No description available.

La mort cellulaire programmée est un phénomène essentiel retrouvé chez pratiquement toutes les formes de vie. Chez les mammifères, l’apoptose est une forme de mort importante et très étudiée qui a beaucoup influencé l’étude de la mort cellulaire programmée chez les végétaux. Si la plupart des régulateurs et des effecteurs de l’apoptose animale ne sont pas retrouvés chez les plantes, la similarité de certaines caractéristiques morphologiques et biochimiques laisse croire que certains sentiers de régulation sont évolutivement conservés entre ces deux règnes. Dans ce travail, nous démontrons que les homologues végétaux de BI-1, l’un des rares régulateurs de l’apoptose retrouvé chez les plantes, sont très bien conservés structurellement; certaines caractéristiques déduites des BI-1 végétaux permettent de supposer un mode d’action dans la régulation de la mort. Aussi, nous montrons que les homologues végétaux de BI-1 inhibent l’apoptose induite par la surexpression de Bax chez les cellules humaines 293. Le développement et la caractérisation d’un modèle de mort cellulaire induite par Bax chez les végétaux ont aussi été entrepris. Dans un premier temps, l’expression transitoire de Bax murin par infiltration d’Agrobacterium dans des feuilles de tabac n’a pas causé de phénotype de mort. Par contre, des lignées stables de cellules de tabac BY-2 exprimant constitutivement Bax, seul ou en fusion avec les rapporteurs GFP ou GUS, présentent une mort cellulaire prématurée. La mort de ces cellules est accompagnée d’un changement de l’aspect des cultures, de la fragmentation de l’ADN génomique et de modifications morphologiques caractéristiques des cellules végétales en PCD. Ces lignées ont aussi une sensibilité accrue à la mort causée par un milieu de culture sans sucrose. L’ensemble de ces données, remis dans un contexte plus large, renforce l’idée de l’existence une forme de mort évolutivement ancienne à l’origine de toutes les formes de PCD retrouvées aujourd’hui.

No description available.

La fonction d’une protéine est ultimement déterminée par sa structure tridimensionnelle. La compréhension complète de la fonction d’une protéine implique donc la connaissance de sa structure. Le grand nombre de projet de séquençage de génome résulte en plusieurs dizaines de milliers de séquences de protéines pour lesquelles il n’existe aucune information fonctionnelle. La protéomique structurale implique l’étude de la structure tridimensionnelle de toutes les protéines d’un protéome. Comme la détermination de la structure d’une protéine est un processus laborieux, la protéomique structurale est un des plus grands défis scientifiques du 21e siècle. Malgré cela, plusieurs projets de protéomique structurale ont récemment débuté à travers le monde. Ce mémoire présente une étude qui s’inscrit dans le cadre d’un de ces projets à grande échelle, la protéomique structurale de Methanobacterium thermoautotrophicum. À l’aide de la résonance magnétique nucléaire, la structure tridimensionnelle de MTH187, une protéine de Methanobacterium thermoautotrophicum, a été déterminée. MTH187 est classifié comme ayant une séquence conservée, et sa fonction est inconnue. La structure de MTH187 révèle que cette protéine de 111 acides aminés est composée de six hélices α de 10 à 14 résidus. Par homologie structurale, il a été possible de classifier MTH187 parmi une famille structurale de type « HEAT repeat ». Les protéines de cette famille possèdent une fonction de reconnaissance protéines-protéines.

No description available.

No description available.

No description available.

No description available.

Lactococcus lactis est une bactérie largement utilisée par l'industrie laitière et sa sensibilité à des bactériophages virulents a une importance économique considérable. La caractérisation de ces phages est donc essentielle pour mieux comprendre leur fonctionnement afin de les contrôler. À ce jour, aucune technique fiable pour modifier génétiquement des lactophages virulents n’est disponible. Une des avenues possibles est l’utilisation d’une approche de génie génétique faisant appel à des recombinases de phages, le recombineering. Ce projet de maîtrise visait le développement d’un système de recombineering pour les lactophages virulents. Les expériences in vivo chez L. lactis ont montré que les recombinases Sak et Sak3 n’étaient pas appropriées pour faire du recombineering. Curieusement, quelques recombinants ont été obtenus indépendamment des recombinases, probablement par un processus encore mal compris appelé oligo-recombinaison. Ce mécanisme n’avait pas encore été observé chez une bactérie à Gram positif et a aussi été efficace pour construire des lactophages mutants. / Lactococcus lactis is a widely used bacterium by the dairy industry and its sensitivity to virulent bacteriophages has an important economic relevance. Thus, the characterization of these phages is needed to better understand their mecanism of infection and to control them. Currently, no reliable tool is available to genetically modify virulent lactococcal phages. A possible approach is a genetic engineering method called recombineering which relies on the use of phage recombinases. The aim of this M. Sc. Project was to develop a recombineering system for virulent phages infecting L. lactis. In vivo experiments have shown that recombinases Sak and Sak3 were not efficient for recombineering. Interestingly, a few recombinants were obtained independantly of these recombinases, probably by the uncharacterized process named oligo-recombination. This mechanism had not been observed yet in a Gram-positive bacterium, and it has also been efficient to produce lactococcal phage mutants. / Tableau d'honneur de la FÉSP

No description available.