Made available in DSpace on 2017-07-24T19:38:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vanessa Cristina Godoy Jasinski.pdf: 3849900 bytes, checksum: f8ecb7e08b0fac6fae8e4aec5fe4c1e3 (MD5) Previous issue date: 2010-03-12 / This study aimed to: develop methodological sequences for the collection and analysis of essential oils and phenolic compounds of B. uncinella, applicable to the study of other species of the genus Baccharis; determined by techniques of gas chromatography-mass spectrometry, the chemical composition of essential oils from the leaves of male and female specimens of B. uncinella from different populations of the plant growing in nature; isolate and determine the chemical structure of phenolic compounds present in leaves using mainly chromatographic and spectroscopic methods. In the Campos Gerais of Paraná, it was observed the occurrence of two supposed varieties of B. uncinella, Bu1 and Bu2, with markedly different sizes and quite different flowering times. For the first time the leaves were collected from male and female specimens of two populations of B. uncinella, proceed to the extraction and analysis of essential oils by GC-MS techniques. The essential oils of four samples had very similar compositions, as opposed to frequently published data indicating no difference between the compositions of oils of male and female specimens of the same species of Baccharis. The results obtained in this study are due to the care in collections of male and female specimens (in the same place and time), in the preparation of material (careful separation of the leaves), using the same conditions in the hydrodestillation and analysis by CG-EM . All four samples had low levels of monoterpenes and the following sesquiterpenes as the main components: caryophyllene (Bu1 10.03% and Bu1 7.64%; Bu2 6.06% and Bu2 7.96%); spathulenol (Bu1 28.99% and Bu1 29.68%; Bu2 24.30% and Bu2 16.94%), caryophyllene oxide (Bu1 12.98% and Bu2 14.24%; Bu2 9.75% and Bu2 23.52%). These results also confirmed the botanical identifications that were made based on the morphology of flowers, indicating the inexistence of the supposed sub-species. The water remaining after the hydrodestillation was extracted with CHCl3 and then with AcOEt, yielding four extracts containing mainly 3.5-dicaffeoylquinic and 3.4-dicaffeoylquinic acids, as demonstrated by analysis of their 1H and 13C NMR spectra. The leaves were also extracted in Sohxlet using three solvents in sequence: CHCl3, AcOEt and MeOH. Part of the methanol extract was purified by dissolving it in water, removing the precipitates formed by a cold rest and extracting it with AcOEt. The extract thus obtained with ethyl acetate was subjected to several vacuum chromatography steps leading to the isolation and identification of 3,5- dicaffeoylquinic acid by the analysis of its 1H and 13C NMR spectra. This route to the phenolic compounds was improved by obtaining extracts with ethyl acetate from aqueous solution at pH 8 and pH 3. The extract made in slightly alkaline conditions contained mainly flavonoids, while the one obtained at pH 3 contained derivatives of quinic acid. The AcOEt extract at pH 8 was fractionated on silica gel column under pressure leading to the isolation of three flavonoids identified by their UV, 1H and 13C NMR spectra (quercetin, luteolin and apigenin). The AcOEt extract at pH 4 was fractionated on a silica gel column leading to the isolation and identification of 3,4-dicaffeoylquinic acid by the 1H and 13C NMR spectra. / Este estudo teve como objetivos: desenvolver seqüências metodológicas para a obtenção e análise de óleos essenciais e compostos fenólicos de B. uncinella, aplicáveis ao estudo de outras espécies do gênero Baccharis; determinar por técnicas de cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas, a composição química dos óleos essenciais das folhas de espécimes masculinos e femininos de B. uncinella procedentes de diferentes populações da planta crescendo in natura; isolar e determinar a estrutura química de compostos fenólicos presentes nas folhas utilizando, principalmente, métodos cromatográficos e espectrométricos. Nos Campos Gerais do Paraná, foi observada a ocorrência de duas supostas variedades de B. uncinella, Bu1 e Bu2, com portes acentuadamente diferentes e épocas de floração bem distintas. Pela primeira vez foram coletadas as folhas de espécimes masculinos e femininos de duas populações de B. uncinella, procedendo-se à extração e análise de seus óleos essenciais por técnicas de CG-EM. Os óleos essenciais das quatro amostras apresentaram composições muito semelhantes, em contraposição a dados frequentemente publicados, que indicam haver diferenças entre as composições de óleos de espécimes masculinos e femininos da mesma espécie de Baccharis. O resultado obtido na presente pesquisa se deve aos cuidados tomados nas coletas dos espécimes masculinos e femininos (mesmo local e horário), na preparação do material (separação minuciosa das folhas), no uso das mesmas condições nas hidrodestilações e nas análises por CG-EM. Todas as quatro amostras apresentaram baixos teores de monoterpenos e os seguintes sesquiterpenos como principais componentes: cariofileno (Bu1 10,03% e Bu1 7,64%; Bu2 6,06% e Bu2 7,96%); espatulenol (Bu1 28,99% e Bu1 29,68%; Bu2 24,30 %e Bu2 16,94%); cariofileno óxido (Bu1 12,98% e Bu2 14,24%; Bu2 9,75% e Bu2 