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Temperamento, desempenho e qualidade da carne de bovinos cruzados abatidos jovensDiesel, Taciana Aparecida [UNESP] 28 February 2012 (has links) (PDF)
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diesel_ta_me_jabo.pdf: 408706 bytes, checksum: f11ad06748ba9354a9801989ea788546 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A bovinocultura de corte deve ter foco no desenvolvimento de sistemas sustentáveis de produção. Este trabalho teve como objetivo avaliar o desempenho de cruzamentos entre raças bovinas, visando animais precoces em acabamento e que produzam carne de qualidade, além de avaliar estes animais quanto a fatores ligados à expressão do temperamento. Foram realizadas avaliações da reatividade, desempenho, características de carcaça e qualidade da carne, in natura e maturada, de machos não castrados e fêmeas 3/4 Angus + 1/4 Nelore (ANTA), 1/2 Angus + 1/4 Simental + 1/4 Nelore (ANTS), 1/2 Limousin + 1/4 Angus + 1/4 Nelore (LITA) e 1/2 Limousin + 1/4 Simental + 1/4 Nelore (LITS), terminados em confinamento ou pastagem com suplementação e abatidos, respectivamente, aos 13 ou 18 meses de idade. Verificou-se que filhos de touros Limousin foram mais reativos, principalmente quando as mães eram Simental x Nelore. Os animais ficaram mais reativos ao longo do tempo e o sistema de produção parece não ter influenciado esta característica. Os animais ANTS foram mais pesados ao desmame (268 kg). Machos ANTA foram mais pesados ao abate quando confinados (474 kg), e os mais leves a pasto (448 kg); o inverso aconteceu com o gado LITA. O ganho diário não diferiu entre os genótipos no sistema a pasto, mas foi significativamente maior para os filhos de touros Angus no confinamento. Os filhos de touros Limousin foram mais eficientes quanto a conversão alimentar e apresentaram maior rendimento de carcaça do que os filhos de touros Angus (ANTA e ANTS). Todos os cruzamentos possibilitaram o abate precoce dos animais e a realização de um ciclo curto de produção. A força de cisalhamento não foi influenciada por nenhum dos efeitos estudados, sendo as médias da carne in natura iguais a 7,1 kgf/cm2, 7,0 kgf/cm2, 7,6 kgf/cm2 e 7,7 kgf/cm2 para os grupos genéticos... / Beef production should focus on developing sustainable production systems. This study aimed to evaluate the performance of crossbred cattle to produce young animals with good quality meat, and to evaluate the expression of temperament in these animals. Reactivity, performance, carcass traits and meat quality, fresh and mature, were evaluated in 3/4 Angus + 1/4 Nelore (ANTA), 1/2 Angus + 1/4 Simmental + 1/4 Nelore (ANTS), 1/2 Limousin + 1/4 Angus + 1/4 Nelore (LITA) e 1/2 Limousin + 1/4 Simmental + 1/4 Nelore (LITS) males and females, finished in feedlot or pasture with supplementation, and slaughtered at 13 or 18 months of age. It was found that offspring of Limousin bulls were more reactive, especially when the dams were 1/2 Simmental x 1/2 Nelore. Animals were more reactive over time and production system seems to have no influence on this trait. ANTS animals showed higher weight at weaning (268 kg). ANTA males showed higher weight at slaughter when confined (474 kg), and lower when finished on pasture (448 kg); the reverse happened with LITA cattle. The daily gain did not differ between the genotypes in the pasture system, but was significantly higher for offspring of Angus bulls in feedlot system. The offspring of Limousin bulls were more efficient in feed conversion and carcass yield than the offspring of Angus bulls (ANTA and ANTS). All crossings enabled the slaughter of young animals and short cycle of production system. Shear force was not affected by any of the effects studied, and the estimated means were equal to 7.1, 7.0, 7.6 and 7.7 kgf/cm2 for the genetic groups ANTA, ANTS, LITA e LITS, respectively... (Complete abstract click electronic access below)
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Identification of Signatures of Selection in Bos Taurus Beef and Dairy Cattle Using Genome-wide SNP GenotypesChoi, Jung Woo 2009 August 1900 (has links)
The objectives of this study were to identify signatures of selection in Bos taurus
beef and dairy cattle populations and to annotate regions of selection with gene, function
and QTL information. Differences in minor allele frequencies, population-average FST,
population-specific FST, and integrated extended haplotype homozygosity scores were
applied to a subset of the bovine HapMap data to characterize signatures of selection in 7
Bos taurus beef and 5 Bos taurus dairy cattle populations.
