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Estudo das atividades biológicas de frações proteicas do feijão comum (Phaseolus vulgaris) cultivar pérola / Study of the biological activities of protein fractions of common bean (Phaseolus vulgaris) cultivar pérolaRibeiro , Juliana Vila Verde 30 June 2017 (has links)
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Previous issue date: 2017-06-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Common bean (Phaseolus vulgaris) is considered a nutraceutical food, because it has bioactive compounds, such as peptides. These peptides have several biological activities, such as chelating, antioxidant, anticancer, antihypertensive and other activities. Thus, this study aimed to assess the bioactivity of protein fractions of common bean (Phaseolus Vulgaris) cultivar Pérola. In this work the flour obtained from the peeled beans freshly harvested beans, hardened and hardened autoclaved were evaluated as a source of bioactive peptides. Four solutions were used for the production of extracts: acetonitrile/water/formic acid, sodium acetate, Ammonium bicarbonate and alkaline pH 8.0 solubilization. In the extracts and the protein fractions were measured the protein content, antioxidant activity tests with DPPH (2.2-diphenyl-1-picrilhidrazil), chelating activity of iron and copper. 1 extract was chosen to give the segment next steps for presenting greater bioactivity, thus he was submitted to fractionation by ultrafiltration in 10 kDa membrane, where verified your bioactivity, resistance to thermal treatment and the stability of the Chelation complex formed from iron and peptide gastric conditions. And was rated the content of antinutritional factors in the extracts submitted to heat treatment. These tests found that the bean plant presented greater biological activities tested than other beans. In tests with the protein fractions found that the peptides present bioactivity and are and resistant to heat treatment, and to form complex is resistant gastric conditions chelators. Observed that the thermal treatment reduces the amount of antinutritional factors. In vivo studies showed that despite being the iron complex-peptide to be stable gastric conditions, the system was not able to pass through the membrane of enterocytes, being totally eliminated by the feces. This work contributed to expand the study of bioactive compounds present in wastes from agro-industry, in order to guide the proper use and the best way to explore the nutraceutical potential of this legume. / O feijão comum (Phaseolus vulgaris) é considerado um alimento nutracêutico, por apresentar compostos bioativos, como por exemplo, os peptídeos. Estes peptídeos apresentam diversas atividades biológicas, tais como atividade quelante, antioxidante, anticancerígena, anti-hipertensiva e outras. Deste modo, este estudo objetivou avaliar a bioatividade de frações proteicas de feijão comum (Phaseolus Vulgaris) cultivar Pérola. Neste trabalho as farinhas obtidas dos grãos descascados de feijões recém-colhidos, endurecidos e endurecidos autoclavados foram avaliadas como fonte de peptídeos bioativos. Foram utilizadas quatro soluções para produção dos extratos: acetonitrila/ água/ ácido fórmico, acetato de sódio, bicarbonato de amônio e solubilização alcalina
pH 8,0. Nos extratos e nas frações proteicas foram dosados o teor de proteínas, testes de atividade antioxidante com DPPH (2,2-difenil-1-picrilhidrazil), atividade quelante de ferro e de cobre. O extrato 1 foi escolhido para dar segmento às próximas etapas por apresentar maior bioatividade, deste modo ele foi submetido a fracionamento por ultrafiltração em membrana de 10 kDa, onde verificou sua bioatividade, resistência ao tratamento térmico e a estabilidade do complexo quelante formado a partir de ferro e peptídeo às condições gástricas. E foi avaliado o teor de fatores antinutricionais nos extratos submetidos ao tratamento térmico. Nestes testes o feijão autoclavado apresentou maiores atividades biológicas testadas do que os demais feijões. Nos testes com as frações proteicas observou-se que os peptídeos apresentaram bioatividade e foram resistentes ao tratamento térmico, e ao formar complexos quelantes são resistentes às condições gástricas. Observou-se que o tratamento térmico reduziu a quantidade de fatores antinutricionais. Os estudos in vivo evidenciaram que apesar do complexo ferro-peptídeo ser altamente estável às condições gástricas, o sistema não foi capaz de passar pela membrana dos enterócitos, sendo totalmente eliminado pelas fezes. Este trabalhou contribuiu para ampliar o estudo dos compostos bioativos presentes em resíduos da agroindústria, com intuito de nortear o uso adequado e o melhor caminho para se explorar o potencial nutracêutico desta leguminosa.
