Šiame darbe tirta TetA ir AcrAB siurblių veikla Escherichia coli ląstelėse, panaudojant lipofilinius tetrafenilfosfonio (TPP+) jonus bei mikrobiologiniais ląstelių gyvybingumo tyrimo metodais įvertintas pasirinktų E. coli padermių jautrumas tetraciklinui. Buvo nustatyta, kad atspariausios tetraciklinui yra IQ86 ląstelės, transpozone Tn10 turinčios TetA siurblį koduojančius genus. Registruodami TPP+ pasiskirstymą tarp ląstelių ir jų inkubacinės terpės, nustatėme, kad tetraciklinas didina E. coli ląstelių išorinės membranos (IM) laidumą lipofiliniams junginiams. EDTA pagalba pralaidinus E. coli ląstelių IM, tetraciklinas lengviau patenka į ląstelę. Tai rodo, kad šis antibiotikas į ląstelę patenka ne tik per porinus, bet ir prasiskverbdamas per IM lipidinį dvisluoksnį. TPP+ jonus iš E.coli ląstelių išmetinėjantys DVA siurbliai taip pat sąveikauja ir su tetraciklinu bei chloramfenikoliu. Inkubuojant ląsteles su tetraciklinu, indukuojama šį antibiotiką išstuminėjančio TetA siurblio genų raiška. Vienok, inkubacija su tetraciklinu gali sutrikdyti kitų E. coli ląstelėse esančių DVA siurblių veiklą. Rezerpinas ir chlorpromazinas efektyviai slopina tetracikliną iš ląstelių išstuminėjančių siurblių veiklą, o fenilalanin-arginin- naftilamidas E. coli ląstelių atveju nepasižymi DVA siurblius slopinančiu poveikiu. Nustatyta, kad DVA siurblių slopiklių poveikis stipresnis, kai jie sąveikauja su ląstelėmis terpėje be antibiotikų. / We used lipophilic tetraphenilphosphonium (TPP+) ions for functional analysis of multidrug resistance (MDR) pumps TetA and AcrAB in Escherichia coli cells. We have found that tetracycline increases the cell outer membrane permeability to lipophilic compounds. Tetracycline entered the cells faster when the bacterial outer membrane was permeabilized using EDTA. These results indicate that tetracycline enters the cell not only through the porins, but also it penetrates the lipid bilayer of the outer membrane. MDR pumps extruding TPP+ ions from E. coli cells, also interact with tetracycline and chloramphenicol. Genes of TetA pump are induced, when the cells are incubated with low concentrations of tetracycline. On the other hand, incubation of the cells with tetracycline disturbs the activity of others MDR pumps in E. coli. Reserpine and chlorpromazine effectively inhibit activity of tetracycline-extruding MDR pumps, but Phe-Arg-β-naphtylamide does not show any inhibitory activity. Finally, it has been shown that action of the MDR pump inhibitors is stronger, when they are added to the bacterial suspension in the absence of antibiotics.

Šio darbo tikslas – nustatyti skirtingų laktobacilų antagonistines savybes ir atsparumą antibiotikams. Darbo tikslo įgyvendinimui iškelti sekantys uždaviniai: Išgryninti jogurtuose esančias laktobacilas – Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus rhamnosus. Ištirti laktobacilų Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus plantarum ir Lactobacillus fermentum antagonistines savybes Salmonella enteritidis, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Escherichia coli ir Proteus mirabilis bakterijoms. Ištirti laktobacilų Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus plantarum ir Lactobacillus fermentum atsparumą antibiotikams. Palyginti Lactobacillus plantarum ir Lactobacillus fermentum antagonistines savybes prieš liofilizaciją ir po liofilizacijos praėjus 10 metų. Tirtos pienarūgščių mikroorganizmų Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus plantarum ir Lactobacillus fermentum antagonistinis aktyvumas Salmonella enteritidis, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Escherichia coli ir Proteus mirabilis bakterijų atžvilgiu, bei atsparumas antibiotikams. Atlikus tyrimus nustatyta, kad Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus plantarum ir Lactobacillus fermentum kultūros pasižymi antagonistiniu aktyvumu Salmonella enteritidis, Staphylococcus aureus... [toliau žr. visą tekstą] / The aim of this work is to identify antagonistic characteristics of different lactobacillus as well as notify the resistance to antibiotics. In order for this work to succeed, the following tasks were adressed: Purification the following lactobacillus in yogurts – Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus rhamnosus. Examination the antagonistic characteristic of Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus plantarum and Lactobacillus fermentum for bacteria Salmonella enteritidis, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Escherichia coli and Proteus mirabilis. Examination of resistance to antibiotics of Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus plantarum and Lactobacillus fermentum. Comparison in antagonistic characteristics of Lactobacillus plantarum and Lactobacillus fermentum before lyophilization and after 10 years of lyophilization. The characteristics of the following lactic microorganisms have been examined: antagonistic activeness of Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus plantarum and Lactobacillus fermentum in terms of resistance to antibiotics in Salmonella enteritidis, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Escherichia coli and Proteus mirabilis bacteria. Performed examinations revealed that: Lactobacillus acidophillus, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus rhamnosus... [to full text]