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Produção de ciclodextrina glicosiltransferase (CGTASE) por amostras de bacilus utilizando meios alternativos contendo substratos agroindustriais

Paula Patrícia Borba 10 May 2013 (has links)
As enzimas microbianas apresentam um elevado potencial biotecnológico e são utilizadas nas mais diversas áreas industrial. A ciclodextrina glicosiltransferase (CGTase, EC 2.4.1.19) é uma enzima com hablidade de converter amido em ciclodextrinas (CDs), sendo produzida por diversos microorganismos, principalmente por bactérias do gênero Bacillus, sendo principalmente aplicada nas industrias de alimentos e farmacêutica. A utilização da formulação de meios alternativos considerados econômicos, tem gerado diversos estudos no sentido de substituir componentes dos meios tradicionais de produção, por substratos de resíduos industriais e agroindustriais de baixo custo e com elevado valor agregado. Neste sentido, foi realizada inicialmente, a seleção de amostras produtoras da enzima CGTase, tendo sido selecionado Bacillus Licheniformis (UCP 1021), através da formação de halo característico em todas as condições testadas. EM seguida, estudos foram realizados para formulação de meios alternativos econômicos utilizando resíduos agroindustriais, casca da batata (Solanum tuberosum L) e soro de leite, na produção da CGTase. Na formulação dos meios em que a casca de batata substituiu o amido, foram utilizadas as concentrações de 2,5; 5 e 10 g/L, sendo denominados de A, A e A. No meio denominado B, foi substituído a peptona por casca de batata (10g/L), no meio C foi substituído extrato de levedura por soro de leite (5g/L), e no meio D foi substituído a peptona por soro de leite (5g/L). Todos os ensaios de produção da enzima, ocorreram a 37C, 150 rpm, 84 horas. Os resultados obtidos evidenciaram que o meio padrão de produção obteve uma atividade específica de 0,120 umol/mg em 24h, e verificou-se que todos os meios alternativos produziram a enzima, porém o meio denominado A apresentou a maior atividade específica para b-CD (0,823 umol/mg), em 12h, sugerindo assim que a utilização de meios econômicos contendo resíduos agroindustriais, é uma alternativa viável no processo de produção de diversos compostos bioativos utilizados na biotecnologia microbiana. / Microbial enzymes have a high biotechnological potential and are used in various industrial areas . The cyclodextrin glycosyltransferase ( CGTase , EC 2.4.1.19 ) is an enzyme with hablidade to convert starch into cyclodextrins ( CDs ) , being produced by various microorganisms , mainly bacteria of the genus Bacillus , being mainly applied in the food and pharmaceutical industries . Using the formulation of alternative means considered economical , has generated many studies to replace components of the traditional means of production , for substrates of industrial and agro-industrial residues of low cost and high value -added . In this connection , it was initially performed , selection of produce CGTase enzyme samples , Bacillus licheniformis (UCP 1021) were selected by halo formation characteristic in all conditions tested. Then , studies were conducted to formulate economic alternative means using agroindustrial waste , peel the potato ( Solanum tuberosum L ) and whey in the production of CGTase . In formulating means that the potato peel replaced starch , the concentrations used were 2.5 ; 5:10 g / L , being named A , A and The . In the middle called B was replaced by potato peel peptone ( 10g / L ) in medium C was replaced by yeast extract, whey (5 g / L) medium and peptone- D was replaced by whey ( 5g / L). All assays for enzyme production occurred at 37 C , 150 rpm , 84 hours . The results showed that the standard production medium achieved a specific activity of 0.120 umol / mg in 24 hours, and it was found that all alternative media produced the enzyme , however, the midst called A showed the highest specific activity for B- CD ( 0.823 umol / mg) at 12 hours , suggesting that the use of cheap media containing organic residues , is a viable alternative for the production of various bioactive compounds used in microbial biotechnology process.
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Produção de ciclodextrina glicosiltransferase (CGTASE) por amostras de bacilus utilizando meios alternativos contendo substratos agroindustriais

