Made available in DSpace on 2016-08-16T18:18:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese MARCELO SOUZA DE ANDRADE.pdf: 1768433 bytes, checksum: 8051d8f14c6a38ec8166fcb2e817b674 (MD5) Previous issue date: 2012-04-25 / FUNDAÇÃO DE AMPARO À PESQUISA E AO DESENVOLVIMENTO CIENTIFICO E TECNOLÓGICO DO MARANHÃO / Introduction. The androgen insensitivity syndrome (AIS) is a rare disease (1:20,000 to 1:64.000)-linked X chromosome, which generates a disorder of sexual differentiation of the male fetus (XY) with a spectrum of phenotypes ranging from females complete (CAIS) to a male phenotype with discrete signs of androgen insensitivity. An increasing number of mutations have been cataloged and nearly 500 mutations have been related to CAIS and 1000 to the androgen receptor gene. The AR gene is located on Xq11-12, with eight exons, about 919 amino acids. Objective. To characterize the mutations in the AR gene families in the region of the "Bico do Papagaio" in the southwestern state of Maranhao. Methodology. We used molecular biology techniques such as DNA extraction, PCR, electrophoresis, purification of PCR products and sequencing. In addition, we analyzed the clinical and hormonal characteristics of 14 patients and their families. Results. In one family (with two twin affected), we found the mutation R753X and the third molecular diagnosis of CAIS in twins described in the World. In another family, with 12 patients, was identified a new mutation in exon 8, as described P893A, protein AR. Conclusion. This work enabled the application of molecular techniques for the accurate diagnosis of AIS, genetic counseling for relatives of affected patients, and contribute to the formation of more qualified human resources, aiming at the development of biotechnology in the state of Maranhão. / Introdução. A Síndrome de Insensibilidade Androgênica (AIS) é uma doença rara (1:20.000 a 1:64.000), de transmissão ligada ao cromossomo X, que gera um distúrbio da diferenciação sexual do feto masculino (XY) com um espectro de fenótipo que varia desde o feminino completo (CAIS) até um fenótipo masculino com discretos sinais de insensibilidade androgênica. Um número crescente de mutações tem sido catalogadas e quase 500 mutações já foram relacionadas à CAIS e cerca de 1000 ao gene do receptor androgênico. O gene AR localiza-se em Xq11-12, com 8 exons, com cerca de 919 aminoácidos. Objetivo. Caracterizar as mutações no gene AR em famílias da região do Bico do Papagaio , no sudoeste do Estado do Maranhão. Metodologia. Foram utilizadas técnicas de biologia molecular como extração de DNA, PCR, Eletroforese, Purificação de produtos de PCR e Sequenciamento automático. Além disso, foram analisados o quadro clínico e hormonal de 14 pacientes e de seus familiares. Resultados. Em uma das famílias (com duas gêmeas afetadas), foi encontrada a mutação R753X, sendo o terceiro diagnóstico molecular de CAIS em gêmeas descrito no Mundo. Em outra família, com 12 pacientes, foi a identificada uma mutação nova no exon 8, descrita como P893A, na proteína AR. Conclusão. Este trabalho possibilitou a aplicação de técnicas moleculares para o diagnóstico preciso de AIS, aconselhamento genético aos familiares das pacientes afetadas, além de contribuir para a formação de recursos humanos mais qualificados, visando o desenvolvimento da biotecnologia no Estado do Maranhão.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:16:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao wyara biologia.pdf: 1287742 bytes, checksum: 4b2f592f2b219248664d4916820cd874 (MD5) Previous issue date: 2009-03-31 / Male idiopathic infertility is related to defects in normal spermatogenesis, due to genetic causes. The spermatogenesis is a dependent process on high levels of male sex hormones, the androgens. The androgen, in turn, perform its function when associated with the androgen receptor (AR), protein encoded by AR gene. Mutation in AR gene lead to a synthesis of non functional AR, which results in the failure of the process of spermatogenesis and, consequently, causes male infertility. This work has as its main objective the verification of the occurrence of mutation in the AR gene in patients with male idiopathic infertility who come from the HC-UFG Human Reproduction Center. Samples were analyzed from 206 patients. The result was that 95 patients were found to be normal while 111 with an altered result for the spermogram. The samples were amplified for exons 1, 4, 6, 7 and 8 of the AR gene and the results subjected to statistical analysis, Mann Whitney, logistic regression, and chi tests. The existence of the relationship between defects of sperm and AR gene mutation was verified. The analysis of the relationship between the spermogram and the AR gene mutation in five evaluated exons was significant only for exons 1 and 7. Patients with numerical unsettled spermogram had a higher frequency of mutations in exon 7, teratozoospermics in exon 1 and exon 7 in astenozoospermics patients. Exons 4, 6 and 8 showed no meaningful statistical relationship in reference to the alteration of the spermogram. Among results related to social custom, alcohol proved to be significant for mutation in the AR gene. This study has reaffirmed the relationship between the presence of mutation in AR genes as probable causes of defects in spermatogenesis. Consequently, male idiopathic infertility depends not only on the genetic factor, but also on the association between this factor and the environment where man inhabits / A infertilidade masculina idiopática está relacionada a defeitos na espermatogênese normal, devido a causas genéticas. A espermatogênese é um processo dependente de altos níveis de hormônios sexuais masculinos, os andrógenos. E os andrógenos, por sua vez, exercem sua função quando associados ao receptor androgênico (RA), proteína codificada pelo gene RA. Mutações no gene RA levam a síntese do RA não funcional, o que acarreta em falhas no processo de espermatogênese e consequentemente causam infertilidade masculina. O trabalho teve como principal objetivo verificar a ocorrência ou não de mutação no gene RA em pacientes com infertilidade masculina idiopática do Centro de Reprodução Humana do HCUFG. Foram analisadas 206 amostras de pacientes, sendo 95 normais e 111 alterados para o espermograma. As amostras foram amplificadas para os exons 1, 4, 6, 7 e 8 do gene RA e os resultados submetidos às análises estatísticas, teste U, quiquadrado e regressão logística. Foi verificada a existência de relação entre alteração no espermograma e mutação no gene RA. A análise da relação entre espermograma e mutação no gene RA dos cinco exons avaliados foi significativa somente para os exons 1 e 7. Os pacientes com alteração numérica para o espermograma apresentaram uma freqüência maior de mutações no exon 7, os pacientes teratozoospérmicos no exon 1 e os astenozoospérmicos no exon 7. Os exons 4, 6 e 8 não apresentaram relação estatística significativa para alterações no espermograma. Dentre os resultados referentes aos hábitos sociais, o etilismo mostrou-se significativo para mutações no gene RA. A realização desse estudo vem reafirmar a relação entre presença de mutações no gene RA como prováveis causas de defeitos na espermatogênese e, consequentemente, infertilidade masculina idiopática, não dependendo exclusivamente do fator gênico, mas da associação entre este fator e o meio ambiente onde o homem está inserido