FERREIRA, L. P. Diagnóstico e infecção experimental por Perkinsus beihaiensis em anomalocardia brasiliana (MOLLUSCA:BIVALVIA) no Estado do Ceará.. 2013. 61 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Marinhas Tropicais) - Instituto de Ciências do Mar, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2013 . / Submitted by Geovane Uchoa (geovane@ufc.br) on 2016-04-07T14:38:54Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_lpferreira.pdf: 1374005 bytes, checksum: 80f9e7531dfa6f2d25a1fb94f33ff1a2 (MD5) / Approved for entry into archive by Nadsa Cid (nadsa@ufc.br) on 2016-04-18T18:45:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_lpferreira.pdf: 1374005 bytes, checksum: 80f9e7531dfa6f2d25a1fb94f33ff1a2 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-18T18:45:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_lpferreira.pdf: 1374005 bytes, checksum: 80f9e7531dfa6f2d25a1fb94f33ff1a2 (MD5) Previous issue date: 2013 / Perkinsiosis is a disease caused by protozoa of the genus Perkinsus and causes massive mortality in several species of commercial bivalve mollusks, mainly in Europe and United States. Thus, the present study aimed to verify the occurrence of Perkinsus in the cockle Anomalocardia brasiliana (Veneridae) from a natural population and evaluate the impact of an experimental challenge with Perkinsus beihaiensis in this host. Specimens of A. brasiliana were collected in the Timonha River estuary (West coast of Ceará) in March 2012 (n= 150) and submitted to the diagnosis of Perkinsus spp. by tissues incubation of gills and rectum in Ray’s Fluid Thioglicollate Medium (RFTM). The confirmation of the genus Perkinsus was done by PCR analyzes (ITS) and subsequent sequencing. The RFTM showed the presence of hypnospores of Perkinsus infecting the tissues of the animals, with a prevalence of 14.7% (22/150) and intensity of infection ranging from very mild (n= 18) to mild (n= 4). Analyzes of PCR and sequencing confirmed that this species is Perkinsus beiahiensis. So this is the first record of this species in A. brasiliana. In order to assess the impact of an experimental challenge with P. beiahiensis in cockles from the Jaguaribe River estuary (east coast of Ceará), animals (n= 6) were distributed in 12 tanks (6 controls and 6 treatments). A cell suspension of hypnospores of P. beihaiensis was prepared from tissues of Crassostrea rhizophorae naturally infected. The tissues were incubated in RFTM to obtain a suspension of hypnospores. The animals of the treatment group were challenged by injection of 100μl of cell suspension of the parasite (125 cells) into the paleal cavity and the control animals received 100μl of sterile filtered seawater (AMFE). The challenge lasted 30 days and samples of cockles were collected in the 15th (n= 25) and 30th (n= 41) day after injection for pathological analyzes (RFTM, histology and PCR). The mortality of the animals was recorded daily. Mortalities occurred only during the first 15 days of the experiment (n = 6, of the treatment group), but it was not detected Perkinsus sp. in these animals. From the animals collected in the 15th day, 8 of 17 (control group, 47%) and 2 of 14 (treatment group, 14.3%) had hypnospores of Perkinsus sp. (RFTM) with intensities of infection ranging from very mild to mild, greater in the treatment group than in the control group. From the animals collected in the 30th day, 4 of 19 (control group, 21%) and 4 of 22 (treatment group, 18.2%) were diagnosed as infected with Perkinsus sp., with intensities of infection ranging from very mild to mild, higher in the treatment group than in the control group. The