23,52%). Estes resultados também confirmaram as identificações botânicas feitas com base na morfologia das flores, indicando a inexistência da suposta variedade. As águas restantes após as hidrodestilações foram extraídas com CHCl3 e em seguida com AcOEt, obtendo-se quatro extratos contendo principalmente os ácidos 3,5- dicafeoilquínico e 3,4-dicafeoilquínico, como demonstrado por análises dos seus espectros de RMN de 1H e 13C. As folhas foram também extraídas em Sohxlet por solventes em sequência:CHCl3, AcOEt e MeOH. Parte do extrato metanólico foi purificado dissolvendo-se em água, eliminando os precipitados formados por repouso a frio e extraindo-se com AcOEt. O extrato obtido desta forma com acetato de etila foi submetido a diversas cromatografias a vácuo, sendo isolado e identificado o ácido 3,5-dicafeoilquínico pela análise dos espectros de RMN de 1H e 13C. Esta rota para os compostos fenólicos foi melhorada através da obtenção de extratos com acetato de etila a partir da solução aquosa em pH 8 e em pH 3. O extrato feito em meio levemente alcalino continha principalmente flavonóides, enquanto que o que foi obtido em pH 3 continha os derivados do ácido quínico. O extrato AcOEt em pH 8 foi fracionado em coluna de silica gel sob pressão, levando ao isolamento e identificação de três flavonóides, identificados pelos seus espectros de UV, RMN 1H e 13C (quercetina, luteolina e apigenina). O extrato AcOEt em pH 4 foi fracionado em coluna de sílica gel, isolando-se e identificando-se o ácido 3,4-dicafeoilquínico pelo seus espectros de RMN de 1H e de 13C.

Mecanismos de dispersão de diásporos e de recrutamento de plântulas evitam a competição intra-específica e possibilitam a colonização de novos ambientes, sendo etapas muito importantes para o estabelecimento de populações em novos sítios. Em áreas de transição entre florestas e vegetação campestre esses processos não são aleatórios, e sim associados muitas vezes a indivíduos lenhosos isolados em tais áreas de campo ou a formações arbustivas. No sul do Brasil, as Florestas com Araucária formam mosaicos com áreas campestres e observa-se o avanço da floresta sobre os campos. A dissertação tem como objetivo avaliar a cuva de sementes e o padrão de estabelecimento de plântulas de espécies lenhosas florestais associadas a áreas de ecótonos de Floresta com Araucária e campos e a indivíduos lenhosos isolados na matriz campestre. Os estudos foram realizados no Centro de Pesquisas e Conservação da Natureza Pró-Mata PUCRS, em São Francisco de Paula, em vegetação campestre excluída de fogo e de pastejo há 14 anos, circundada por florestas. A dispersão de diásporos foi avaliada mensalmente por um período de oito meses com o uso de coletores de sementes que foram posicionados em ecótonos de floresta e campos com diferentes fisionomias e sob indivíduos lenhosos isolados na matriz campestre. Paralelamente, foi realizada em parcelas permanentes a amostragem de plântulas, no início e no final desse período, sendo assim verificada sua sobrevivência e recrutamento. Os diferentes ambientes foram comparados através de análise de variância univariada e multivariada para verificar padrões de chuva de sementes e de estabelecimento de plântulas. Os resultados indicaram que tanto a dispersão de sementes quanto o estabelecimento de plântulas em áreas campestres ocorrem preferencialmente associados a indivíduos isolados de Araucaria angustifolia e a formações arbustivas de Baccharis uncinella e que tais ambientes funcionariam como extensões de condições mais semelhantes à floresta na matriz campestre. / Mechanisms of seed dispersal and recruitment avoid intraspecific competition and are crucial steps for the establishment of populations in new sites. In transition areas between forest and grassland, these processes are not spatially random, but often associated to isolated woody individuals in the grassland or to areas with continuous shrub cover. In southern Brazil, Araucaria forest form mosaics with grassland (Campos) and advance of forest over grassland is observed. This dissertation aims at evaluating diaspore dispersal and the pattern of woody plants seedling establishment associated to ecotones between Araucaria forest and grassland and to isolated woody individuals in the grassland matrix. The study was performed in the Centro de Pesquisas e Conservação da Natureza Pró-Mata PUCRS, in São Francisco de Paula, in grassland vegetation excluded from fire and grazing from 14 years, and which is surrounded by forest. Diaspore dispersal was evaluated for eight months by using seed colectors positioned in forest-grassland ecotones with different physiognomies and under isolated woody individuals in the grassland matrix. In a parallel study, permanent plots were evaluated for seedling establishment at the begining and at the end of the period, which allowed the evaluation of seedling survival and new recruitment. The different types of environment were compared by univariate and multivariate analysis of variance to reveal patterns of seed rain and seedling establishment. The results indicated that both seed dispersal and seedling establishment occur preferentially associated to isolated woody individuals of Araucaria angustifolia and to continuous patches of Baccharis uncinella. We sugest such environments would function as extensions of more similar forest conditions within the grassland matrix.

