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Isolamento do cairomônio de Anagasta kuehniella Zeller (Lepidoptera: Pyralidae) responsável pela atração do parasitoide Habrobracon hebetor Say (Hymenoptera: Braconidae) / Kairomone isolation of Anagasta kuehniella Zeller (Lepidoptera: Pyralidae) responsible for its parasitoid attraction Habrobracon hebetor Say (Hymenoptera: Braconidae)

Favaris, Arodí Prado 15 December 2016 (has links)
Cairomônios são semioquímicos envolvidos nas interações interespecíficas dos insetos, que beneficiam o receptor em detrimento do emissor. Uma destas interações envolve a busca hospedeira por parasitoides, que detectam estes compostos como estratégia para localizar seus hospedeiros. No caso do ectoparasitoide larval, Habrobracon hebetor Say (Hymenoptera: Braconidae), o \'frass\' de Anagasta kuehniella Zeller (Lepidoptera: Pyralidae) libera um cairomônio que atrai as fêmeas do parasitoide. Considerando que A. kuehniella é muito utilizada para produção de ovos, visando à criação de inimigos naturais, este cairomônio é indesejável, pois acaba favorecendo altas infestações por H. hebetor, podendo causar prejuízos expressivos ao longo do processo. Uma das soluções para o controle de tais infestações poderia ser o emprego de armadilhas com o semioquímico sintético. Entretanto, como o cairomônio ainda não foi identificado, este trabalho teve como objetivo o seu isolamento - a etapa inicial para sua identificação. O cairomônio foi extraído por meio da lavagem com solvente e aeração do \'frass\' de A. kuehniella. Os extratos foram, então, testados em olfatometria de quatro vias com fêmeas do parasitoide, registrando-se o tempo de permanência em cada tratamento. O extrato de lavagem ativo foi fracionado em coluna de sílica em cinco frações, cuja atratividade também foi averiguada para proceder com o isolamento do cairomônio. Os extratos e frações foram então analisados por cromatografia gasosa por ionização em chama (GC-FID) e espectrometria de massas (GC-MS), a fim de localizar compostos exclusivos nas amostras ativas. Além disso, as frações provenientes do extrato de lavagem foram aeradas para a extração de seus compostos voláteis e também analisadas por GC-MS. O cairomônio foi isolado na fração 75% éter, indicando ser um composto polar. Por comparação dos cromatogramas, apenas um pico na coluna HP-5ms foi selecionado como pertencente ao cairomônio. Em coluna Rtx-1ms, o pico bifurcou-se, indicando que, pelo menos, um dos compostos faz parte do cairomônio. As combinações metodológicas deste trabalho conduziram ao isolamento do cairomônio presente no \'frass\' de A. kuehniella e à seleção de pelo menos um composto que compõe o semioquímico responsável pela atração do parasitoide H. hebetor, resultando nas primeiras informações de sua estrutura química para sua futura identificação. / Kairomones are semiochemicals involved in interspecific interactions of insects that benefit the receiver to the detriment of the emitter. One of these interactions is host searching by parasitoids which detect these compounds as a strategy to locate their hosts. In the case of the larval ectoparasitoid, Habrobracon hebetor Say (Hymenoptera: Braconidae), the \'frass\' of Anagasta kuehniella Zeller (Lepidoptera: Pyralidae) releases a kairomone that attracts females parasitoids. Considering that A. kuehniella has been used for egg production in order to keep natural enemy rearing, this kairomone is undesirable, because it may lead to high H. hebetor infestation and causes important losses during the rearing process. One of the attempts to control these infestations could be the use semiochemical-baited traps. However, as the kairomone is still unidentified, the aim of this work was to isolate it - the first step for its identification. The kairomone was extracted by solvent washing and aeration of A. kuehniella \'frass\'. Then the extracts were tested in a four-way olfactometer with female parasitoids, registering the time taken in each treatment. The active washing extract was fractionated in five fractions in a silica column, and its attractivity was evaluated to proceed to isolation. The extracts and fractions were then analysed by gas chromatography with flame ionization detector (GC-FID) and gas chromatography coupled with mass spectrometry (GC-MS), in order to locate exclusive compounds in active samples. Furthermore, the fractions from the washed extract were aerated to extract their volatile compounds that were also analysed by GC-MS. The kairomone was isolated in the 75% ether fraction, indicating that it is a polar compound. Comparing the chromatograms, only one peak on the HP-5ms column was selected as belonging to the kairomone. On the Rtx-1ms column, the peak bifurcated, indicating that at least one of the compounds is part of the kairomone. The methodological combinations of this work provided the isolation of the kairomone present in A. kuehniella \'frass\' and the selection of at least one compound that comprises the semiochemical that attracts H. hebetor parasitoid, resulting in the first source of information about its chemical structure for its future identification.
