As distrofias musculares constituem um grupo de doenças caracterizadas por degeneração progressiva e irreversível da musculatura. A Distrofia Muscular de Duchenne (DMD) é uma miopatia letal causada pela deficiência da distrofina, proteína integrante do citoesqueleto muscular, cujo gene possui característica recessiva e localiza-se na porção p21 do cromossomo X. Avanços nos cuidados terapêuticos dos pacientes afetados pela DMD têm aumentado a expectativa e qualidade de vida dos mesmos. Por este motivo, questões de ordem fisiológica e/ou ética, antes não pensadas, dentre elas possibilidades reprodutivas destes pacientes, começaram a ser discutidas. Os modelos animais são muito úteis para se traçar paralelos entre achados morfológicos, fisiológicos, prognósticos e tratamentos de determinadas doenças que acometem o homem. A Distrofia Muscular do Golden Retriever (GRMD) é uma doença que naturalmente acomete esta raça, podendo ser um ótimo modelo animal para estudos da DMD, pois apresenta fisiopatologia semelhante. O objetivo deste estudo foi investigar a existência de possíveis alterações morfológicas do trato reprodutivo masculino e relacioná-las com o quadro espermático destes cães. Para tanto foram utilizados 5 cães com GRMD e 4 cães sadios, tendo sido realizadas ao todo 37 colheitas de sêmen, a intervalos aproximados de 30 dias entre elas. Após espermiograma de rotina, o sêmen foi avaliado quanto à integridade da membrana acrossomal (FITC-PSA), à atividade mitocondrial (JC-1) e à estrutura da cromatina (SCSA) utilizando-se a técnica da citometria de fluxo e quanto à resistência ao estresse oxidativo pela dosagem de TBARS. Fragmentos de testículo, epidídimo e próstata de cinco animais com GRMD e de 1 animal sadio foram coletados para avaliação histológica. As avaliações seminais não demonstraram diferença significativa (p>0,05) entre os grupos afetado e controle, embora as avaliações histológicas tenham mostrado alterações significativas em todos os tecidos analisados. Isto sugere que ejaculados de homens com DMD podem ser obtidos com estimulação apropriada e, utilizando técnicas de fecundação in vitro, combinada com diagnóstico genético pré-implantacional de desordem genética para um único gene, podem satisfazer o desejo de paternidade de pacientes portadores de DMD, com o nascimento de crianças não afetadas. / Muscular dystrophies constitute a group of diseases characterized by progressive and irreversible muscle degeneration. Duchenne´s Muscular Dystrophy (DMD) is a lethal myopathy caused by dystrophin deficiency, a muscular cell cytoskeleton protein. The dystrophin gene have recessive characteristic and is located in the p21 portion of the X chromosome. Advancements in the therapeutic cares of the affected by the DMD have been increasing their life expectancy and quality. For this motive, physiologic and/or ethics questions, like reproductive means of these patients, began to be discussed. Animal models are very useful in drawing parallels between morphologic and physiologic findings, predictions and treatments of diseases that affect man. The Golden Retrievers Muscular Dystrophy (GRMD) is a natural disease of this race, being the best animal model for DMD studies, since it presents similar physiopathology. The aim of this study was to investigate the existence of possible morphological alterations of the male reproductive tract and their connection with the sperm qualities of these dogs. For so, thirty seven ejaculates from 5 GRMD affected dogs and 4 non-affected Golden Retrievers were collected monthly and evaluated in five different replicates. After routine spermogram, the acrosome integrity (FITC-PSA), the mitochondrial activity (JC-1) and the DNA structure (SCSA) were evaluated by flow cytometry technique. The resistance to the oxidative stress was measured by the TBARS dosage. Fragments of testicle and epididymis of five GRMD affected animals and 1 healthy animal were collected for histological evaluation. No significant difference were found in seminal evaluations (p> 0,05) between affected and control groups, though significant alterations have been seen in the histological evaluations of all the analyzed cloths. This animal model suggests that ejaculates of DMD men can be obtained by the proper stimulation, and that the conventional in vitro fertilization techniques combined with pre-implantation genetic diagnosis for single gene disorders may be efficient to satisfy the desire of paternity of DMD patients with the birth of non-affected children.

