INTRODUÇÃO: A poluição em centros urbanos é produzida, principalmente, pela queima de combustíveis fósseis. Constitui problema que afeta a saúde da população, provocando doenças tanto no sistema respiratório, como sistemicamente em vários órgãos. Dentre as funções afetadas, realça o impacto da poluição sobre o sistema endócrino, podendo acometer as adrenais, tanto, no ser humano, como em roedores. Todavia, pouco se conhece sobre a ação nesta glândula. Assim, propusemo-nos a analisar os efeitos do ar poluído sobre as adrenais em duas gerações consecutivas de camundongas. OBJETIVOS: Analisar os efeitos do ar concentrado com material particulado (MP) 2,5um sobre as adrenais, avaliando as alterações histomorfométricas; a angiogênese pelo fator de crescimento vascular endotelial (VEGF-A); a pela proliferação celular por meio da proteína Ki-67 e o índice de apoptose pela caspase 3-clivada nas três zonas do córtex da adrenal. MATERIAL E MÉTODOS: Utilizaram-se 20 camundongas alocadas em biotério livre de poluentes, as quais foram acasalados na proporção de um macho para duas fêmeas. Após confirmação da cópula, foram divididas em 2 grupos de 10 animais cada. Acondicionou-se um grupo diariamente em uma câmara, onde as camundongas foram expostas a MP 2,5um à concentração de 600ug/m³ (G0P). O outro grupo, com 10 animais, foi alocado em outra câmara com ar filtrado (G0NP). A exposição ocorreu diariamente durante toda a prenhez das camundongas. Ao nascimento os conceptos, foram amamentados por 30 dias em amamentação, período onde não houve exposição aos poluentes. Após este período, as mães foram eutanasiadas para coleta das adrenais e as filhas sofreram o mesmo protocolo de exposição (G1P e G1NP - submetidas e não submetidas à poluição), não foram acasaladas, sendo eutanasiadas para coleta das adrenais ao fim do protocolo. As adrenais passaram por processamento histológico para coloração de H.E. e imunoistoquímico. RESULTADOS: As adrenais do grupo G0P apresentaram maior espessura da zona glomerulosa e as do G1P apresentaram maior quantidade de espongiócitos na zona fasciculada. As adrenais do grupo G1P tiveram maior imunoexpressão de VEGF-A na zona glomerulosa do que as do G1NP. A imunoexpressão do Ki-67 foi maior na zona reticulada no grupo G0P; no grupo G1P houve maior expressão do Ki-67 na zona glomerulosa do que no grupo G1NP. A imunoexpressão da caspase-3 clivada foi maior nos grupos G0P e G1P do que nos demais. CONCLUSÃO: A exposição ao ar poluído com material particulado 2.5?m determinou alterações histomorfométricas e imunoistoquímicas nas três zonas do córtex da adrenal de duas gerações consecutivas de camundongas. Estas alterações poderiam causar distúrbios endócrinos e cardiovasculares / INTRODUCTION: The pollution in urban centers is produced mainly by the burning of fossil fuels. It\'s a concern of public health, causing diseases in both the respiratory system and the other organs. Among the affected functions, it is important to highlight the impact of pollution on the endocrine system and this effect on the adrenal glands, both in humans and in rodents. However, little is known on the action of pollutants on this gland. Therefore, the aim of this study was to analyze the effects of polluted air on the adrenal in two consecutive generations of female mice. OBJECTIVES: To assess the effects of concentrate air with particulate matter (PM) 2.5um on the adrenal cortex evaluating histomorphometric changes; angiogenesis by vascular endothelial growth factor (VEGF-A); the cell proliferation by Ki-67 index and apoptosis by cleaved caspase-3 in the three zones of the adrenal cortex. MATERIAL AND METHODS: We used 20 female mice in their cages free of pollutants. Those animals were mated at a ratio of one male to two females. After mating confirmation, animals were divided into 2 groups of 10 animals each. A group was daily allocated in a chamber where the female mice were exposed to PM 2.5um at a concentration of 600ug/m³ (G0P). The other group of 10 animals was allocated in another chamber with filtered air (G0NP). The exposure occurred daily throughout