Numerous single nucleotide polymorphisms (SNP) exhibited evidence of
selection across the genome and regions of BTA2 and BTA14 that are considered to be
under positive selection in beef and dairy cattle, respectively, were highlighted. The
current density of SNP limited our ability to annotate regions putatively under selection
because most SNP in the assay were intergenic. This is likely because of the betweenbreed
SNP discovery method that was used, which typically identifies SNP with higher
allele frequencies.
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Aplicação de microssatélites (STR) de bovinos em animais de raças zebuínasAndreazza, Márcia Cristina January 2006 (has links)
O gado zebu (Bos indicus) é predominante em todo o mundo. Atualmente, no Brasil, o rebanho de bovinos e zebuínos é composto por aproximadamente 170 milhões de indivíduos, no qual, 80% são zebuínos ou animais de raças cruzadas com zebu. O principal objetivo deste estudo foi determinar a possibilidade da utilização de marcadores moleculares de bovinos na identificação genética de zebuínos. A confirmação desta possibilidade seria de extrema valia, já que a quantidade de informações sobre o genoma zebuíno é limitada e metodologias específicas de identificação de marcadores genéticos para raças zebuínas são raras. Assim, o DNA de 65 zebus, de 4 raças diferentes (Gir, Tabapuã, Nelore e Brahman), foi extraído a partir de sangue aplicado em papel filtro, utilizando o “kit” DNA IQTM SYSTEM (Promega®). Após a extração de DNA, foi feito um PCR Multiplex utilizando o “kit” StockMarks® (Applied Biosystems®), o qual amplifica um total de 11 loci (BM1824, BM2113, ETH10, ETH225, ETH3, INRA023, SPS115, TGLA122, TGLA126, TGLA227 e TGLA53). Os fragmentos gerados pela PCR foram analisados por eletroforese capilar utilizando o analisador genético ABI Prism 3100 (Applied Biosystems®) e o programa GeneScan® v.3.7 (Applied Biosystems®). A freqüência dos marcadores e os índices de variabilidade genética foram calculados utilizando o programa Microsatellite Toolkit v.3.1 e o equilíbrio de Hardy-Weinberg foi determinado através do programa GENEPOP v.3.4. Através destas técnicas foi possível demonstrar que os marcadores moleculares utilizados para identificação genética de bovinos podem também ser utilizados para a realização da técnica de identificação genética de zebuínos Além disso, foi possível demonstrar a freqüência alélica na população de zebuínos analisada como um todo, assim como foi determinada a freqüência alélica para os diferentes marcadores moleculares dentro das 4 raças estudas. Considerando o total de 100 diferentes alelos identificados entre os 11 STR (Short Tandem Repeats) analisados, foi possível observar que a heterozigosidade esperada (He) foi relativamente alta na população analisada, assim como na análise por raça. Estes dados indicam alto grau de diversidade genética nas diferentes raças. Neste sentido, a raça Brahman apresentou a menor diversidade (0,60) e a raça Tabapuã, a maior (0,69). Contudo, estudos complementares são necessários, a fim de confirmar as freqüências alélicas estabelecidas, uma vez que os resultados encontrados no presente trabalho referem-se a um número relativamente pequeno de zebuínos, quando comparados com o total de zebus encontrados no rebanho brasileiro.