As distrofias musculares constituem um grupo de doenças caracterizadas por degeneração progressiva e irreversível da musculatura. A Distrofia Muscular de Duchenne (DMD) é uma miopatia letal causada pela deficiência da distrofina, proteína integrante do citoesqueleto muscular, cujo gene possui característica recessiva e localiza-se na porção p21 do cromossomo X. Avanços nos cuidados terapêuticos dos pacientes afetados pela DMD têm aumentado a expectativa e qualidade de vida dos mesmos. Por este motivo, questões de ordem fisiológica e/ou ética, antes não pensadas, dentre elas possibilidades reprodutivas destes pacientes, começaram a ser discutidas. Os modelos animais são muito úteis para se traçar paralelos entre achados morfológicos, fisiológicos, prognósticos e tratamentos de determinadas doenças que acometem o homem. A Distrofia Muscular do Golden Retriever (GRMD) é uma doença que naturalmente acomete esta raça, podendo ser um ótimo modelo animal para estudos da DMD, pois apresenta fisiopatologia semelhante. O objetivo deste estudo foi investigar a existência de possíveis alterações morfológicas do trato reprodutivo masculino e relacioná-las com o quadro espermático destes cães. Para tanto foram utilizados 5 cães com GRMD e 4 cães sadios, tendo sido realizadas ao todo 37 colheitas de sêmen, a intervalos aproximados de 30 dias entre elas. Após espermiograma de rotina, o sêmen foi avaliado quanto à integridade da membrana acrossomal (FITC-PSA), à atividade mitocondrial (JC-1) e à estrutura da cromatina (SCSA) utilizando-se a técnica da citometria de fluxo e quanto à resistência ao estresse oxidativo pela dosagem de TBARS. Fragmentos de testículo, epidídimo e próstata de cinco animais com GRMD e de 1 animal sadio foram coletados para avaliação histológica. As avaliações seminais não demonstraram diferença significativa (p>0,05) entre os grupos afetado e controle, embora as avaliações histológicas tenham mostrado alterações significativas em todos os tecidos analisados. Isto sugere que ejaculados de homens com DMD podem ser obtidos com estimulação apropriada e, utilizando técnicas de fecundação in vitro, combinada com diagnóstico genético pré-implantacional de desordem genética para um único gene, podem satisfazer o desejo de paternidade de pacientes portadores de DMD, com o nascimento de crianças não afetadas. / Muscular dystrophies constitute a group of diseases characterized by progressive and irreversible muscle degeneration. Duchenne´s Muscular Dystrophy (DMD) is a lethal myopathy caused by dystrophin deficiency, a muscular cell cytoskeleton protein. The dystrophin gene have recessive characteristic and is located in the p21 portion of the X chromosome. Advancements in the therapeutic cares of the affected by the DMD have been increasing their life expectancy and quality. For this motive, physiologic and/or ethics questions, like reproductive means of these patients, began to be discussed. Animal models are very useful in drawing parallels between morphologic and physiologic findings, predictions and treatments of diseases that affect man. The Golden Retrievers Muscular Dystrophy (GRMD) is a natural disease of this race, being the best animal model for DMD studies, since it presents similar physiopathology. The aim of this study was to investigate the existence of possible morphological alterations of the male reproductive tract and their connection with the sperm qualities of these dogs. For so, thirty seven ejaculates from 5 GRMD affected dogs and 4 non-affected Golden Retrievers were collected monthly and evaluated in five different replicates. After routine spermogram, the acrosome integrity (FITC-PSA), the mitochondrial activity (JC-1) and the DNA structure (SCSA) were evaluated by flow cytometry technique. The resistance to the oxidative stress was measured by the TBARS dosage. Fragments of testicle and epididymis of five GRMD affected animals and 1 healthy animal were collected for histological evaluation. No significant difference were found in seminal evaluations (p> 0,05) between affected and control groups, though significant alterations have been seen in the histological evaluations of all the analyzed cloths. This animal model suggests that ejaculates of DMD men can be obtained by the proper stimulation, and that the conventional in vitro fertilization techniques combined with pre-implantation genetic diagnosis for single gene disorders may be efficient to satisfy the desire of paternity of DMD patients with the birth of non-affected children.