pregnancy period. At birth, the fetuses were breastfed for 30 days. During breastfeeding period there was no pollutants exposure. After this period, mothers were euthanized for adrenal collection and daughters suffered the same exposure protocol (G1P and G1NP - exposed and not exposed to pollution), but those were not mated, being euthanized for adrenal collection at the end of the protocol. The adrenal underwent histological processing for H.E. staining and immunohistochemistry. RESULTS: The adrenal of the G0P group had increased thickness of the zona glomerulosa and the G1P presented more espongiocytes in the zona fasciculata. The adrenal of the G1P group had higher immunoreactivity of VEGF-A in the zona glomerulosa than one of the G1NP. The immunoreactivity of Ki-67 in the zona reticularis of G0P group was higher one of G0NP; there was a higher expression of Ki-67 in the zona glomerulosa of the G1P group compared to G1NP group. The immunoreactivity of cleaved caspase-3 in G0P and G1P was higher than ones of other groups. CONCLUSION: Exposure to air pollution with particulate matter 2.5um determined histomorphometric and immunohistochemical changes in the three adrenal cortical zones of the two consecutive generations of mice. These changes could cause endocrine and cardiovascular disorders

INTRODUÇÃO: A poluição em centros urbanos é produzida, principalmente, pela queima de combustíveis fósseis. Constitui problema que afeta a saúde da população, provocando doenças tanto no sistema respiratório, como sistemicamente em vários órgãos. Dentre as funções afetadas, realça o impacto da poluição sobre o sistema endócrino, podendo acometer as adrenais, tanto, no ser humano, como em roedores. Todavia, pouco se conhece sobre a ação nesta glândula. Assim, propusemo-nos a analisar os efeitos do ar poluído sobre as adrenais em duas gerações consecutivas de camundongas. OBJETIVOS: Analisar os efeitos do ar concentrado com material particulado (MP) 2,5um sobre as adrenais, avaliando as alterações histomorfométricas; a angiogênese pelo fator de crescimento vascular endotelial (VEGF-A); a pela proliferação celular por meio da proteína Ki-67 e o índice de apoptose pela caspase 3-clivada nas três zonas do córtex da adrenal. MATERIAL E MÉTODOS: Utilizaram-se 20 camundongas alocadas em biotério livre de poluentes, as quais foram acasalados na proporção de um macho para duas fêmeas. Após confirmação da cópula, foram divididas em 2 grupos de 10 animais cada. Acondicionou-se um grupo diariamente em uma câmara, onde as camundongas foram expostas a MP 2,5um à concentração de 600ug/m³ (G0P). O outro grupo, com 10 animais, foi alocado em outra câmara com ar filtrado (G0NP). A exposição ocorreu diariamente durante toda a prenhez das camundongas. Ao nascimento os conceptos, foram amamentados por 30 dias em amamentação, período onde não houve exposição aos poluentes. Após este período, as mães foram eutanasiadas para coleta das adrenais e as filhas sofreram o mesmo protocolo de exposição (G1P e G1NP - submetidas e não submetidas à poluição), não foram acasaladas, sendo eutanasiadas para coleta das adrenais ao fim do protocolo. As adrenais passaram por processamento histológico para coloração de H.E. e imunoistoquímico. RESULTADOS: As adrenais do grupo G0P apresentaram maior espessura da zona glomerulosa e as do G1P apresentaram maior quantidade de espongiócitos na zona fasciculada. As adrenais do grupo G1P tiveram maior imunoexpressão de VEGF-A na zona glomerulosa do que as do G1NP. A imunoexpressão do Ki-67 foi maior na zona reticulada no grupo G0P; no grupo G1P houve maior expressão do Ki-67 na zona glomerulosa do que no grupo G1NP. A imunoexpressão da caspase-3 clivada foi maior nos grupos G0P e G1P do que nos demais. CONCLUSÃO: A exposição ao ar poluído com material particulado 2.5?m determinou alterações histomorfométricas e imunoistoquímicas nas três zonas do córtex da adrenal de duas gerações consecutivas de camundongas. Estas alterações poderiam causar distúrbios endócrinos e cardiovasculares / INTRODUCTION: The pollution in urban centers is produced mainly by the