o TRA2 e o TLD2 com sete dias de intervalo. Determinou-se o malondialdeído (MDA) plasmático, as concentrações séricas de troponina I cardíaca (TCI), isoenzima MB da creatinoquinase (CK-MB), mioglobina e AMI. Observou-se que os exercícios dos testes TRA e TLD promoveram estresse miocárdico em equinos evidenciado pelo aumento de CK-MB, mas não foi considerado grave. Houve ainda o efeito benéfico da suplementação da vitamina E pela diminuição da concentração de MDA plasmático em ambos os tipos de exercícios, e de TCI sérica no TRA2. A AMI não se mostrou eficaz na detecção de isquemia miocárdica nos equinos avaliados, uma vez que em ambos os tipos de exercício não promoveram alterações significativas, sugerindo-se que não seja sensível para esse tipo de avaliação nessa espécie / Abstract: This study aimed to evaluate the physiological effect of exercise on cardiac and lipoperoxidation markers, effect of vitamin E supplementation, and ischemia modified albumin (AMI) determination as a possible marker for myocardial ischemia in horses submitted to rapid acceleration and short duration (TRA) exercise and to low intensity and long duration (TLD) exercise. Ten horses, five Arabian and five Crioulo, performed the first TRA, and TLD1 seven days later. Horses received vitamin E (dl-alpha-tocopherol) for 52 days at a daily dose of 1,000 IU, and then they performed TRA2, and TLD2 seven days after. Plasma malondialdehyde (MDA), serum cardiac troponin I (TIC), creatine kinase isoenzyme MB (CK-MB), myoglobin and AMI were determined. Both TRA and TLD caused myocardial stress in horses revealed by the CK-MB increase, but it was not considered serious. There was also a beneficial effect of vitamin E by decreased plasma MDA concentration in both types of exercise, and by lower TIC level in TRA2. AMI was not effective in detecting myocardial ischemia in horses, since in both exercise types there were no significant changes, suggesting that it is not a sensitive marker to assess ischemic condition in this species / Doutor

Orientador: Dimas Tadeu Covas / Banca: José Orlando Bordin / Banca: Carmino Antônio de Souza / Banca: Orlando Castro e Silva Júnior / Banca: Aparecida Maria Fontes / Resumo: Alguns trabalhos realizados recentemente relatam que as células-tronco mesenquimais (CTM) podem ser induzidas à aquisição de marcadores hepatocíticos pelo transplante em modelos animais de dano hepático, ou pelo cultivo in vitro com fatores de crescimento e citocinas. O presente trabalho teve por objetivo avaliar o comportamento das CTM frente à indução da diferenciação hepatocítica. As CTM foram isoladas da medula óssea de quatro doadores saudáveis, caracterizadas e submetidas ao protocolo de indução à diferenciação hepatocítica in vitro e in vivo. As células induzidas in vitro apresentaram mudanças na sua morfologia, mostrando a morfologia semelhante à do hepatócito, porém, o perfil imunofenotípico não foi modificado. As células induzidas também não apresentaram o aumento dos transcritos de albumina, citoqueratina 18 e citoqueratina 19 quando analisadas por RT-PCR em tempo real, e não alteraram a expressão de albumina, citoqueratina 18 e alfafetoproteína como demonstrado por imunofluorescência. Quando analisadas in vivo, as CTM demonstraram o potencial migratório para o tecido hepático danificado de camundongos imunodeficientes. Em conjunto, os resultados sugerem que as CTM da medula óssea não são capazes de se diferenciar em hepatócitos quando estimuladas in vitro pela metodologia utilizado neste trabalho, mas são capazes de migrar para o tecido hepático danificado in vivo, o que sugere o seu papel no reparo do fígado. A contribuição para o reparo pode estar associada com o efeito parácrino dessas células. / Abstract: Some recently works have been reported that mesenchymal stem cells (MSC) can be induced to the acquisition of hepatocytic markers for the transplant in animal models of liver damage, or for the in vitro culture with growth factors and cytokines. The present work aim is to evaluate the behavior of the MSC in front of the induction of the hepatocytic differentiation. The MSC was isolated from the bone morrow of 4 normal donators, characterized and submitted to the protocol of in vitro and in vivo induction of hepatocytic differentiation. The in vitro induced cells showed morphology changes acquiring hepatocytes-like morphology. However, the immunophenotypic profile of those cells was not modified. The induced cells did not present increase of the albumin, cytokeratin 18 and cytokeratin 19 transcripts, when analyzed by real time RTPCR. The expression of albumin, cytokeratin 18 and alpha foetoprotein was also not modified as demonstrated by immunofluorescence. In vivo, the MSC have demonstrated the migratory potential for the damaged liver of immunodeficient mice. Together, the results suggest that the bone morrow MSC are not capable of in vitro hepatocytic differentiating according to the approach in this work, but are capable to homming into damaged hepatic tissue in vivo. This migration capacity suggests their role in the repair mechanisms. / Doutor