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Isolamento do cairomônio de Anagasta kuehniella Zeller (Lepidoptera: Pyralidae) responsável pela atração do parasitoide Habrobracon hebetor Say (Hymenoptera: Braconidae) / Kairomone isolation of Anagasta kuehniella Zeller (Lepidoptera: Pyralidae) responsible for its parasitoid attraction Habrobracon hebetor Say (Hymenoptera: Braconidae)

Arodí Prado Favaris 15 December 2016 (has links)
Cairomônios são semioquímicos envolvidos nas interações interespecíficas dos insetos, que beneficiam o receptor em detrimento do emissor. Uma destas interações envolve a busca hospedeira por parasitoides, que detectam estes compostos como estratégia para localizar seus hospedeiros. No caso do ectoparasitoide larval, Habrobracon hebetor Say (Hymenoptera: Braconidae), o \'frass\' de Anagasta kuehniella Zeller (Lepidoptera: Pyralidae) libera um cairomônio que atrai as fêmeas do parasitoide. Considerando que A. kuehniella é muito utilizada para produção de ovos, visando à criação de inimigos naturais, este cairomônio é indesejável, pois acaba favorecendo altas infestações por H. hebetor, podendo causar prejuízos expressivos ao longo do processo. Uma das soluções para o controle de tais infestações poderia ser o emprego de armadilhas com o semioquímico sintético. Entretanto, como o cairomônio ainda não foi identificado, este trabalho teve como objetivo o seu isolamento - a etapa inicial para sua identificação. O cairomônio foi extraído por meio da lavagem com solvente e aeração do \'frass\' de A. kuehniella. Os extratos foram, então, testados em olfatometria de quatro vias com fêmeas do parasitoide, registrando-se o tempo de permanência em cada tratamento. O extrato de lavagem ativo foi fracionado em coluna de sílica em cinco frações, cuja atratividade também foi averiguada para proceder com o isolamento do cairomônio. Os extratos e frações foram então analisados por cromatografia gasosa por ionização em chama (GC-FID) e espectrometria de massas (GC-MS), a fim de localizar compostos exclusivos nas amostras ativas. Além disso, as frações provenientes do extrato de lavagem foram aeradas para a extração de seus compostos voláteis e também analisadas por GC-MS. O cairomônio foi isolado na fração 75% éter, indicando ser um composto polar. Por comparação dos cromatogramas, apenas um pico na coluna HP-5ms foi selecionado como pertencente ao cairomônio. Em coluna Rtx-1ms, o pico bifurcou-se, indicando que, pelo menos, um dos compostos faz parte do cairomônio. As combinações metodológicas deste trabalho conduziram ao isolamento do cairomônio presente no \'frass\' de A. kuehniella e à seleção de pelo menos um composto que compõe o semioquímico responsável pela atração do parasitoide H. hebetor, resultando nas primeiras informações de sua estrutura química para sua futura identificação. / Kairomones are semiochemicals involved in interspecific interactions of insects that benefit the receiver to the detriment of the emitter. One of these interactions is host searching by parasitoids which detect these compounds as a strategy to locate their hosts. In the case of the larval ectoparasitoid, Habrobracon hebetor Say (Hymenoptera: Braconidae), the \'frass\' of Anagasta kuehniella Zeller (Lepidoptera: Pyralidae) releases a kairomone that attracts females parasitoids. Considering that A. kuehniella has been used for egg production in order to keep natural enemy rearing, this kairomone is undesirable, because it may lead to high H. hebetor infestation and causes important losses during the rearing process. One of the attempts to control these infestations could be the use semiochemical-baited traps. However, as the kairomone is still unidentified, the aim of this work was to isolate it - the first step for its identification. The kairomone was extracted by solvent washing and aeration of A. kuehniella \'frass\'. Then the extracts were tested in a four-way olfactometer with female parasitoids, registering the time taken in each treatment. The active washing extract was fractionated in five fractions in a silica column, and its attractivity was evaluated to proceed to isolation. The extracts and fractions were then analysed by gas chromatography with flame ionization detector (GC-FID) and gas chromatography coupled with mass spectrometry (GC-MS), in order to locate exclusive compounds in active samples. Furthermore, the fractions from the washed extract were aerated to extract their volatile compounds that were also analysed by GC-MS. The kairomone was isolated in the 75% ether fraction, indicating that it is a polar compound. Comparing the chromatograms, only one peak on the HP-5ms column was selected as belonging to the kairomone. On the Rtx-1ms column, the peak bifurcated, indicating that at least one of the compounds is part of the kairomone. The methodological combinations of this work provided the isolation of the kairomone present in A. kuehniella \'frass\' and the selection of at least one compound that comprises the semiochemical that attracts H. hebetor parasitoid, resulting in the first source of information about its chemical structure for its future identification.
