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Estudo da interação biosortiva entre o corante reativo procion blue MXG e as linhagens CCB 004, CCB 010 e CCB 650 de Pleurotus ostreatus paramorfogênico /Rodrigues, Tatiana Alves. January 2003 (has links)
Orientador: Carlos Renato Corso / Banca: Adriana de Mello Gugliotta / Banca: Sandra Mara Martins Franchetti / A presente pesquisa enfoca a utilização de formas paramorfogênicas de diferentes linhagens de Pleurotus ostreatus para remover o corante reativo Procion Blue MXG de soluções aquosas. O fungo induzido fisicamente em sua forma paramorfogênica (pellets) foi usado no estudo da biosorção do corante em diferentes valores de pH e em comparação entre as hifas autoclavadas e não autoclavadas, visando a remoção do mesmo em solução aquosa. O corante reativo Procion Blue MXG foi analisado em sua estabilidade espectral em diferentes valores de pH. Este corante se mostrou instável em termos de estabilidade espectral. O pH que melhor se enquadrou quanto à capacidade de remoção das biomassas pelletizadas foi o 2,50, tanto para amostras autoclavadas como não autoclavadas Em praticamente todos os experimentos de interação entre a biomassa e o corante, as autoclavadas apresentaram maior capacidade biosortiva do que as não autoclavadas. Foram também efetuados estudos comparativos a respeito das equações Isotermas de adsorção de Freundlich e Langmuir. A comparação entre os coeficientes de correlação de ambas, nas condições de 30º C e pH 2,50 indicam que a equação de Langmuir explica melhor a interação entre aa biomassa fúngica e o corante estudado em todas as linhagens, quando não autoclavadas, admitindo-se tratar de um processo biosortivo em monocamada. Para as amostras autoclavadas, a equação de Langmuir também é válida para a linhagem CCB 010, sendo que para as linhagens CCB 004 e CCB 650, a equação de Freundlich prevaleceu. Os testes de biosortividade em termos de varredura espectral indicam que as linhagens CCB 010 e CCB 650 apresentam tendência de ter potencial enzimático para degradar o corante, principalmente em pH 2,50. Pelos dados apresentados, podemos afirmar que, do ponto de vista de biosorção, o Pleurotus ostreatus e... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / The present research focuses the use of paramorphic forms of different strains of Pleurotus ostreatus, to remove the reactive dye Procion Blue MXG from aqueous solutions. This fungi induced phisically in its paramorphic form (pellets), was used in the dye's biosorption study, in different values of pH and in comparasion between alive and dead fungi micelia, aiming at its removal in watery solution. The reactive dye Procion Blue MXG was analyzed in its spectral stability in different values of pH. This dye was showed as unstable in terms of spectral stability. The pH that has better fits in the capacity of removal of biomass was the 2,50, as much for dead samples as for alive samples. In practically all the experiments of interaction between the biomass and the dye, the deceased samples had presented greater biosorptive capacity than the alive ones. Also comparative studies regarding the isothermal equations of adsoption of Freundlich and Langmuir had been effected. The comparison between the coefficients of correlation of both, in the conditions of 30ºC and pH 2,50 indicates that the equation of Langmuir explains better the interaction between the fungic biomass and the dye in all the strains, when deceased, admitting itself to deal with a biosorptive process in monolayer. For the dead samples, the equation of Langmuir also is valid for strain CCB 010, being that for strains CCB 004 and CCB 650, the equation of Freundlich has prevailed. The tests of biosorptivity in terms of spectral sweepings indicate mainly that strains CCB 004, CCB 010 and CCB 650 present trend to have enzymatic potential to degrade the dye, in pH 2,50. For the presented data, we can affirm that, of the point of view of the biosorption., paramorphic Pleurotus ostreatus and its strains offers conditions to come to be used as biosorbent substratum in the treatment of industrial effluent who contains these azo compounds. / Mestre