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:46:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 732491 bytes, checksum: c2af66010c87f8d24393ea862d22b7f5 (MD5) Previous issue date: 2004-03-29 / The objective of the present work was to study the relationship between two methods of evaluation (CAP Andrologic Evaluation by Points and Sexual Behavior) of Nelore bulls (Bos taurus indicus), and verify the accuracy of the tests to predict the reproductive potential of the bulls, by the gestation rate at the end of the breeding season of ninety days. Fourteen Nelore bulls were used, all classified like ables to reproduction, evaluated by an andrologic examination and submited to an andrologic classification by points (CAP) and observation of the sexual behavior at field (test of libido) by consecutives 12 hours. Of these, eleven bulls were evaluated in individual handling, with an average proportion bull:cow of 1:46 and the rest of the animals (three) were evaluated in a multiple handling, with an average proportion bull:cow of 1:23. The CAP had an average pontuation of 78.92 ± 8.92 (very good) and score of 9.85 ± 0.36 (excellent) for the libido. The greater the time of the test, the highest the libido scores were, but when the bulls were observed for the first hour as questionable, at the end of the test (12 hours) they showed excellent libido. The correlations among libido, scrotal perimeter (PE), physics and morphological characteristics of semen and the gestation rate were low and no significatives (P>0,05). The correlations among CAP, scrotal perimeter (PE) and physics characteristics of semen were positive and significative (P<0,05), but, for the morphologic characteristics, were not (P>0,05). The correlation between CAP and gestation rate was negative and significative (P<0,05). The correlation between libido and the CAP was not significative (P>0,05). The general gestation rate after a period of breeding season was of 74.69 %. During the libido test, the average frequency of the physiological events related to the sexual behavior was practically uniform among all the bulls, which showed higher incidence of smelling and licking of the vulva, Flehmen reflex (RF) and mount relflex (RM). When the behavior classification frequency were compared between the morning and afternoon period of observations, there was a difference between the behaviors classification like identification, precopulatories and others, except for copulation behavior. Showing that the identification behavior was higher in the morning time (from 6:00 to 12:00 h), while the pre-copulatories behaviors and others behaviors were more frequent in the afternoon time (12:00 to 18:00 h). These results indicate that CAP or libido test are independent evaluations and must be used like a complement of the andrologic examination. / O objetivo do presente trabalho foi estudar a relação entre dois métodos de avaliação (CAP Classificação Andrológica por Pontos e Comportamento Sexual) de touros da raça Nelore (Bos taurus indicus), e verificar a acurácia dos testes em predizer o potencial reprodutivo dos touros, por meio da taxa de gestação ao final da estação de monta de 90 dias em média. Foram utilizados 14 touros da raça Nelore, todos classificados como aptos à reprodução, avaliados por exame andrológico, e submetidos a classificação andrológica por pontos (CAP) e observação do comportamento sexual a campo (teste da libido), por 12 horas consecutivas. Desses, 11 touros foram avaliados em manejo individual, com proporção média touro:vaca de 1:46, e o restante (três animais) foram avaliados em manejo múltiplo, com proporção média touro:vaca de 1:23. O CAP teve pontuação média de 78,92 ± 8,92 (muito bom) e escore de 9,85 ± 0,36 (excelente) para a libido. Quanto maior o tempo de teste, maiores foram os escores da libido, sendo que na primeira hora de observação os touros foram classificados como questionáveis e ao no final do teste (12 horas) como de libido excelente. As correlações entre a libido com o perímetro escrotal (PE), as características físicas e morfológicas do sêmen e a taxa de gestação foram baixas e não significativas (P>0,05). As correlações entre o CAP e o PE e as características físicas do sêmen foram positivas e significativas (P<0,05), enquanto para as características morfológicas não foi observado correlação significativa (P>0,05). Já, a correlação entre o CAP e a taxa de gestação foi negativa e significativa (P<0,05). A correlação entre a libido e o CAP não foi significativa (P>0,05). A taxa geral de gestação alcançada após período de estação de monta foi de 74,69 %. Durante os testes da libido, a freqüência média dos eventos fisiológicos relacionados ao comportamento sexual foi praticamente uniforme entre todos os touros, apresentando maior incidência na realização dos eventos de cheirada e lambida de vulva (CV); reflexo de Flehmen (RF) e reflexo de monta (RM). Quando comparado a freqüência das classes de comportamentos entre dois períodos de observação (manhã e tarde), verificou-se diferença para as classes de comportamentos de identificação, pré-copulatórios e outros, exceto para a classe de comportamento de cópula. Demonstrando, assim, que a classe de comportamentos de identificação apresentou maior ocorrência no período da manhã (6:00 às 12:00 h), enquanto as classes de comportamentos pré-copulatórios e outros comportamentos foram mais freqüentes no período da tarde (12:00 às 18:00 h). Esses resultados indicam que tanto o CAP como o teste da libido são avaliações independentes e devem ser utilizadas de forma complementar ao exame andrológico.