Orientador: Henrique Marques Barbosa de Souza / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-27T10:31:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rosa_VivianedeSouza_M.pdf: 2727894 bytes, checksum: d0d5ab88ca9670f3109f39586f01a78c (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: Células-tronco embrionárias (CTE) são células indiferenciadas que possuem a capacidade de (1) se proliferarem indefinidamente (auto-renovação) e, quando induzidas, (2) darem origem a qualquer tipo celular presente no embrião (pluripotência). Uma das abordagens mais comumente utilizadas para o estudo de diferenciação de CTE é através da formação de agregados multicelulares esféricos denominados corpos embrióides (CE). CE passam por um processo de morfogênese semelhante ao observado em embriões, originando derivados dos três folhetos germinativos. Durante o desenvolvimento embrionário, a formação e o posicionamento dos três folhetos ocorre por um processo altamente coordenado que culmina na formação de um embrião polarizado no eixo anteroposterior. Entretanto, um dos grandes desafios de pesquisas que envolvem o uso da diferenciação de CTE em CE é encontrar indícios de que esses processos são recapitulados in vitro e se entender como que células derivadas dos folhetos germinativos, que no embrião ocorrem de forma altamente organizada, são originadas em estruturas celulares sem nenhuma organização global evidente, como visto em CE. Coup-TFII (Chicken ovalbumin upstream promoter-transcription factor II) é um fator de transcrição o qual possui um papel fundamental na regulação do desenvolvimento embrionário e na aquisição de destinos celulares específicos durante a diferenciação de CTE. Utilizando CE como um modelo de estudo, caracterizamos a expressão de Coup-TFII e seu possível envolvimento durante a determinação de destinos celulares. Nossos resultados identificaram uma expressão hemisférica de Coup-TFII em CE em etapas inicias do processo de diferenciação. Esta observação nos levou a caracterizar a distribuição espacial de marcadores moleculares tecido-específicos nos CE em relação à expressão hemisférica de Coup-TFII. Interessantemente, praticamente todas as células identificadas como precursores mesodérmicos e precursores neuroectodérmicos, através da expressão de Brachyury-T e Nestin, respectivamente, estão contidas nas população de células Coup-TFII-positivas. Estes resultados sugerem a existência de um mecanismo de organização global intrínseco nas CTE, onde a expressão de Coup-TFII parece segregar os CE em dois hemisférios e, provavelmente de forma antagônica com Oct4, determinaria diferentes destinos celulares ainda em fases iniciais da diferenciação / Abstract: Embryonic stem cells (ESC) are undifferentiated cells that have the ability to (1) proliferate indefinitely (self-renewal) and when induced, (2) give rise to any cell type present in the embryo (pluripotency). One of the most commonly used approaches for the study of ESC differentiation is through the formation of spherical multicellular aggregates called embryoid bodies (EB). EB undergo a process similar to that observed in morphogenesis embryos, giving derivatives of three germ layers. During embryonic development, formation and placement of the three germ layers is a highly coordinated process by which culminates in the formation of a polarized embryo in the antero-posterior axis. However, one of the great challenges of research involving the use of ESC differentiation in EB is to find evidence that these processes are recapitulated in vitro and in understanding how to cells derived from the germ layers that occurs in the embryo highly organized manner originate on cellular structures with no apparent global organization, as seen in the EB. COUP-TFII (chicken ovalbumin promoter-upstream transcription factor II) is a transcription factor which plays a key role in the regulation of embryonic development and determination of specific cell fates during differentiation ESC. Using EB as a model system, we characterized the expression of Coup-TFII and its possible involvement in the determination of cell fates. Our results identified a hemispheric expression of Coup-TFII in EB at the onset of differentiation. This observation led us to characterize the spatial distribution of tissue-specific molecular markers in EB in relation the hemispheric expression of Coup-TFII. Interestingly, practically all cells identified as mesodermal and neuroectodermal precursors by the expression of Brachyury-T and Nestin, respectively, are contained in the COUP-TFII-positive cell population. These results suggest the existence of a mechanism of global organization intrinsic to ESC, where the expression of Coup-TFII segregates the EB into two hemispheres and probably antagonistically with Oct4, determine different cell fates still in early stages of differentiation / Mestrado / Biologia Tecidual / Mestra em Biologia Celular e Estrutural