Mecanismos de dispersão de diásporos e de recrutamento de plântulas evitam a competição intra-específica e possibilitam a colonização de novos ambientes, sendo etapas muito importantes para o estabelecimento de populações em novos sítios. Em áreas de transição entre florestas e vegetação campestre esses processos não são aleatórios, e sim associados muitas vezes a indivíduos lenhosos isolados em tais áreas de campo ou a formações arbustivas. No sul do Brasil, as Florestas com Araucária formam mosaicos com áreas campestres e observa-se o avanço da floresta sobre os campos. A dissertação tem como objetivo avaliar a cuva de sementes e o padrão de estabelecimento de plântulas de espécies lenhosas florestais associadas a áreas de ecótonos de Floresta com Araucária e campos e a indivíduos lenhosos isolados na matriz campestre. Os estudos foram realizados no Centro de Pesquisas e Conservação da Natureza Pró-Mata PUCRS, em São Francisco de Paula, em vegetação campestre excluída de fogo e de pastejo há 14 anos, circundada por florestas. A dispersão de diásporos foi avaliada mensalmente por um período de oito meses com o uso de coletores de sementes que foram posicionados em ecótonos de floresta e campos com diferentes fisionomias e sob indivíduos lenhosos isolados na matriz campestre. Paralelamente, foi realizada em parcelas permanentes a amostragem de plântulas, no início e no final desse período, sendo assim verificada sua sobrevivência e recrutamento. Os diferentes ambientes foram comparados através de análise de variância univariada e multivariada para verificar padrões de chuva de sementes e de estabelecimento de plântulas. Os resultados indicaram que tanto a dispersão de sementes quanto o estabelecimento de plântulas em áreas campestres ocorrem preferencialmente associados a indivíduos isolados de Araucaria angustifolia e a formações arbustivas de Baccharis uncinella e que tais ambientes funcionariam como extensões de condições mais semelhantes à floresta na matriz campestre. / Mechanisms of seed dispersal and recruitment avoid intraspecific competition and are crucial steps for the establishment of populations in new sites. In transition areas between forest and grassland, these processes are not spatially random, but often associated to isolated woody individuals in the grassland or to areas with continuous shrub cover. In southern Brazil, Araucaria forest form mosaics with grassland (Campos) and advance of forest over grassland is observed. This dissertation aims at evaluating diaspore dispersal and the pattern of woody plants seedling establishment associated to ecotones between Araucaria forest and grassland and to isolated woody individuals in the grassland matrix. The study was performed in the Centro de Pesquisas e Conservação da Natureza Pró-Mata PUCRS, in São Francisco de Paula, in grassland vegetation excluded from fire and grazing from 14 years, and which is surrounded by forest. Diaspore dispersal was evaluated for eight months by using seed colectors positioned in forest-grassland ecotones with different physiognomies and under isolated woody individuals in the grassland matrix. In a parallel study, permanent plots were evaluated for seedling establishment at the begining and at the end of the period, which allowed the evaluation of seedling survival and new recruitment. The different types of environment were compared by univariate and multivariate analysis of variance to reveal patterns of seed rain and seedling establishment. The results indicated that both seed dispersal and seedling establishment occur preferentially associated to isolated woody individuals of Araucaria angustifolia and to continuous patches of Baccharis uncinella. We sugest such environments would function as extensions of more similar forest conditions within the grassland matrix.