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Aplicação de microssatélites (STR) de bovinos em animais de raças zebuínasAndreazza, Márcia Cristina January 2006 (has links)
O gado zebu (Bos indicus) é predominante em todo o mundo. Atualmente, no Brasil, o rebanho de bovinos e zebuínos é composto por aproximadamente 170 milhões de indivíduos, no qual, 80% são zebuínos ou animais de raças cruzadas com zebu. O principal objetivo deste estudo foi determinar a possibilidade da utilização de marcadores moleculares de bovinos na identificação genética de zebuínos. A confirmação desta possibilidade seria de extrema valia, já que a quantidade de informações sobre o genoma zebuíno é limitada e metodologias específicas de identificação de marcadores genéticos para raças zebuínas são raras. Assim, o DNA de 65 zebus, de 4 raças diferentes (Gir, Tabapuã, Nelore e Brahman), foi extraído a partir de sangue aplicado em papel filtro, utilizando o “kit” DNA IQTM SYSTEM (Promega®). Após a extração de DNA, foi feito um PCR Multiplex utilizando o “kit” StockMarks® (Applied Biosystems®), o qual amplifica um total de 11 loci (BM1824, BM2113, ETH10, ETH225, ETH3, INRA023, SPS115, TGLA122, TGLA126, TGLA227 e TGLA53). Os fragmentos gerados pela PCR foram analisados por eletroforese capilar utilizando o analisador genético ABI Prism 3100 (Applied Biosystems®) e o programa GeneScan® v.3.7 (Applied Biosystems®). A freqüência dos marcadores e os índices de variabilidade genética foram calculados utilizando o programa Microsatellite Toolkit v.3.1 e o equilíbrio de Hardy-Weinberg foi determinado através do programa GENEPOP v.3.4. Através destas técnicas foi possível demonstrar que os marcadores moleculares utilizados para identificação genética de bovinos podem também ser utilizados para a realização da técnica de identificação genética de zebuínos Além disso, foi possível demonstrar a freqüência alélica na população de zebuínos analisada como um todo, assim como foi determinada a freqüência alélica para os diferentes marcadores moleculares dentro das 4 raças estudas. Considerando o total de 100 diferentes alelos identificados entre os 11 STR (Short Tandem Repeats) analisados, foi possível observar que a heterozigosidade esperada (He) foi relativamente alta na população analisada, assim como na análise por raça. Estes dados indicam alto grau de diversidade genética nas diferentes raças. Neste sentido, a raça Brahman apresentou a menor diversidade (0,60) e a raça Tabapuã, a maior (0,69). Contudo, estudos complementares são necessários, a fim de confirmar as freqüências alélicas estabelecidas, uma vez que os resultados encontrados no presente trabalho referem-se a um número relativamente pequeno de zebuínos, quando comparados com o total de zebus encontrados no rebanho brasileiro.
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Aplicação de microssatélites (STR) de bovinos em animais de raças zebuínasAndreazza, Márcia Cristina January 2006 (has links)
O gado zebu (Bos indicus) é predominante em todo o mundo. Atualmente, no Brasil, o rebanho de bovinos e zebuínos é composto por aproximadamente 170 milhões de indivíduos, no qual, 80% são zebuínos ou animais de raças cruzadas com zebu. O principal objetivo deste estudo foi determinar a possibilidade da utilização de marcadores moleculares de bovinos na identificação genética de zebuínos. A confirmação desta possibilidade seria de extrema valia, já que a quantidade de informações sobre o genoma zebuíno é limitada e metodologias específicas de identificação de marcadores genéticos para raças zebuínas são raras. Assim, o DNA de 65 zebus, de 4 raças diferentes (Gir, Tabapuã, Nelore e Brahman), foi extraído a partir de sangue aplicado em papel filtro, utilizando o “kit” DNA IQTM SYSTEM (Promega®). Após a extração de DNA, foi feito um PCR Multiplex utilizando o “kit” StockMarks® (Applied Biosystems®), o qual amplifica um total de 11 loci (BM1824, BM2113, ETH10, ETH225, ETH3, INRA023, SPS115, TGLA122, TGLA126, TGLA227 e TGLA53). Os fragmentos gerados pela PCR foram analisados por eletroforese capilar utilizando o analisador genético ABI Prism 3100 (Applied Biosystems®) e o programa GeneScan® v.3.7 (Applied Biosystems®). A freqüência dos marcadores e os índices de variabilidade genética foram calculados utilizando o programa Microsatellite Toolkit v.3.1 e o equilíbrio de Hardy-Weinberg foi determinado através do programa GENEPOP v.3.4. Através destas técnicas foi possível demonstrar que os marcadores moleculares utilizados para identificação genética de bovinos podem também ser utilizados para a realização da técnica de identificação genética de zebuínos Além disso, foi possível demonstrar a freqüência alélica na população de zebuínos analisada como um todo, assim como foi determinada a freqüência alélica para os diferentes marcadores moleculares dentro das 4 raças estudas. Considerando o total de 100 diferentes alelos identificados entre os 11 STR (Short Tandem Repeats) analisados, foi possível observar que a heterozigosidade esperada (He) foi relativamente alta na população analisada, assim como na análise por raça. Estes dados indicam alto grau de diversidade genética nas diferentes raças. Neste sentido, a raça Brahman apresentou a menor diversidade (0,60) e a raça Tabapuã, a maior (0,69). Contudo, estudos complementares são necessários, a fim de confirmar as freqüências alélicas estabelecidas, uma vez que os resultados encontrados no presente trabalho referem-se a um número relativamente pequeno de zebuínos, quando comparados com o total de zebus encontrados no rebanho brasileiro.
