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Avalia??o da produ??o e aplica??o de enzimas utilizando res?duo farelo de trigo como substrato por fermenta??o em estado s?lido

Bakker, Christiane Maria Christina N?brega 16 March 2017 (has links)
Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-07-17T12:57:32Z No. of bitstreams: 1 ChristianeMariaChristinaNobregaBakker_TESE.pdf: 2357774 bytes, checksum: 43174f7d2cb8dbbbc79d1d1db399831f (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-07-18T12:26:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 ChristianeMariaChristinaNobregaBakker_TESE.pdf: 2357774 bytes, checksum: 43174f7d2cb8dbbbc79d1d1db399831f (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-18T12:26:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ChristianeMariaChristinaNobregaBakker_TESE.pdf: 2357774 bytes, checksum: 43174f7d2cb8dbbbc79d1d1db399831f (MD5) Previous issue date: 2017-03-16 / Tendo em vista a dificuldade de destina??o final nos res?duos agroindustriais de unidades do grupo M. Dias Branco S.A., o presente trabalho teve como objetivo buscar alternativas para o aproveitamento de res?duos da produ??o de margarina e farelo de trigo como potenciais substratos para produ??o de produtos biotecnol?gicos. Inicialmente os res?duos foram caracterizados e se prospectou, nos respectivos res?duos, cepas potenciais produtoras de enzimas. Nos cultivos foram utilizados cons?rcios f?ngicos prospectados do res?duo farelo de trigo de unidade fabril, bem como cepas de fungos Aspergillus oryzae CCT n? 0975 ATCC9362, Trichoderma reesei CCT n? 2768 - QM 9414 e a bact?ria Bacillus cereus CCT n? 5457, adquiridos da cole??o de culturas da Funda??o Andr? Tosello-SP. Na avalia??o do potencial dos res?duos como substrato, em res?duos de margarina n?o foi observado crescimento microbiano nas condi??es testadas, apesar desse apresentar consider?veis percentuais de ?cidos graxos, assim, n?o prosseguiu-se os estudos com os res?duos de borra da refinaria e efluente da produ??o de margarinas. Como o farelo de trigo apresentou cerca de 40% de hemicelulose, realizou-se ensaios de fermenta??o em estado s?lido, com o material n?o lavado e n?o autoclavado, indentificando-se produ??o de xilanases nas primeiras 72 h de cultivo. A partir deste resultado foi realizado um Delineamento Composto Central Rotacional (DCCR) - planejamento fatorial 23, com tr?s repeti??es no ponto central e seis pontos axiais, obtendo a otimiza??o dos fatores do processo: umidade, pH e granulometria. Os fatores foram considerados significativos pela ANOVA com o n?vel de confian?a de 95%. O resultado otimizado de atividade enzim?tica de 11,78 ?0,01 UI/g ou 3,54 UI/mL utilizando pH 3,3, granulometria de 900,0 ?m e umidade de 40% foi verificado. O caldo enzim?tico obtido foi avaliado atrav?s da eletroforese, onde foi poss?vel observar duas bandas predominates de massa molar 14,4 e 30 kDa. Desnatura??o a partir de 60?C, extra??o est?vel com tamp?o acetato de s?dio e com ponto isoel?trico em pH na faixa de 5,5-6,5. O caldo foi considerado eficiente na modifica??o de tipifica??o de farinhas de trigo pelo estudo dos par?metros reol?gicos de massa fabricada com farinha aditivada com o caldo enzim?tico produzido, adotando-se an?lise do falling number e alveografia. O caldo se mostrou est?vel por 30 dias e manteve 50% de sua atividade xilanol?tica por 6 meses. O farelo de trigo se mostrou potencial substrato para induzir a produ??o de enzimas por FES utilizando-se o microrganismo Aspergillus orizae. O extrato enzim?tico obtido apresentou viabilidade para aplica??o na panifica??o com possibilidade de ser inserido na estrat?gia de inclus?o de novos produtos de inova??o em empresas de moagem. / In order to point alternatives for wheat bran disposal destination generated in food industries sector M. Dias Branco S.A., thus contributing with the reduction of the resultant impact of the deposition of residues in the environment. It has been evaluated in the present work the potential of the wheat bran as substrate for xylanase production by solid state fermentation using fungal consortiums as well as the Aspergillus oryzae (ATCC9362), Trichoderma reesei (2768), Bacillus cereus CCT n? 5457, from Funda??o Andr? Tosello-SP. The use of non-washed and non-autoclaved wheat bran as carbon and energy source on the solid state fermentation by the Aspergillus oryzae fungus showed greater percentage of the produced protein after 72 hours of cultivation. The use of a Central Composite Rotatable Design (CCRD) - 23 factorial planning with three repetitions at the central point as well as six axial points ? coupled to Surface Response Methodology (SRM) allowed to assay the influence of humidity, pH and grain size (independent variables or factors) on the xylanase activity (dependent variable or response) as well as to optimize the best condition for the enzyme production. Results showed that all factors and their combination were significant at 95% confidence level. The optimized xylanase activity was (11.78 ?0,01) UI/g or (3.54) UI/mL obtained at 40% of humidity, pH 3.3 with grain size of 900.0?m. The produced broth was stable for 6 months and remained about (50%) of the initial xylanase activity at 4?C. SDS-PAGE assay showed that xylanase has 14,4-30 kDa molar mass. The obtained enzymatic broth was efficient to modify wheat flours as shown by the falling number rheologic parameters and alveography assay.

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