Mecanismos de dispersão de diásporos e de recrutamento de plântulas evitam a competição intra-específica e possibilitam a colonização de novos ambientes, sendo etapas muito importantes para o estabelecimento de populações em novos sítios. Em áreas de transição entre florestas e vegetação campestre esses processos não são aleatórios, e sim associados muitas vezes a indivíduos lenhosos isolados em tais áreas de campo ou a formações arbustivas. No sul do Brasil, as Florestas com Araucária formam mosaicos com áreas campestres e observa-se o avanço da floresta sobre os campos. A dissertação tem como objetivo avaliar a cuva de sementes e o padrão de estabelecimento de plântulas de espécies lenhosas florestais associadas a áreas de ecótonos de Floresta com Araucária e campos e a indivíduos lenhosos isolados na matriz campestre. Os estudos foram realizados no Centro de Pesquisas e Conservação da Natureza Pró-Mata PUCRS, em São Francisco de Paula, em vegetação campestre excluída de fogo e de pastejo há 14 anos, circundada por florestas. A dispersão de diásporos foi avaliada mensalmente por um período de oito meses com o uso de coletores de sementes que foram posicionados em ecótonos de floresta e campos com diferentes fisionomias e sob indivíduos lenhosos isolados na matriz campestre. Paralelamente, foi realizada em parcelas permanentes a amostragem de plântulas, no início e no final desse período, sendo assim verificada sua sobrevivência e recrutamento. Os diferentes ambientes foram comparados através de análise de variância univariada e multivariada para verificar padrões de chuva de sementes e de estabelecimento de plântulas. Os resultados indicaram que tanto a dispersão de sementes quanto o estabelecimento de plântulas em áreas campestres ocorrem preferencialmente associados a indivíduos isolados de Araucaria angustifolia e a formações arbustivas de Baccharis uncinella e que tais ambientes funcionariam como extensões de condições mais semelhantes à floresta na matriz campestre. / Mechanisms of seed dispersal and recruitment avoid intraspecific competition and are crucial steps for the establishment of populations in new sites. In transition areas between forest and grassland, these processes are not spatially random, but often associated to isolated woody individuals in the grassland or to areas with continuous shrub cover. In southern Brazil, Araucaria forest form mosaics with grassland (Campos) and advance of forest over grassland is observed. This dissertation aims at evaluating diaspore dispersal and the pattern of woody plants seedling establishment associated to ecotones between Araucaria forest and grassland and to isolated woody individuals in the grassland matrix. The study was performed in the Centro de Pesquisas e Conservação da Natureza Pró-Mata PUCRS, in São Francisco de Paula, in grassland vegetation excluded from fire and grazing from 14 years, and which is surrounded by forest. Diaspore dispersal was evaluated for eight months by using seed colectors positioned in forest-grassland ecotones with different physiognomies and under isolated woody individuals in the grassland matrix. In a parallel study, permanent plots were evaluated for seedling establishment at the begining and at the end of the period, which allowed the evaluation of seedling survival and new recruitment. The different types of environment were compared by univariate and multivariate analysis of variance to reveal patterns of seed rain and seedling establishment. The results indicated that both seed dispersal and seedling establishment occur preferentially associated to isolated woody individuals of Araucaria angustifolia and to continuous patches of Baccharis uncinella. We sugest such environments would function as extensions of more similar forest conditions within the grassland matrix.

Made available in DSpace on 2017-07-24T19:38:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jociani Ascari.pdf: 1347077 bytes, checksum: 5bf88ebdcff72a3eee1c4ed2152eb55c (MD5) Previous issue date: 2007-02-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Baccharis uncinella (Asteraceae), popularly known as vassoura, is little known from the chemical point of view, with only two earlier scientific works on their secondary metabolites - the volatile constituents. In the present study, the essential oil from the leaves of B. uncinella and nine extracts obtained in a Soxhlet apparatus with organic solvents starting from the leaves, barks and log were analyzed by CCD, UV and IV and submitted to activity tests against microorganisms; besides, the interactions between the aqueous extract of the leaves with human erytrocytary cells of the sanguine types O+, O-, A+ and B+ were also analyzed. In the antimicrobial tests, the microfungus Candida albicans, as well as the Gram-positive Bacillus cereus, Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus and S. saprophyticus and the Gram-negative bacteria Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae and Pseudomonas aeruginosa were used. The essential oil showed action against B. cereus, S. aureus and C. albicans, in the same way as all of the organic extracts, but the growth of S. saprophyticus was not inhibited by no one of the extracts. The extracts