Made available in DSpace on 2016-03-28T12:39:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 carolina_aquino_ioc_mest_2013.pdf: 3546414 bytes, checksum: 50b9e1b7b83e8026e691cf54a5cbe6d8 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016-01-13 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A leptospirose é uma doença zoonótica causada por bactérias do gênero Leptospira sp. A ausência de um teste diagnóstico rápido e confiável dificulta o diagnóstico precoce e o acesso ao impacto da leptospirose na saúde pública. O Teste de Microaglutinação, considerado padrão-ouro pela Organização Mundial de Saúde, é realizado em poucos laboratórios de referência no mundo e, apesar de altamente específico, apresenta baixa sensibilidade na fase inicial da doença. O objetivo do presente estudo foi identificar novos alvos proteicos a serem empregados como marcadores diagnósticos para leptospirose. Para tal, foi construído um microarranjo de proteínas compreendendo 61% do genoma codificante de Leptospira interrogans sorovar Copenhageni e investigou-se a resposta por anticorpos IgG de 274 indivíduos, sendo 80 pacientes em fase aguda da doença, 80 em fase convalescente e 114 indivíduos saudáveis provenientes de área com transmissão endêmica e não endêmica para doença Foram encontrados 16 antígenos capazes de identificar casos agudos de leptospirose e 18 capazes identificar casos convalescentes. Entre estes, antígenos como LipL32 e os domínios das proteínas Lig já foram previamente descritos como sendo reconhecidos por soros de pacientes humanos, atuando como prova de conceito para a plataforma de microarranjo proteico. Novos antígenos também foram identificados no estudo, como a proteína hipotética LIC10215, que mostrou alta acurácia na identificação de casos agudos e convalescentes de leptospirose. Os antígenos imunodominantes identificados demonstram potencial uso no desenvolvimento de novos ensaios diagnósticos e no melhoramento dos testes diagnósticos disponíveis no mercado. Estudos complementares serão realizados para avaliar o desempenho desses antígenos nos formatos de ELISA e/ou de teste rápido / Leptospirosis is a zoonotic disease caused by bacteria of the genus Leptospira sp. The lack of a rapid and reliable point-of-care diagnostic test is a major barrier not only to assess the global burden of the disease but also to provide an ear ly diagnosis. Despite the high specificity of the microaglutination test, which is the gold standard test for di agnosing leptospirosis according to the World Health Organization, it presents low sensitivity and is performed in few reference laboratories worldwide. Therefore, the aim of this work was to identify new protein targets to be used as diagnostic markers for leptospirosis. Accordingly, we developed a protein microarray chip comprising 61% of the Leptospira interrogans serovar Copenhageni coding genome and investigated the IgG response of 274 individuals, including 80 convalescent- and 80 acute-ph ase patients and 114 healthy i ndividuals from areas with endemic and non-endemic transmission of the dis ease. We found 16 antigens that identified acute leptospirosis cases and 18 antigens that identified convalescent cases. Among these antigens are LipL32 and the unique domains of the Lig proteins, which have already been described as seroreactive antigens among leptos pirosis patients, thus acting as a proof-of- concept for the protein microarray platform. Nove l antigens were also identified in this study, such as the hypothetical protein LIC10215, that showed high diagnostic accuracy for both acute and convalescent cases. The imunodominant antigens identified here are potential candidates for the development of new diagnosti c assays as well as for the improvement of currently available tests. Further studies are needed to evaluate their performance in ELISA and rapid test platforms