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Estudo da interação biosortiva entre o corante reativo procion blue MXG e as linhagens CCB 004, CCB 010 e CCB 650 de Pleurotus ostreatus paramorfogênicoRodrigues, Tatiana Alves [UNESP] 31 March 2003 (has links) (PDF)
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Previous issue date: 2003-03-31Bitstream added on 2014-06-13T19:35:30Z : No. of bitstreams: 1
rodrigues_ta_me_rcla.pdf: 1337259 bytes, checksum: 4cefa1a7ab0cc7cf4520e68caebc9830 (MD5) / A presente pesquisa enfoca a utilização de formas paramorfogênicas de diferentes linhagens de Pleurotus ostreatus para remover o corante reativo Procion Blue MXG de soluções aquosas. O fungo induzido fisicamente em sua forma paramorfogênica (pellets) foi usado no estudo da biosorção do corante em diferentes valores de pH e em comparação entre as hifas autoclavadas e não autoclavadas, visando a remoção do mesmo em solução aquosa. O corante reativo Procion Blue MXG foi analisado em sua estabilidade espectral em diferentes valores de pH. Este corante se mostrou instável em termos de estabilidade espectral. O pH que melhor se enquadrou quanto à capacidade de remoção das biomassas pelletizadas foi o 2,50, tanto para amostras autoclavadas como não autoclavadas Em praticamente todos os experimentos de interação entre a biomassa e o corante, as autoclavadas apresentaram maior capacidade biosortiva do que as não autoclavadas. Foram também efetuados estudos comparativos a respeito das equações Isotermas de adsorção de Freundlich e Langmuir. A comparação entre os coeficientes de correlação de ambas, nas condições de 30º C e pH 2,50 indicam que a equação de Langmuir explica melhor a interação entre aa biomassa fúngica e o corante estudado em todas as linhagens, quando não autoclavadas, admitindo-se tratar de um processo biosortivo em monocamada. Para as amostras autoclavadas, a equação de Langmuir também é válida para a linhagem CCB 010, sendo que para as linhagens CCB 004 e CCB 650, a equação de Freundlich prevaleceu. Os testes de biosortividade em termos de varredura espectral indicam que as linhagens CCB 010 e CCB 650 apresentam tendência de ter potencial enzimático para degradar o corante, principalmente em pH 2,50. Pelos dados apresentados, podemos afirmar que, do ponto de vista de biosorção, o Pleurotus ostreatus e... , was used in the dye's biosorption study, in different values of pH and in comparasion between alive and dead fungi micelia, aiming at its removal in watery solution. The reactive dye Procion Blue MXG was analyzed in its spectral stability in different values of pH. This dye was showed as unstable in terms of spectral stability. The pH that has better fits in the capacity of removal of biomass was the 2,50, as much for dead samples as for alive samples. In practically all the experiments of interaction between the biomass and the dye, the deceased samples had presented greater biosorptive capacity than the alive ones. Also comparative studies regarding the isothermal equations of adsoption of Freundlich and Langmuir had been effected. The comparison between the coefficients of correlation of both, in the conditions of 30ºC and pH 2,50 indicates that the equation of Langmuir explains better the interaction between the fungic biomass and the dye in all the strains, when deceased, admitting itself to deal with a biosorptive process in monolayer. For the dead samples, the equation of Langmuir also is valid for strain CCB 010, being that for strains CCB 004 and CCB 650, the equation of Freundlich has prevailed. The tests of biosorptivity in terms of spectral sweepings indicate mainly that strains CCB 004, CCB 010 and CCB 650 present trend to have enzymatic potential to degrade the dye, in pH 2,50. For the presented data, we can affirm that, of the point of view of the biosorption., paramorphic Pleurotus ostreatus and its strains offers conditions to come to be used as biosorbent substratum in the treatment of industrial effluent who contains these azo compounds.