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A structural and thermodynamic comparison of substrate interactions and catalysis by family 6 glycosyltransferases from Bacteroides ovatus, Parachlamydia acanthamoebae, and Bos taurusUnknown Date (has links)
Family 6 Glycosyltransferases (GT6s) are involved in the biosynthesis of complex glycans and can be found in all vertebrates, cyanophages, and some bacteria and unicellular eukaryotes. Understanding variations within family 6 GTs is important because of the roles of their products in cellular recognition, intercellular interactions, pathogenicity, and immunity and is likewise important for understanding the evolution of GTs.
PaGT6 (from Parchlamydia acanthamoebae) and α3GT (from Bos taurus) both require a divalent metal ion for catalysis which binds to a DXD motif. In BoGT6a from Bacteroides ovatus a NXN motif replaces DXD, and activity is metal-independent. However, mutating the NXN motif in BoGT6a to DXD did not introduce metal-dependency, indicating that metal-dependency is linked to additional differences. Calorimetric studies have shown that the presence of a divalent metal ion enhances UDP and donor substrate binding to PaGT6 and causes an increase in the entropy of the interaction. Protein modelling of PaGT6 has revealed that the presence of Mn2+ allows a hydrogen bond to form between Asp 97 and UDP-GalNAc, causing the donor substrate to bend and form hydrogen bonds with His 119, Asn 229, Lys 228, and Arg 234. These interactions do not occur in the absence of Mn2+.
Investigation of acceptor substrate binding revealed that the presence of UDP enhances acceptor substrate binding to BoGT6a and PaGT6. Calorimetric titrations of BoGT6a with 2-fucosyllactose in the absence and presence of UDP showed that UDP increases the affinity of 2-fucosyllactose 16-fold with little effect on ΔH. Measurements of ΔCp for 2-fucosyllactose binding indicate that there is not a hydrophobic effect for the binding of 2-fucosyllactose. The preferred acceptor substrate for the bovine and Bacteroides GT6 has a β-1,4 linked galactose, but P. acanthamoebae GT6 prefers an acceptor substrate with a β-1,3 linked galactose.
The N-terminus of the catalytic domain of bacterial GT6s is truncated by 47 residues relative to the catalytic domain of bovine α3GT. Removal of this region from α3GT results in an unfolded protein, indicating that although this region is not directly involved in substrate binding, it forms interactions necessary for the stability of the catalytic domain. / Includes bibliography. / Dissertation (Ph.D.)--Florida Atlantic University, 2018. / FAU Electronic Theses and Dissertations Collection
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Evaluation of heterosis and heterosis retention in Bos taurus-Bos indicus crossbred cattle for reproductive and maternal traits in cowsNeufeld Arce, Rodney Oliver 25 April 2007 (has links)
Reproductive, maternal and weight traits were analyzed for Angus (A), Brahman
(B), Hereford (H), and Nellore (N) straightbred cows; F1 NA; 3/8N 5/8A cows; and four
breed composite cows (BANH) at the McGregor Research Station in Central Texas.
Heterosis was estimated for calf crop born (CCB) (n = 1,698), calf crop weaned (CCW)
(n = 1,698), calf survival (CS) (n = 1,388), birth weight (BW) (n = 1380), weaning
weight (WW) (n = 1,198), and cow weight at palpation (PWT) (n = 1,929) by linear
contrasts for cow breed and cow breed group. F1 NA and the quarter breed composite
BANH dam group expressed significant (P < 0.0001) heterosis for calf crop born and
calf crop weaned. The 3/8 N 5/8 Aa produced by matings of 3/4 A 1/4 N bulls to NA
dams expressed significantly more heterosis for CCB (P < 0.0001) and CCW (P < 0.01),
while the 3/8 N 5/8 Ac dams expressed less heterosis than predicted from the dominance
model for both traits.