burning of fossil fuels. It\'s a concern of public health, causing diseases in both the respiratory system and the other organs. Among the affected functions, it is important to highlight the impact of pollution on the endocrine system and this effect on the adrenal glands, both in humans and in rodents. However, little is known on the action of pollutants on this gland. Therefore, the aim of this study was to analyze the effects of polluted air on the adrenal in two consecutive generations of female mice. OBJECTIVES: To assess the effects of concentrate air with particulate matter (PM) 2.5um on the adrenal cortex evaluating histomorphometric changes; angiogenesis by vascular endothelial growth factor (VEGF-A); the cell proliferation by Ki-67 index and apoptosis by cleaved caspase-3 in the three zones of the adrenal cortex. MATERIAL AND METHODS: We used 20 female mice in their cages free of pollutants. Those animals were mated at a ratio of one male to two females. After mating confirmation, animals were divided into 2 groups of 10 animals each. A group was daily allocated in a chamber where the female mice were exposed to PM 2.5um at a concentration of 600ug/m³ (G0P). The other group of 10 animals was allocated in another chamber with filtered air (G0NP). The exposure occurred daily throughout pregnancy period. At birth, the fetuses were breastfed for 30 days. During breastfeeding period there was no pollutants exposure. After this period, mothers were euthanized for adrenal collection and daughters suffered the same exposure protocol (G1P and G1NP - exposed and not exposed to pollution), but those were not mated, being euthanized for adrenal collection at the end of the protocol. The adrenal underwent histological processing for H.E. staining and immunohistochemistry. RESULTS: The adrenal of the G0P group had increased thickness of the zona glomerulosa and the G1P presented more espongiocytes in the zona fasciculata. The adrenal of the G1P group had higher immunoreactivity of VEGF-A in the zona glomerulosa than one of the G1NP. The immunoreactivity of Ki-67 in the zona reticularis of G0P group was higher one of G0NP; there was a higher expression of Ki-67 in the zona glomerulosa of the G1P group compared to G1NP group. The immunoreactivity of cleaved caspase-3 in G0P and G1P was higher than ones of other groups. CONCLUSION: Exposure to air pollution with particulate matter 2.5um determined histomorphometric and immunohistochemical changes in the three adrenal cortical zones of the two consecutive generations of mice. These changes could cause endocrine and cardiovascular disorders

Made available in DSpace on 2016-08-15T20:31:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MurielMLP_DISSERT.pdf: 1862535 bytes, checksum: aed8498c7a83748a04e6fa895aa1fc9d (MD5) Previous issue date: 2015-02-20 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / This study was aimed at evaluating the viability of xenografting of ovarian tissue from heifers under renal capsule of two different murine models of hormone-treated renal-encapsulated bovine ovarian tissue xenotransplantation. Thus, animals of BALB/c Nude (n=9) and C57BL6 SCID (n=12) received ovarian cortical fragments from seven heifers. The ovarian cortices were processed for histology (control) or grafted under the renal capsules of recipient mice, evaluated by vaginal washing until 60th day post-grafting and divided in three groups, each one with three BALB/c Nude and four C57BL6 SCID, as: control group; treated with equine chorionic gonadotrophin hormone, eCG or a combination of follicle stimulating hormone and luteinizing hormone (FSH + LH). Infrared thermography was performed at different times in donor ovaries and recipients: at collection at slaughterhouse, at the time of xenografting procedure and at time of xenografts collection, grafted tissues were also recovered for histology and blood was collected for hepatorenal biochemistry. The average duration of the phases of the estrous cycle, the results of thermographic evaluation, and hepatorenal biochemistry were compared by ANOVA followed