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Embriogênese e Diferenciação Celular / Embryogenesis Cell DifferentiationChaves Junior, Joao da Costa 06 October 1995 (has links)
Construímos um modelo de caráter probabilístico para a embriogênese e a diferenciação celular, baseado nas redes genéticas, aleatoriamente conectadas, e no processo de criticalidade auto-organizada. Estudamos redes com 3, 4, 5, 10, 20, 30, 64 e 128 genes para as quais fizemos um levantamento do perfil da distribuição populacional da diversidade de atratores, e avaliamos a frequência com que foram gerados. Obtivemos resultados exatos para redes com 3 e 4 genes. Para redes maiores, foram obtidos resultados quantitativos através de varreduras aleatórias. Construímos autômatos de pilha de areia não direcionais, numa rede quadrada (L POT.2), e determinamos os máximos populacionais a eles associados para L=3, 4, 5, 6, 7, 8 e 9. Mostramos que os parâmetros do Caenorhabidits elegans, cuja historia desenvolvimental e bem conhecida, são compatíveis com o modelo proposto. / A probalistic model for Embriogenesis and Cellular Diferentiation, has been constructed, based on the random genetic networks and the self organized criticality process. Networks with 3, 4, 5, 10, 20, 30, 64, 128 genes were studied. A survey of the population distribution profile was made and their frequency of generation were evaluated. We obtained exact results for nets with 3 and 4 genes. Quantitative results were obtained for the larger ones by means of random scanning. We constructed a undirected sand pile model in a square net (L POT.2) and determined the population maxima for L = 3, 4, 5, 6, 7, 8 and 9. We showed that parameters for Caenorhabidits elegans, that has a well known developmental story, are in agreement with the proposed model.
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Embriogênese e Diferenciação Celular / Embryogenesis Cell DifferentiationJoao da Costa Chaves Junior 06 October 1995 (has links)
Construímos um modelo de caráter probabilístico para a embriogênese e a diferenciação celular, baseado nas redes genéticas, aleatoriamente conectadas, e no processo de criticalidade auto-organizada. Estudamos redes com 3, 4, 5, 10, 20, 30, 64 e 128 genes para as quais fizemos um levantamento do perfil da distribuição populacional da diversidade de atratores, e avaliamos a frequência com que foram gerados. Obtivemos resultados exatos para redes com 3 e 4 genes. Para redes maiores, foram obtidos resultados quantitativos através de varreduras aleatórias. Construímos autômatos de pilha de areia não direcionais, numa rede quadrada (L POT.2), e determinamos os máximos populacionais a eles associados para L=3, 4, 5, 6, 7, 8 e 9. Mostramos que os parâmetros do Caenorhabidits elegans, cuja historia desenvolvimental e bem conhecida, são compatíveis com o modelo proposto. / A probalistic model for Embriogenesis and Cellular Diferentiation, has been constructed, based on the random genetic networks and the self organized criticality process. Networks with 3, 4, 5, 10, 20, 30, 64, 128 genes were studied. A survey of the population distribution profile was made and their frequency of generation were evaluated. We obtained exact results for nets with 3 and 4 genes. Quantitative results were obtained for the larger ones by means of random scanning. We constructed a undirected sand pile model in a square net (L POT.2) and determined the population maxima for L = 3, 4, 5, 6, 7, 8 and 9. We showed that parameters for Caenorhabidits elegans, that has a well known developmental story, are in agreement with the proposed model.
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A reação bimolecular de troca H + Li2 : propriedade dinâmicas e cinéticas para J=0Vila, Henrique Vieira Rivera 26 January 2012 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Física, 2012. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2012-11-07T14:42:26Z
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2012_HenriqueVieiraRiveraVila.pdf: 6824386 bytes, checksum: 8cb7a7add6501697b56a9ebfc2d4e796 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2012-11-08T11:35:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1
2012_HenriqueVieiraRiveraVila.pdf: 6824386 bytes, checksum: 8cb7a7add6501697b56a9ebfc2d4e796 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-11-08T11:35:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1
2012_HenriqueVieiraRiveraVila.pdf: 6824386 bytes, checksum: 8cb7a7add6501697b56a9ebfc2d4e796 (MD5) / Pela primeira vez na literatura, o rigoroso formalismo do espalhamento quântico independente do tempo foi aplicado, por meio do programa ABC, à reação
H + Li2 → LiH + Li. As probabilidades estado-a-estado em função da energia total
foram computadas para o caso J = 0, permitindo-nos avaliar os efeitos da excitação vibracional/rotacional na promoção/inibição da reação, a distribuição energética dos produtos e a dependência com a temperatura dos coeficientes térmicos J-shifting de taxa de reação. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / For the first time in the literature, rigorous time-independent quantum scattering
formalism was applied, by means of the ABC program, to the H + Li2 → LiH + Li reaction. The state-to-state probabilities as a function of the total energy have been computed at zero total angular momentum (J = 0) allowing us to evaluate the effect of vibrational/rotational excitation on the reaction promotion/inhibition, the energetic distribution of products and the temperature dependence of the J-shifting thermal rate coefficients.