For CS the 3/8 N 5/8 Aa expressed the same amount of heterosis as predicted
from the dominance model of 0.05, while the 3/8 N 5/8 Ab and 3/8 N 5/8 Ac dams
expressed less heterosis than predictions based on the dominance model. Heterosis
estimates were only significantly higher (P < 0.10) for BANHb dams than expectations from the dominance model. For BW all the BANH cows expressed significant heterosis
except for the BANH2 cows which expressed significant (P < 0.05) negative heterosis of
-0.96 kg.
Calves out of F1 NA cows were heaviest at weaning with 239 kg. All BANH
cows expressed significant (P < 0.0001) heterosis for weaning weight except for the
BANHc cows. These heterosis estimates were higher than those expected from the
dominance model for BANHb and BANH2 cows, while the heterosis estimate was
slightly lower in BANHa cows and similar for BANHc cows. All 3/8 N 5/8 A cows
expressed less heterosis for WW than prediction from the dominance model.
Nellore cows were the heaviest at four years of age with 542 kg. Only the
BANHb and BANHc cows expressed significant (P < 0.05) heterosis for PWT. None of
the 3/8 N 5/8 A cows expressed heterosis for cow weight at palpation.
Results from this study showed that heterosis levels expressed by the different
crossbred cow types were generally equal or higher to those predicted by the dominance
model.
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Avaliação de Aberrações Cromossômicas em bobinos(Bos taurus taurus) infectados pelo papílomavírus bovinoCorrêa Melo, Thatiana 31 January 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O papilomavírus bovino (BPV) é representado por 10 subtipos virais,
epiteliotrópicos ou mucosotrópicos, que são transmitidos entre bovinos por meio do
sangue contaminado e/ou contato entre epitélios. O vírus pode estar presente na forma
latente nos linfócitos do hospedeiro, podendo originar instabilidades cromossômicas.
Neste contexto, este estudo teve como objetivo avaliar alterações cromossômicas que
podem resultar deste processo de instabilidade. Foram coletadas amostras de sangue
periférico de bovinos Bos taurus taurus, as quais foram enviadas para detecção viral,
utilizando a técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR). Em seguida, foram
estabelecidas culturas de linfócitos para análise citogenética. Foram coletadas amostras
de 61 bovinos, apresentando papilomatose (animais sintomáticos) e sem sinais clínicos
(animais assintomáticos) e a análise citogenética foi processada em teste cego (em
coloração convencional e bandamento C). Os resultados mostraram que no momento da
coleta 28 animais não estavam infectados pelo vírus BPV e 33 estavam infectados pelo
BPV tipo 1 e/ou 2. O grupo de bovinos infectados foi subdividido em dois subgrupos:
sintomáticos e assintomáticos. Analisando os animais infectados pelo BPV, o grupo
sintomático (com papilomatose), representado por 17 bovinos, apresentou média de 42,71
% de células apresentando aberrações cromossômicas por indivíduo, enquanto o grupo
assintomático (sem papilomatose), representado por 16 bovinos, apresentou uma média
de 40,19 %. Foram analisados entre 50 a 100 células por amostra, totalizando 2203
células, das quais 918 (42%) apresentavam uma ou mais aberrações cromossômicas. A
taxa de alterações cromossômicas observadas nos bovinos sintomáticos (42,7±7,8) e
assintomáticos (40,2±11) foi comparada com os índices de aberrações espontâneas
observadas no grupo controle (animais não infectados) (4±2). Para analisar diferenças
estatísticas entre os três grupos, foi utilizado o Teste Kruskal-Wallis, seguido do Teste de
Mann Whitney. Estas análises mostraram que a variabilidade de células alteradas entre o
grupo controle e os infectados por BPV é maior no grupo dos bovinos infectados (P <
0,0001). No entanto, diferenças significativas não foram observadas entre os subgrupos
infectados por BPV (P= 0,62). As alterações cromossômicas identificadas nas análises
realizadas foram: associação cêntrica (AC), fragmento acêntrico (FA), associação
telomérica (AT), associação telomérica por uma cromátide (ATcr), quebra cromatídica
(QT), quebra cromossômica (QM), gaps, aneuploidia, poliploidia, adição oudeleção de
segmento cromossômico (add ou del) e separação precoce de cromátides (SPcr). As altas
taxas de anormalidades cromossômicas (numéricas e estruturais) estão relacionadas à
ação do BPV, tendo sido possível a distinção entre animais acometidos por vírus dos
animais não infectados
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Identificação dos tipos de Papilomavírus presentes em lesões cutâneas de bovinos afetados por papilomatoseCristina da Rocha Carvalho, Cybelle 31 January 2008 (has links)