Borba, Paula Patrícia 10 May 2013 (has links)
Made available in DSpace on 2017-06-01T18:20:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 paula_patricia_borba.pdf: 19348194 bytes, checksum: dcfe3cb2db9449555f4f168bb7097a01 (MD5) Previous issue date: 2013-05-10 / Microbial enzymes have a high biotechnological potential and are used in various industrial areas . The cyclodextrin glycosyltransferase ( CGTase , EC 2.4.1.19 ) is an enzyme with hablidade to convert starch into cyclodextrins ( CDs ) , being produced by various microorganisms , mainly bacteria of the genus Bacillus , being mainly applied in the food and pharmaceutical industries . Using the formulation of alternative means considered economical , has generated many studies to replace components of the traditional means of production , for substrates of industrial and agro-industrial residues of low cost and high value -added . In this connection , it was initially performed , selection of produce CGTase enzyme samples , Bacillus licheniformis (UCP 1021) were selected by halo formation characteristic in all conditions tested. Then , studies were conducted to formulate economic alternative means using agroindustrial waste , peel the potato ( Solanum tuberosum L ) and whey in the production of CGTase . In formulating means that the potato peel replaced starch , the concentrations used were 2.5 ; 5:10 g / L , being named A ¹ , A ² and ³ The . In the middle called B was replaced by potato peel peptone ( 10g / L ) in medium C was replaced by yeast extract, whey (5 g / L) medium and peptone- D was replaced by whey ( 5g / L). All assays for enzyme production occurred at 37 ° C , 150 rpm , 84 hours . The results showed that the standard production medium achieved a specific activity of 0.120 umol / mg in 24 hours, and it was found that all alternative media produced the enzyme , however, the midst called A ¹ showed the highest specific activity for B- CD ( 0.823 umol / mg) at 12 hours , suggesting that the use of cheap media containing organic residues , is a viable alternative for the production of various bioactive compounds used in microbial biotechnology process. / As enzimas microbianas apresentam um elevado potencial biotecnológico e são utilizadas nas mais diversas áreas industrial. A ciclodextrina glicosiltransferase (CGTase, EC 2.4.1.19) é uma enzima com hablidade de converter amido em ciclodextrinas (CDs), sendo produzida por diversos microorganismos, principalmente por bactérias do gênero Bacillus, sendo principalmente aplicada nas industrias de alimentos e farmacêutica. A utilização da formulação de meios alternativos considerados econômicos, tem gerado diversos estudos no sentido de substituir componentes dos meios tradicionais de produção, por substratos de resíduos industriais e agroindustriais de baixo custo e com elevado valor agregado. Neste sentido, foi realizada inicialmente, a seleção de amostras produtoras da enzima CGTase, tendo sido selecionado Bacillus Licheniformis (UCP 1021), através da formação de halo característico em todas as condições testadas. EM seguida, estudos foram realizados para formulação de meios alternativos econômicos utilizando resíduos agroindustriais, casca da batata (Solanum tuberosum L) e soro de leite, na produção da CGTase. Na formulação dos meios em que a casca de batata substituiu o amido, foram utilizadas as concentrações de 2,5; 5 e 10 g/L, sendo denominados de A¹, A² e A³. No meio denominado B, foi substituído a peptona por casca de batata (10g/L), no meio C foi substituído extrato de levedura por soro de leite (5g/L), e no meio D foi substituído a peptona por soro de leite (5g/L). Todos os ensaios de produção da enzima, ocorreram a 37ºC, 150 rpm, 84 horas. Os resultados obtidos evidenciaram que o meio padrão de produção obteve uma atividade específica de 0,120 umol/mg em 24h, e verificou-se que todos os meios alternativos produziram a enzima, porém o meio denominado A¹ apresentou a maior atividade específica para b-CD (0,823 umol/mg), em 12h, sugerindo assim que a utilização de meios econômicos contendo resíduos agroindustriais, é uma alternativa viável no processo de produção de diversos compostos bioativos utilizados na biotecnologia microbiana.

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