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Avaliar a influência de fármacos antiflamatórios hormonais e não hormonais sobre a fragilidade osmótica e marcação de hemácias com 99mTc em ratosHenrique Goersch Bastos, Fernando January 2003 (has links)
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Previous issue date: 2003 / A dexametasona (Dex), o complexo B (Com B) e o piroxican (P) são fármacos
antiinflamatórios freqüentemente utilizados no tratamento da inflamação de origem
neurogênica ou de natureza músculo-esquelética. Este trabalho visa avaliar a
influência de fármacos antiinflamatórios sobre a fragilidade osmótica e marcação de
hemácias e proteínas plasmáticas com 99mTc in vitro. Amostras de células
sangüíneas de ratos Wistar foram tratadas com diferentes concentrações de Dex e
Com B por um período de 1 hora e em seguida foram submetidas à centrifugação
1000g/15 min e lavadas por 2 vezes. As hemácias foram submetidas à solução
salina de 0,1- 0,9%. Os resultados mostram que o tratamento com Dex e Complexo
B provoca uma hemólise de 100% nas concentrações de solução salina de 0,1
0,4%, não sendo observado hemólise nas concentrações de 0,7 0,9%. Numa
segunda etapa, amostras de sangue, com anticoagulante, de ratos Wistar foram
incubadas com diferentes concentrações de fármacos antiinflamatórias durante uma
hora na presença de cloreto estanoso. Após a incubação o 99mTc foi adicionado em
todas os tubos e incubado por 10 min. As amostras foram centrifugadas e o plasma
e as células sangüíneas foram separadas. Alíquotas destas foram precipitadas com
ácido tricloroacético (TCA) a 5% e as frações solúveis e insolúveis separadas. As
percentagens de radioatividade (%ATI) das amostras foram calculadas e os
resultados indicam que a Dex, o Com B e o P reduzem a eficiência de captação do
99mTc. Estes experimentos indicam que os fármacos antiinflamatórios apresentam
possível efeito oxidativo, como também competem com o sítio de ligação do íon
estanho ou 99mTc
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Edema pulmonar de ratos vagotomizados : provavel envolvimento da histaminaAbra Blanco, Eleonora Elisia 17 December 1985 (has links)
Orientador : Rui Errerias Maciel / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T00:58:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1985 / Resumo: A vagotomia cervical bilateral seguida de exercício físico promove edema pulmonar agudo no rato dentro de minutos. A porcentagem de tecido seco pulmonar nos animais vagotomizados é menor que nos animais controles (CV) e nos vago-adrenalectomizados e seus controles (CVA). ¿Adrenalectomia bilateral imediatamente após a vagotomia previne este tipo de edema. ¿Nos pulmões dos ratos vagotomizados, o nível histamínico sofreu uma significante queda em relação ao seu controle (CV), enquanto que não se constatou o mesmo nos vago-adrenalectomizados em relação ao seu controle (CVA). ¿A concentração de histamina nos fígados dos vagotomizados e vago-adrenalectomizados não sofreu alteração significante em relação aos seus grupos controles, indicando que a alteração histamínica ocorreu a nível pulmonar, somente. ¿ Adepleção histamínica pulmonar nos ratos vagotomizados não se deveu à adrenalina liberada durante o exercício físico e ¿stress¿, uma vez que todos os animais dos outros grupos que também foram submetidos ao exercício, tiveram nível histamínico maior. ¿O exame histológico demonstrou nos pulmões dos ratos vagotomizados um desarranjo na configuração alveolar, e que os mastócitos se tornaram menos freqüentes nestes órgãos.-Concluímos, finalmente, que a lateração histamínica observada é um fator indicativo da sua participação no processo edematogênico pulmonar, conseqüente à vagotomia. ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Not informed. / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Ciências Biológicas
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Um estudo quantitativo da fase pre-convulsiva da crise audiogenica no rato albinoZepka, Roberto Fonseca 26 February 1992 (has links)