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Previous issue date: 2008 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os papilomavírus constituem uma extensa família de vírus associados a lesões epiteliotrópicas, mas afetando também o tecido mucoso, causando tumores benignos que podem sofrer malignização. A papilomatose bovina é uma doença economicamente relevante, por causar desvalorização do gado a ser comercializado, tanto pela deterioração da pele quanto pela caquexia e morte. Embora não existam dados epidemiológicos, os relatos de produtores e a observação direta indicam que sua incidência no estado de Pernambuco é elevada. O objetivo deste trabalho foi a detecção e tipificação dos diferentes tipos de papilomavírus bovino (BPV), através de PCR, em amostras de verrugas cutâneas coletadas de animais afetados pela papilomatose em uma propriedade leiteira de Pernambuco. Foram analisadas 36 amostras de verrugas cutâneas de 23 bovinos (Bos taurus). Os resultados demonstraram que os primers de detecção geral de BPV, MY09/11 e FAP59/64, não têm alta eficiência, uma vez que não detectaram a ocorrência de BPV em 58,34% e 61,12% das lesões papilomatosas dos bovinos testados. Entretanto, utilizando os primers específicos de tipificação, pelo menos um tipo viral foi detectado em cada amostra de lesão cutânea analisada. Os resultados demonstram a presença de pelo menos um tipo de BPV em quase todas amostras, apresentando maior incidência dos tipos BPV-2 e 3 nos animais avaliados. Além disto, os resultados obtidos indicam a existência de infecção simultânea em 89% dos indivíduos, principalmente por BPV-2 e 3, sendo que 25% dos animais apresentaram co-infecção tripla por BPV-2, 3 e 4. Estes resultados confirmam a presença de diferentes tipos de BPVs no gado afetedo por papilomatose cutânea e sugere que o BPV2 seja o mais freqüente
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Avaliação do impacto do cultivo in vitro de folículos pré-antrais bovinos isolados sobre a qualidade dos oócitos recuperados / Evaluation of the impact of in vitro culture of isolated bovine preantral follicles on the quality of recovered oocytesBatista, Luciene Aparecida 15 August 2018 (has links)
INTRODUÇÃO: Os programas de preservação de fertilidade baseados na criopreservação de gametas e tecido ovariano têm sido amplamente empregados para salvaguardar o potencial reprodutivo de mulheres em idade reprodutiva. Entretanto,o risco de reintrodução de células malignas após o reimplante do tecido e a dificuldade de aplicação dos protocolos de estimulação ovariana em pacientes estrogênio dependentes, dificultam o acesso destas pacientes aos programas de preservação de fertilidade já estabelecidos. O cultivo de folículos isolados vem se mostrando uma técnica promissora capaz de atender a essas pacientes, com resultados bastante satisfatórios. A recuperação de oócitos fertilizáveis tem se mostrado bem sucedida em camundongos resultando em nascidos vivos; já em outros mamíferos de grande porte,como primatas não humanos e humanos,há escassos relatos da obtenção de oócitos em estagio MII . OBJETIVO: Este estudo teve como objetivo analisar a eficiência do cultivo tridimensional in vitro no desenvolvimento de folículos ovarianos bovinos e a sua influência sobre o metabolismo oxidativo, a geração de estresse oxidativo celular e os níveis de transcritos de genes ligados atividade mitocondrial, apoptose e crescimento e desenvolvimento oocitário. MATERIAL E MÉTODOS: Foi realizado o cultivo in vitro tridimensional de folículos secundários bovinos por 16 dias em meio ?- MEM suplementado, em atmosfera de 5% de CO2 e 20% de O2 (Grupo in vitro - Gvt). Como controles foram incluídos dois grupos: um de folículos secundários isolados frescos não submetidos a cultivo (Grupo imaturos- GI) e outro de folículos extraídos já em estágios pré-antrais mais avançados do desenvolvimentos (Grupo in vivo- Gvv). Para a avaliação do desenvolvimento folicular, foram realizadas análises morfológica e testes de viabilidade, além da expressão por RT- qPCR de genes alvos para a atividade mitocondrial e estresse oxidativo. RESULTADOS: As análises do desenvolvimento dos folículos in vitro mostraram que 81,1% dos folículos secundários apresentaram crescimento, com uma taxa de viabilidade em torno de 84%. Cerca de 50% de oócitos recuperados após o cultivo estavam viáveis pela avaliação morfológica, embora nenhum deles tenha atingido o estágio final de maturação (MII). Além disso, o cultivo não promoveu aumento da expressão de genes ligados a apoptose o que também sugere uma boa viabilidade dos folículos cultivados. O