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Pept?deos ani?nicos presentes na pe?onha do escorpi?o Tityus stigmurus: avalia??o estrutural e atividade biol?gicaMelo, Menilla Maria Alves de 29 July 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-07-29 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / Venenos de escorpi?es constituem uma rica fonte de pept?deos, que podem ser classificados como pept?deos com liga??es dissulfeto e pept?deos sem liga??es dissulfeto. Pept?deos ani?nicos correspondem aos componentes sem liga??es dissulfeto mais abundante na pe?onha do escorpi?o Tityus stigmurus (esp?cie prevalente no nordeste brasileiro), sendo ricos em res?duos de ?cidos asp?rtico e glut?mico. Esta abordagem apresenta, pela primeira vez, a caracteriza??o estrutural e a avalia??o da atividade biol?gica de um pept?deo ani?nico presente na pe?onha do escorpi?o Tityus stigmurus, denominado TanP. A estrutura tridimensional do TanP foi predita por modelagem computacional e refinada por simula??es de din?mica molecular, sendo a estrutura secund?ria obtida por dicro?smo circular, e estabilidade estrutural avaliada em diferentes meios, pH, temperatura e presen?a de ?ons cobre. Al?m disso, utilizou-se a espectroscopia UV-vis?vel para avaliar a atividade quelante de TanP na presen?a de cobre. As atividades antimicrobiana, citot?xica, imunomoduladora e antioxidante tamb?m foram avaliadas. As an?lises de CD indicaram uma predomin?ncia de conforma??o rand?mica em meio aquoso, bem como mudan?as estruturais dependentes de pH e temperatura. Os ?ons cobre, ao se ligarem ao pept?deo, modificaram a estrutura do mesmo. Tais dados corroboraram com o que foi demonstrado na din?mica molecular. A raz?o molar de liga??o (TanP:cobre) na din?mica molecular foi 1:5, enquanto no ensaio de reatividade observou-se raz?es de 1:7 e 1:3, a depender da concentra??o de TanP na solu??o. TanP n?o induziu citotoxicidade para as c?lulas normais e cancer?genas testadas, e apresentou capacidade de inibir, in vitro, a libera??o de ?xido n?trico por macr?fagos estimulados por LPS. Desta forma, os resultados sugerem que TanP ? um pept?deo promissor para aplica??o terap?utica como um agente quelante, bem como agente imunomodulador e antioxidante. / Scorpion venoms are a rich source of peptides, which may be classified as disulfide-bridged or non-disulfide-bridged peptides. Among them, there are anionic peptides, rich in aspartic and glutamic acid residues. Despite being the most abundant component in the venom gland of Tityus stigmurus (the prevalent scorpion species in Northeast Brazil), they are poorly characterized in the literature. This work presents, for the first time, structural characterization and biological activity assays of an anionic peptide from the venom of the scorpion T. stigmurus, named TanP. The three-dimensional structure of TanP was obtained by computational modeling and refined by molecular dynamic (MD) simulations. Furthermore, we have performed circular dichroism (CD) analysis to predict TanP secondary structure, and UV-visible spectroscopy to evaluate its chelating activity. CD indicated predominance of random coil conformation in aqueous medium, as well as changes in structure depending on pH and temperature. TanP has chelating activity on copper ions, which modified the peptide?s secondary structure. These results were corroborated by MD data. The molar ratio of binding (TanP:copper) depends on the concentration of peptide. TanP was not cytotoxic to normal or cancer cell lines, and showed an ability to inhibit the in vitro release of nitric oxide by LPS-stimulated macrophages. In this way, the results suggest TanP is a promising peptide for therapeutic application as a chelating, immunomodulatory and antioxidant agent.
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