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Resposta de nematoides entomopatogênicos aos voláteis radiculares de cana-de-açúcar (Saccharum officinarum L.) sob herbivoria de ninfas de Mahanarva fimbriolata (Stål) (Hemiptera: Cercopidae) / Response of entomopathogenic nematodes to sugarcane (Saccharum officinarum L.) root volatiles under herbivory by nymphs of Mahanarva fimbriolata (Stål) (Hemiptera: Cercopidae)

Tonelli, Mateus 22 January 2015 (has links)
As respostas dos nematoides entomopatogênicos, Steinernema carpocapsae (Weiser) e Heterorhabditis indica (Poinar, Jackson e Klein), aos voláteis emitidos por raízes de cana-de-açúcar (Saccharum officinarum L.) danificadas ou não danificadas por ninfas da cigarrinha-da-raiz, Mahanarva fimbriolata (Stål), foram estudadas em laboratório. Plantas de cana-de-açúcar foram transplantadas para câmaras laterais do olfatômetro de seis vias e submetidas ou não a herbivoria por M. fimbriolata. Cerca de 10000 nematoides entomopatogênicos foram liberados na câmara central do olfatômetro e após 24 horas os nematoides foram contabilizados em cada câmara lateral do dispositivo. Raízes de plantas previamente danificadas ou não danificadas por M. fimbriolata foram destacadas das plantas, congeladas com nitrogênio liquido e maceradas. O material foi então aerado por 8 horas para a coleta dos voláteis. O perfil dos voláteis dos extratos naturais foi analisado em um cromatógrafo gasoso acoplado a um espectrômetro de massas (GC-MS). Os nematoides de ambas as espécies foram atraídos pelos voláteis radiculares de plantas danificadas pela cigarrinha-das-raízes, em contraste com plantas não danificadas e areia umedecida (controle). As análises em GC-MS revelaram que não houve diferença qualitativa no perfil de voláteis radiculares entre os tratamentos. Por outro lado, dos 11 compostos presentes nas raízes não danificadas, di-hidro mircenol e Beta isso metioneno reduziram, significativamente, sua concentração após o ataque de M. fimbriolata. Estes resultados sugerem que o recrutamento de nematoides entomopatogênicos neste sistema pode ter sido influenciado pela diminuição da concentração destes dois compostos radiculares nas plantas sob herbivoria. / The responses of entomopathogenic nematodes Steinernema carpocapsae (Weiser) and Heterorhabditis indica (Poinar, Jackson e Klein), to volatiles emitted by sugar cane roots damaged or undamaged by Mahanarva fimbriolata (Stål) nymphs, were investigated under laboratory conditions. Thus, sugarcane plants damaged or undamaged by M. fimbriolata were transplanted to lateral arms of six arm olfactometer. Approximately 10000 entomopathogenic nematodes were released in the central chamber of the olfactometer and after 24 hours, the nematodes were counted in each arm. Roots of previously damaged or undamaged plants were detached, frozen with liquid nitrogen and macerated. The material was then aerated for 8 hours to collect volatiles. The volatiles profile was analyzed by a gas chromatograph-mass spectrometer. Most nematodes of both species moved to plants that had been previously damaged over undamaged plants, and there was no significant difference in the choice of undamaged plant and only moisted sand. The GC-MS analyzes showed no qualitative difference between the root treatments volatiles profile. In both treatments, the same 11 compounds were found. Although, two compounds, dihydro myrcenol and Beta-iso-methionene, showed quantitative difference between treatments, observing greater production in undamaged plants, i.e. herbivory caused reduction in tested sugar cane roots volatiles releasing. These data provide new information about the tritrophic relationships occurring in the soil which, in the future, can be used in order to develop field management for M. fimbriolata.