Orientador : Marcos Endrizzi Sabbatini / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T02:27:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1992 / Resumo: O presente trabalho investigou quantitativamente diversos parâmetros associados com a fase pré-convulsiva do ataque audiogênico no rato albino (variedade Wistar) utilizando um aparato semi-automático desenvolvido para o registro e análise dos episódios de corrida da fase procursiva. Foram estudados o efeito da intensidade de estimulação sonora sobre o ataque, assim como a ação de interrupções do estimulo sonoro em diferentes períodos da fase pré-convulsiva. Os resultados obtidos indicaram que a intensificação do estimulo sonoro esta relacionada com o aumento da severidade dos ataques, bem como com a redução nas latências para o aparecimento dos episódios de corrida da fase procursiva. Interrupções do estimulo sonoro (principalmente de interrupções de 25 segundos) durante a manifestação da fase procursiva determinaram a supressão ou o retardo significativo para o aparecimento dos elementos do ataque subseqüentes a suspensão do estimulo. Um modelo teórico dos mecanismos neurais do ataque audiogênico é proposto baseado nos dados experimentais obtidos / Abstract: The present work investigated quantitatively several parameters associated with the pre-convulsive phase of audiogenic seizures in the albino rat (Wistar variety) ,using a microcomputer-based apparatus developed to record and analyse the running motor phase episodes. We studied the effect of the acoustic stimuli intensity in seizures and the action of the acoustic stimuli interruption in different periods of the. pre-convulsive phase. The results obtained indicated that the acoustic stimulus intensification is related with the increase of the seizure severity and with decrease of running bout onset latency. Acoustic stimuli interruption (mainly 25 seconds interruptions) during an audiogenic seizure manifestation determine the suppression or significant onset delay of the seizure elements subsequent to the stimulus suspension. A theoretical model of the neural mechanisms of audiogenic seizures was proposed based in experimental data / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Ciências Biológicas
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Estudo do efeito das soluções conservadoras de Collins, Euro-Collins e Universidade de Wisconsin sobre a perabilidade a agua de tubulos coletores corticais de coelha "In vitro"Ribeiro, Carla Andrea de Lima 21 August 1992 (has links)
Orientador: Doris Falkenstein / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-15T23:39:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1992 / Resumo: Neste trabalho foi testado o efeito da conservação de fragmentos renais nas soluções de Collins, Euro-Collins e Universidade de Wisconsin, a 4°C, durante uma e 24 horas e o efeito da conservação tubular direta nas soluções de Euro-Collins e Universidade de Wisconsin, a 4°C, sobre a função de túbulos coletores corticais (TCCs) de coelho. A função tubular foi medida através da condutividade hidráulica (Lp) de TCCs .perfundidos com a técnica da microperfusão de túbulo isolado ln vltro. Também foi avaliada a permeabilidade difusional à (Pdv) de TCCs conservados diretamente na solução de Euro-Collins, a 4°C, durante 3 horas. Diante dos resultados obtidos, concluiu-se que: - há uma heterogeneidade na conservação da -população de néfrons do rim, sendo que os túbulos reagem de maneiras diferentes à conservação do fragmento renal; - essa heterogeneidade pode ser devido à própria diferença entre a população de néfrons ou pode ocorrer por causa do maior ou menor contato com a solução conservadora; - a conservação dos fragmentos nas soluções de Collins, Euro-Collins e de Wisconsin, a 4°C, . Durante uma hora leva a um aumento na permeabilidade osmótica à água, na ausência de vasopressina exegena. Apesar disso, quando há o estimulo com vasopressina, os túbulos respondem efetivamente; após 24 horas, somente mantém resposta efetiva à vasopressina os túbulos provenientes de fragmentos conservados na solução de Wisconsin. Os túbulos provenientes de fragmentos conservados nas soluções de Collins e Euro-Collins perdem as caracteristicas de permeabilidade à água. ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: This work was designed to study the effect of several cold preservation solutions on the hydraulic conductivity (Lp) of cortical collect1ng tubules (CCTs), using the microperfusion technique of isolated tubules ln vltro. 1n the first protocol, rabbit renal slices were preserved in Collins, Euro-Collins and University of Wisconsin (UM) solutions at 4°C, during 1 or 24 hours. The results showed that after 1 hour of cold preservation with this solutions there was no statistical difference in CCTs function compared with the control group. After 24 hours, CCTs obtained from slices preserved in UM solution showed the best function when compared with Collins and Euro-Collins solutions. In the other protocol, it was possible to verify the direct effect of these solutions upon the Lp of the CCT tubular epithelial layer. ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Ciências Biológicas