mesmo não ocorreu com o sistema Kit Ligand e c-Kit, considerados como marcadores da capacidade global de crescimento e desenvolvimento folicular, verificou-se uma menor expressão de KL nas células somáticas da parede folicular. Com relação ao metabolismo oxidativo, embora o estado redox, marcado pela produção de NAD e FAD, estivesse bastante aumentado nos folículos produzidos in vitro quando comparado com o controle imaturo fresco e maturado in vivo, não se observou aumento das espécies reativas de oxigênio em oócitos obtidos destes mesmos folículos, podendo sugerir a manutenção da capacidade de controlar o balanço oxidativo por parte destas células. ,Também não houve alteração na expressão de genes ligados à biogênese mitocondrial entre os grupos estudos. CONCLUSÃO: O método de cultivo proposto neste estudo, utilizando o sistema 3D em matriz de gel de alginato, permitiu a maturação parcial de folículos secundários isolados, mantendo a viabilidade e características do metabolismo oxidativo semelhantes a folículos maturados in vivo de mesmo tamanho. Entretanto, há algum grau de comprometimento na saúde global do folículo, especialmente em relação às células somáticas da parede folicular. / The fertility preservation programs based on oocyte and ovarian tissue cryopreservation has been widely employed to safeguard the reproductive potential of these patients. However, the risk of reintroducting malignant cells after ovarian tissue transplantation and the difficulty of applying ovarian stimulation protocols in patients with estrogen dependent diseases hinder the access of these patients to already established fertility preservation programs. Isolated follicle culture appears as a promising technique for these cases, with satisfactory results. The recovery of fertilizable oocytes has been shown to be successful in mice resulting in live births; in other large mammals, such as non-human primates and humans, there are a few reports of the obtention of oocytes in the MII stage. OBJECTIVE: This study aimed to analyze the efficiency of in vitro three-dimensional culture in the development of bovine ovarian follicles and their influence on oxidative metabolism, on cellular oxidative stress generation and on the transcript levels of genes linked to mitochondrial activity, apoptosis and oocyte growth and development. MATERIAL AND METHODS: Three-dimensional in vitro culture of bovine secondary follicles was carried out for 16 days in supplemented ?-MEM medium, in an atmosphere of 5% CO2 and 20% O2 (In vitro Group - Gvt). As controls, two groups were included: one of the fresh none cultured isolated secondary follicles (GI-immature group) and one of follicles isolated in a more advanced preantral stage (in vivo Group-Gvv). For the evaluation of the follicular development, morphological analysis and viability tests were performed, besides the expression by RT-qPCR of target gene for mitochondrial activity and oxidative stress were also evaluated. RESULTS: Analysis of the in vitro follicle development showed that 81.1% of the secondary follicles have grown, with a viability rate of 84%. About 50% of oocytes recovered after culture were viable by morphological evaluation, although none of them had reached the final maturation stage (MII). In addition, the culture did not promote increased on the expression of apoptosis-linked genes which also suggests good viability of the cultured follicles. The same was not observed with the Kit Ligand and c-Kit, considered as markers of the global capacity of follicular growth and development; there was a lower expression of KL in the somatic cells from the follicular wall. In relation to the oxidative metabolism, although the redox state, marked by the production of NAD and FAD, was greatly increased in follicles produced in vitro when compared to the immature controls and the in vivo matured group, there was no increase on the production of reactive oxygen species in the oocytes obtained from these follicles, suggesting that these cells were able to control their oxidative imbalance. Also, there was no alteration in the expression of genes linked to mitochondrial biogenesis between the studied groups. CONCLUSION: The culture method proposed in this study, using the 3D system in an alginate gel matrix, allowed the partial maturation of isolated secondary follicles, maintaining the viability and oxidative metabolism characteristics similar to follicles of the same size matured in vivo. However, there is some degree of impairment in overall health, especially in relation to the somatic cells from the follicular wall.
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