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Resposta de nematoides entomopatogênicos aos voláteis radiculares de cana-de-açúcar (Saccharum officinarum L.) sob herbivoria de ninfas de Mahanarva fimbriolata (Stål) (Hemiptera: Cercopidae) / Response of entomopathogenic nematodes to sugarcane (Saccharum officinarum L.) root volatiles under herbivory by nymphs of Mahanarva fimbriolata (Stål) (Hemiptera: Cercopidae)

Mateus Tonelli 22 January 2015 (has links)
As respostas dos nematoides entomopatogênicos, Steinernema carpocapsae (Weiser) e Heterorhabditis indica (Poinar, Jackson e Klein), aos voláteis emitidos por raízes de cana-de-açúcar (Saccharum officinarum L.) danificadas ou não danificadas por ninfas da cigarrinha-da-raiz, Mahanarva fimbriolata (Stål), foram estudadas em laboratório. Plantas de cana-de-açúcar foram transplantadas para câmaras laterais do olfatômetro de seis vias e submetidas ou não a herbivoria por M. fimbriolata. Cerca de 10000 nematoides entomopatogênicos foram liberados na câmara central do olfatômetro e após 24 horas os nematoides foram contabilizados em cada câmara lateral do dispositivo. Raízes de plantas previamente danificadas ou não danificadas por M. fimbriolata foram destacadas das plantas, congeladas com nitrogênio liquido e maceradas. O material foi então aerado por 8 horas para a coleta dos voláteis. O perfil dos voláteis dos extratos naturais foi analisado em um cromatógrafo gasoso acoplado a um espectrômetro de massas (GC-MS). Os nematoides de ambas as espécies foram atraídos pelos voláteis radiculares de plantas danificadas pela cigarrinha-das-raízes, em contraste com plantas não danificadas e areia umedecida (controle). As análises em GC-MS revelaram que não houve diferença qualitativa no perfil de voláteis radiculares entre os tratamentos. Por outro lado, dos 11 compostos presentes nas raízes não danificadas, di-hidro mircenol e Beta isso metioneno reduziram, significativamente, sua concentração após o ataque de M. fimbriolata. Estes resultados sugerem que o recrutamento de nematoides entomopatogênicos neste sistema pode ter sido influenciado pela diminuição da concentração destes dois compostos radiculares nas plantas sob herbivoria. / The responses of entomopathogenic nematodes Steinernema carpocapsae (Weiser) and Heterorhabditis indica (Poinar, Jackson e Klein), to volatiles emitted by sugar cane roots damaged or undamaged by Mahanarva fimbriolata (Stål) nymphs, were investigated under laboratory conditions. Thus, sugarcane plants damaged or undamaged by M. fimbriolata were transplanted to lateral arms of six arm olfactometer. Approximately 10000 entomopathogenic nematodes were released in the central chamber of the olfactometer and after 24 hours, the nematodes were counted in each arm. Roots of previously damaged or undamaged plants were detached, frozen with liquid nitrogen and macerated. The material was then aerated for 8 hours to collect volatiles. The volatiles profile was analyzed by a gas chromatograph-mass spectrometer. Most nematodes of both species moved to plants that had been previously damaged over undamaged plants, and there was no significant difference in the choice of undamaged plant and only moisted sand. The GC-MS analyzes showed no qualitative difference between the root treatments volatiles profile. In both treatments, the same 11 compounds were found. Although, two compounds, dihydro myrcenol and Beta-iso-methionene, showed quantitative difference between treatments, observing greater production in undamaged plants, i.e. herbivory caused reduction in tested sugar cane roots volatiles releasing. These data provide new information about the tritrophic relationships occurring in the soil which, in the future, can be used in order to develop field management for M. fimbriolata.

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