histopathological analyzes confirmed the presence of cells of Perkinsus sp. infecting the organs of the cockles in the two groups, but the treatment group was the only one with cells being phagocytosed The proliferating cells of Perkinsus sp. occurred in both groups. PCR analyzes confirmed the presence of Perkinsus sp. in 4 of 6 animals analyzed (66.7%). This work revealed that the cockle A. brasiliana already is a natural host of Perkinsus beihaiensis, and a challenge with cells isolated from P. beihaiensis causes induction to infection, but the host recovers itself quickly and efficiently activating defense mechanisms. / A perkinsiose é causada por protozoários do gênero Perkinsus e causa mortalidades massivas em diversos moluscos bivalves comerciais, principalmente na Europa e nos Estados Unidos. O presente trabalho teve como primeiro objetivo verificar a ocorrência de Perkinsus em Anomalocardia brasiliana (Veneridae) de uma população natural do Rio Timonha, litral oeste do Ceará. Os espécimes (n=150) foram coletados em março de 2012 e submetidos ao diagnóstico de Perkinsus spp. por incubação de tecidos das brânquias e do reto em meio líquido de tioglicolato de Ray (RFTM). A confirmação do gênero foi feita por análises de PCR (ITS) e posterior sequenciamento. A RFTM mostrou a presença de hipnósporos de Perkinsus infectando os tecidos de A. brasiliana, com uma prevalência de 14,7% e com intensidades de infecção variando de Muito Leve (n = 18) a Leve (n = 4). As análises da PCR e do sequenciamento confirmaram tratar-se de Perkinsus beiahiensis. Este é o primeiro registro desta espécie em A. brasiliana. O segundo objetivo do estudo foi avaliar o impacto de um desafio experimental com P. beiahiensis neste hospedeiro. Para tal, foram coletados 72 exemplares no Estuário do Rio Jaguaribe (litoral leste do Ceará), que foram distribuídos em 12 tanques (6 controles e 6 tratamentos). Uma suspensão celular de hipnóporos de P. beihaiensis foi preparada a partir de tecidos de ostras Crassostrea rhizophorae naturalmente infectadas, a partir de incubação em RFTM. Os animais do grupo tratamento foram desafiados por injeção na cavidade palial de 100 μl da suspensão celular do parasita (125 células) e os animais controle receberam 100 μl de água do mar filtrada estéril (AMFE). O desafio durou 30 dias e amostras de búzios foram coletadas no 15º (n = 25) e 30º (n = 41) dias após injeção, para análises patológicas (RFTM, histologia e PCR). Mortalidades ocorreram somente em 16,7% dos animais do tratamento, mas não foi detectado Perkinsus sp. nestes animais. Dos animais coletados para RFTM no 15º dia, 47% do controle e 14,3% do tratamento apresentaram hipnósporos de Perkinsus sp., com intensidades de infecção variando de muito leve a leve. Dos animais coletados no 30° dia, 21% do controle e 18,2% do tratamento estavam infectados por Perkinsus sp., com intensidades de infecção variando de muito leve a leve. As análises histopatológicas confirmaram a presença de Perkinsus sp. infectando os órgãos de A. brasiliana nos dois grupos, no entanto somente o grupo tratamento apresentou células sendo fagocitados, ao passo que células em proliferação de Perkinsus sp. ocorreram nos dois grupos. As análises de PCR confirmaram a presença de Perkinsus sp. em 66,7% dos animais analisados (n = 6). Este estudo é o primeiro registro de P. beiahiensis em A. brasiliana. A etapa experimental evidenciou que este já é um hospedeiro natural deste patógeno e que um desafio com celulas isoladas de P. beihaiensis induz a infecção, no entanto o hospedeiro se recupera de forma rápida e eficiente mediante a ativação de mecanismos de defesa.