by Tukey s test (p<0,05) The average time of xenografting did not exceeded 18 minutes in both models. The C57BL6 SCID showed a more elastic renal capsule, facilitating the grafting procedure whem compared to BALB/c NUDE. Among the strains, 83% of C57BL6 SCID and 77% of BALB/c Nude mice showed development and vascularization of the transplanted tissue, which acquired cyclicity at 19 and 9 days post-transplantation, respectively. Hemorrhagic follicles in xenografts induced with FSH + LH were found in the C57BL6 SCID strain. The thermography did not allows clearly distinction between donor and recipient tissue by xenografting. Our integration of these parameters revealed no significant difference between treatments for both strains studied, with the exception of urea levels, which were lower in the grafted mice than in non-grafted control mice. In conclusion, histological evaluation allow the monitoring of graft reperfusion and follicular development; new hormonal protocols are needed for obtaining oocytes for in vitro fertilization; infrared thermography provided minimum accuracy for monitoring donor ovaries and the kidney recipient, not highlighting transplants; C57BL6 SCID strain appears to be the best host for ovarian xenografts, since the transplants in these mice were viable and showed robust follicular development and xenotransplantation under the kidney capsule does not compromise the renal and hepatic function of the recipient animal / O objetivo desse trabalho foi de avaliar a viabilidade do xenotransplante de tecido ovariano de novilhas sob a cápsula renal de dois modelos de camundongas imunodeficientes e posteriormente estimuladas hormonalmente. Para tanto, animais das linhagens BALB/c Nude n = 9 e C57BL6 SCID n = 12 receberam fragmentos de sete ovários de novilhas. Os tecidos corticais ovarianos foram levados diretamente para histologia clássica (controle) ou transplantados sob a cápsula renal das receptoras, e permaneceram por 60 dias. Após cinco dias da cirurgia, foi iniciado o lavado vaginal, a cada 12 horas, durante 55 dias e divididas em três grupos, cada um com três BALB/c Nude e quatro C57BL6 SCID, onde o grupo um foi o controle, o grupo 2 estimulado hormonalmente com eCG e o grupo três, com uma associação de FSH+LH. O uso de termografia infravermelha para avaliação do tecido ovariano se deu no momento da coleta do ovário no abatedouro, logo após o transplante e no momento da retirada do mesmo. Amostras de tecidos e sangue foram colhidos e encaminhados para histologia clássica e bioquímica hepática e renal. As durações das fases do ciclo estral, os dados termográficos e bioquímicos foram avaliados por ANOVA seguidos de teste de Tukey (p<0,05). O tempo cirúrgico médio em ambos os modelos não excedeu 18 minutos. Os animais C57BL6 SCID possuíam uma capsula renal mais elástica, facilitando a inserção dos fragmentos quando comparado às BALB/c Nude, o desenvolvimento e vascularização foi constatado em 83% das C57BL6 SCID e 77% das receptoras BALB/c Nude, com retorno da atividade ovariana 19 e 9 dias após o transplante, respectivamente. Observou-se ainda a presença de corpo hemorrágico nos transplantes induzidos com a associação FSH+LH na linhagem C57BL6 SCID. A termografia não permitiu a distinção entre os tecidos doador e receptor por ocasião do xenotransplante. Na avaliação das funções renais e hepáticas da bioquímica plasmática, apenas a ureia apresentou valores menores para animais transplantados quando comparados aos seus respectivos modelos controles. Conclui-se neste estudo que: a análise histológica permitiu o monitoramento da reperfusão e desenvolvimento folicular do transplante; novos protocolos hormonais devem ser testados para a obtenção de oócitos aptos para fertilização; a termografia infravermelha forneceu precisão para o monitoramento dos ovários doadores e o rim dos receptores, não evidenciando os transplantes; os animais C57BL6 SCID são mais indicados para o procedimento cirúrgico quando comparados aos BALB/c Nude e que o xenotransplante sob a cápsula renal não compromete as funções renal e hepática do animal receptor