of the barks, when compared with those obtained from other parts of the plant, were active against the largest number of microorganisms and presented the more strong activities. The minimum inhibitory concentration of the essential oil was estimated as 100/mL against S. aureus as well as against C. albicans, wich could be considered a moderate antimicrobial activity. We have isolated small amounts of the three major phenolic components found in the leaves, and the analysis of their UV- and IR-spectra showed the structural features of hydroxylaryl-propenoic acids for these compounds that were found for the first time in this plant species. The analyses of GC-MS of the essential oil produced by hydrodistillation of the leaves collected at the Paraná State presented low monoterpene content (2.29%) and the following sesquiterpenes as the main components: spathulenol 17.20%, caryophyllene oxide 16.20%, transcaryophyllene 10.48%, eudesmol 7.55%, germacrene D 6.28% and cadinol 5.18%. Another oil sample was obtained using the same conditions, but starting with leaves collected in the highland area of Santa Catarina, also presented spathulenol as the main component (15.83%), but it contained 36% in monoterpenes, a very similar composition to those published for samples from the State of Rio Grande do Sul. The interactions among the aqueous extract of the leaves with human erytrocytes isolated from the sanguine types O+, O-, A+ and B+, being verified that the extract presents a non-lytic activity in the analyzed concentrations of 22, 110 and 220/mL. This non-hemolytic profile was observed as similar for all tested blood types. The serological types A+ and O- presented a similar pattern of free Hb oxidation in solution, and the same profile was observed in the new suspension of the precipitate. In the analysis of MEV we observed the qualitative aspects regarding the interaction of the aqueous extract with the architecture of the erythrocyte. In the assays of DPPH with low concentrations, 1.5 x 10-4 and 7.8 x 10-5 mg/mL, it was possible to quantify a partial reduction in the free radicals concentration of 20.10% and 9.25% respectively. / Baccharis uncinella (Asteraceae), popularmente conhecida como vassoura, é pouco conhecida do ponto de vista químico, havendo apenas dois trabalhos científicos anteriores sobre seus metabólitos secundários - os constituintes voláteis. No presente estudo, o óleo essencial das folhas de B.uncinella e nove extratos obtidos em Soxhlet com solventes orgânicos a partir das folhas, cascas e lenho foram analisados por CCD, UV e IV e submetidos a testes de atividade contra microrganismos; além disto, foram também analisadas as interações de extrato aquoso das folhas com células eritrocitárias humanas dos tipos sangüíneos O+, O-, A+ e B+. Nos testes antimicrobianos, foram usados o microfungo Candida albicans, as bactérias Gram-positivas Bacillus cereus, Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus e S. saprophyticus e as bactérias Gram-negativas Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae e Pseudomonas aeruginosa. O óleo essencial apresentou ação contra B. cereus, S. aureus e C. albicans, da mesma forma que todos os extratos orgânicos, mas o crescimento de S. saprophyticus não foi inibido por nenhum deles. Os extratos das cascas, quando comparados com os obtidos de outras partes da planta, foram ativos contra o maior número de microrganismos e apresentaram as mais fortes atividades. A concentração inibitória mínima do óleo essencial foi determinada como 50L/mL tanto contra S. aureus como contra C. albicans, podendo ser considerada uma atividade antimicrobiana moderada. Foram isoladas pequenas quantidades dos três compostos fenólicos majoritários, cujas análises indicam trata-se de derivados de ácidos hidroxiarilpropenóicos, encontrados pela primeira vez nesta espécie vegetal. As análises de CG-EM do óleo essencial produzido por hidrodestilação a partir de folhas coletadas no segundo planalto do Paraná, apresentaram baixo teor de monoterpenos (2,29%) e os seguintes sesquiterpenos como principais componentes: espatulenol 17,20%, cariofileno óxido 16,20%, trans-cariofileno 10,48%, eudesmol 7,55%, germacreno D 6,28% e cadinol 5,18%. Outra amostra de óleo obtida nas mesmas condições, mas a partir de folhas coletadas na região serrana de Santa Catarina, também apresentou espatulenol como principal componente (15,83%), mas quase 36% em monoterpenos, uma composição muito similar às publicadas sobre amostras da Serra Gaúcha. Foram analisadas as interações entre extrato aquoso das folhas com células eritrocitárias humanas dos tipos sangüíneos O+, O-, A+ e B+, sendo que o extrato apresenta uma atividade não-lítica nas concentrações analisadas de 22, 110 e 220 /mL, similar para todas tipagens analisadas. Os sorotipos A+ e O- testados apresentaram um padrão similar de oxidação da Hb livre em solução e, o mesmo perfil foi observado na ressuspensão dos precipitados. Na análise de MEV foram verificados aspectos qualitativos a respeito da interação do extrato aquoso com a arquitetura da célula eritrocitária. Baixas concentrações do extrato, 1,5 x 10-4 e 7,8 x 10-5 mg/mL, apresentaram atividade redutora em presença de DPPH, de 20,10% e 9,25% respectivamente.