Made available in DSpace on 2016-08-15T20:31:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 HiagosFFL_DISSERT.pdf: 794630 bytes, checksum: b9112529e3742dd0a6d9fbab5a1a63fa (MD5) Previous issue date: 2016-02-23 / In animal production, where food represents about 70% of the cost of production, the supply of calcium to participate in large numbers in feed formulations, become the use of mineral origin organic important to maximize animal performance and minimize costs. Taking up the importance of integrity and eggshell strength in the conservation of its nutritional and microbiological property that mean the product quality and food safety, these features become essential for the approval of the egg by the consumer market. The objective was to evaluate different sources of calcium in diets on growth performance and eggs quality of laying hens light. The cages are equipped with linear feeder in galvanized sheet and drinker type nipple. The birds were housed in shed screen, in masonry, with clay tile roof equipped with 120 metal cages (0,20m x 0,40m x 0,40m) galvanized wire provided sideboard eggs arranged in four rows with corridor central. We used 120 birds of Bankiva line in the initial laying phase, starting the experiment when animals were in egg production and body weight even, the experimental period was 22-34 weeks old and the birds distributed in a completely randomized design with four treatments. Each treatment had 10 repetitions with 3 birds each unit experimental and consisted of four experimental diets with different sources of calcium: limestone, búzio shell flour (Anomalocardia brasiliana), oyster shell flour (Crassostrea brasiliana) and egg shell flour. Were evaluated: egg production rate, feed intake, feed conversion, absolute and relative weight of yolk, albumen and shell, height and width of the egg, specific gravity, yolk color, eggshell thickness, Haugh unit, albumen and yolk index. Had no significant effect (P> 0.05) between the treatments, for performance variables, egg production rate had a significant effect (P <0.05), its worst result egg shell flour. The egg shell flour was the only treatment showed significantly (P <0.05) for the weight, height and width of the egg, specific gravity, height and width albumen yolk, yolk absolute weight, albumen and shell, relative weight of the albumen and shell thickness, with worse results compared to the other treatments. Therefore, limestone, búzio shell flour and oyster shell flour, can be used as a source of calcium for laying rations / Na produção animal, onde a alimentação representa cerca de 70% do custo de produção, o suprimento de cálcio por participar em grande quantidade nas formulações de rações, torna a utilização de minerais de origem orgânica importante para se maximizar o desempenho animal e minimizar os custos. Levando-se a importância da integridade e resistência da casca do ovo na conservação de sua propriedade nutricional e microbiológica que significam a qualidade do produto e segurança alimentar, estas características tornam-se essenciais para a aprovação do ovo por parte do mercado consumidor. Diante disso, objetivou-se avaliar diferentes fontes de cálcio em rações, no desempenho produtivo e qualidade de ovos de poedeiras de linhagem leves. As aves foram alojadas em galpão telado, em alvenaria, com cobertura de telha de barro equipado com 120 gaiolas metálicas (0,20m x 0,40m x 0,40m) de arame galvanizado providas de aparador de ovos, dispostas em quatro fileiras com corredor central. As gaiolas são equipadas com comedouro linear em chapa galvanizada e bebedouro do tipo nipple. Foram utilizadas 120 aves da linhagem Bankiva em fase inicial de postura, iniciando o experimento quando os animais estavam com produção de ovos e peso corporal uniforme, o período experimental compreendeu de 22 a 34 semanas de idade sendo as aves distribuídas em delineamento inteiramente ao acaso com quatro tratamentos. Cada tratamento composto por 10 repetições com 3 aves por unidade experimental e sendo constituídos por quatro rações experimentais, com diferentes fontes de cálcio: calcário calcítico, farinha de concha búzio (Anomalocardia brasiliana), farinha de concha de ostra (Crassostrea brasiliana) e farinha de casca de ovo. Foram avaliados: taxa de postura, consumo de ração, conversão alimentar, peso absoluto e relativo de gema, albúmen e casca, peso, altura e largura do ovo, gravidade específica, espessura de casca, unidade Haugh, índice de albúmen e de gema. Não foram significativas (P>0,05) entre os tratamentos estudados, as variáveis de desempenho, exceto taxa de postura, a qual obteve efeito significativo (P<0,05), tendo resultado inferior para o tratamento com a farinha de casca de ovo. A farinha de casca de ovo foi o único tratamento que apresentou efeito significativo (P<0,05), para as variáveis de peso, altura e largura do ovo, gravidade específica, altura da gema e largura do albúmen, peso absoluto de gema, albúmen e casca, peso relativo do albúmen e espessura de casca, apresentando resultados inferiores em comparação aos demais tratamentos. Portanto, o calcário calcítico, farinha de concha de búzio e farinha de concha de ostra, por apresentarem uma maior granulometria demonstrou melhores resultados, podendo ser utilizadas como fonte de cálcio em rações de poedeiras de linhagem leves