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O papel das argininas α-92 e α-141 na regulação da função de hemoglobinas por íons cloretoTosqui, Priscilla [UNESP] 14 May 2010 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0
Previous issue date: 2010-05-14Bitstream added on 2014-06-13T19:19:37Z : No. of bitstreams: 1
tosqui_p_dr_sjrp.pdf: 1146910 bytes, checksum: 6aba6f1c199f0bebfaeca2737005759b (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / A influência de ânions sobre as características estruturais e funcionais de hemoglobinas (Hb) vem sendo alvo de pesquisas de nosso laboratório nos últimos anos. Estudos anteriores mostraram que a ligação preferencial de ânions como o Cl- e fosfatos orgânicos (2,3-DPG, IHP) entre outros à desoxi-Hb humana (HbA), modula o equilíbrio entre dois estados alostéricos desoxigenados possíveis, estados To e Tx, livre e complexado com ânions, respectivamente. Medidas funcionais utilizando o método de estresse osmótico, que determina o número de moléculas de água que se liga a superfície da Hb, acompanhando a oxigenação, mostraram que o estado To é um estado com hidratação e afinidade ao oxigênio intermediárias ao Tx e ao oxi-R. Assim, a oxigenação da Hb demanda um modelo considerando estes três estados, To, Tx e R, modulados pela presença de ânions em solução. O íon cloreto é um dos ânions de maior importância fisiológica. A presença de sítios específicos para sua ligação, bem como seu sistema de ligação para a Hb, contudo, são controversos. Evidências estruturais e funcionais apontaram os resíduos arginina 141 e 92 da cadeia alfa como possíveis sítios de ligação de cloreto à Hb. Para investigar essa hipótese, realizamos estudos funcionais variando atividade de água e pH (efeito Bohr), em função da presença de cloreto com hemoglobinas mutantes para essas posições. As hemoglobinas selecionadas foram Chesapeake (R92L), J-Cape Town (R92Q), desArg (141Δ) e Chesapeake desArg (R92L,141Δ). Aspectos estruturais dessas Hbs foram obtidos através de espectroscopia 1H RMN. Todas as Hbs estudadas apresentaram afinidade maior ao oxigênio quando comparadas à HbA, para todas as condições experimentais. Estudos de variação da atividade de água em função da concentração de cloreto mostraram que a única... / The influence of anions on structural and functional properties of hemoglobins (Hb) has been studied by our research group for the last few years. Former studies have shown that the preferential binding of anions, such as Cl and organic phosphates (2,3-DPG, IHP) among others to human deoxy-Hb (HbA), modulates the equilibrium between two possible deoxy states: To and Tx, free and complexed with anions respectively. Functional measurements using the osmotic stress method, which allows the determination of the number of water molecules that binds to the protein surface upon the change in protein conformation induced by oxygenation, showed that To state has intrinsic affinity and hydration intermediate of those of Tx and oxy-R . Hence, Hb oxygenation requires a three state model, considering To, Tx and R, modulated by the presence of anions in solution. Chloride is one of the most important physiological ions and the presence of specific binding sites of this anions is controversial. Structural and functional evidence have pointed to Arginines 141 and 92 as possible binding sites for chloride to Hb. To investigate this hypothesis, we have performed functional studies, changing the water activity and pH (Bohr effect), in function of chloride concentration with recombinants Hbs for these positions. The selected hemoglobins are Chesapeake (R92L), J-Cape Town (R92Q), desArg (141Δ) eandChesapeake desArg (R92L,141Δ). Structural features were obtained through 1H NMR spectroscopy. All Hbs studied have higher affinity than HbA for all experimental conditions. Water activity studies in function of chloride concentration showed that the only Hb that can be adjusted with the three state model is Hb desArg, whereas the other Hbs don’t present the Tx state, fact confirmed by the number of water molecules bound to each... (Complete abstract click electronic access below)
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