Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Curso de Ciências Farmacêuticas, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas, 2016. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-04-18T17:17:35Z No. of bitstreams: 1 2016_AmabelFernandesCorreia.pdf: 4094341 bytes, checksum: 3f879a1d3c01e387f658ff7df2c7d634 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2016-04-19T21:34:29Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_AmabelFernandesCorreia.pdf: 4094341 bytes, checksum: 3f879a1d3c01e387f658ff7df2c7d634 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-19T21:34:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_AmabelFernandesCorreia.pdf: 4094341 bytes, checksum: 3f879a1d3c01e387f658ff7df2c7d634 (MD5) / A maioria dos casos de candidíase sistêmica era atribuído à espécie de Candida albicans. Entretanto, Candida não albicans têm sido identificadas como patógenos em infecções humanas, representando mudança de prevalência com percentual por vezes superior a Candida albicans. Esta mudança na etiologia de candidíase sistêmica, está relacionada a novos métodos diagnósticos, como a identificação das espécies, empregando técnicas moleculares, e pode refletir a alta taxa de resistência a antifúngicos de Candida não albicans. Este estudo teve o objetivo de caracterizar isolados clínicos de Candida spp. quanto aos aspectos epidemiológicos e terapêuticos e, como proposta à resistência aos antifúngicos apresentados por Candida spp., foram avaliados a atividade antifúngica de extratos de plantas do cerrado brasileiro. Foram utilizados métodos clássicos e moleculares de identificação microbiológica e teste de disco difusão segundo protocolo de referência. Os métodos de identificações microbiológicas caracterizaram 150 isolados clínicos de pacientes com suspeita de infecções sistêmicas no Distrito Federal, Brasil, entre Janeiro/2011 e Dezembro/2012. Candida albicans foi a espécie mais isolada (50,6%), seguida por Candida parapsilosis (21,3%), Candida tropicalis (16,6%), Candida glabrata (8,0%), Candida krusei (0,7%), Candida guilliermondii (0,7%), Candida intermedia (0,7%) e Kadamaea ohmeri (0,7%), que foram isoladas em amostras de lavado broncoalveolar, sangue e escarro, predominantemente em pacientes do sexo masculino com idade entre 21 e 60 anos. O teste de disco difusão foi utilizado para determinar a atividade antifúngica de agentes convencionais e extratos de plantas. Na atividade antifúngica de agentes convencionais, a maioria dos isolados clínicos de Candida foram sensíveis a anfotericina B (97,9%); 91,9% foram sensíveis a voriconazol; 91,3% a fluconazol; 73% a itraconazol e 2,7% a 5-fluorocitosina. A resistência cruzada aos azólicos foi demonstrada por isolados de C. glabrata e C. intermedia. Na avaliação da atividade antifúngica dos extratos, as seis espécies de plantas, Eugenia dysenterica, Pouteria ramiflora, Pouteria torta, Erythroxylum subrotundum, Erythroxylum daphnites e Bauhinia rufa apresentaram efeito inibitório sobre diferentes espécies de Candida, sendo Candida glabrata a espécie mais inibida. Nossos resultados apontam, que os extratos avaliados possuem fitocompostos com potenciais atividades antifúngicas contra espécies de Candida, principalmente espécies de Candida não albicans, que representam atualmente grande revelância clínica e terapêutica. _______________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Most cases of systemic candidiasis were assigned to the Candida albicans species. However, non albicans Candida have been identified as human pathogens in infections representing a change in prevalence with a percentage at times related to Candida albicans. This change in the etiology of systemic candidiasis is related to new diagnostic methods, such as identification of species using molecular techniques and may reflect on the high rate of resistance to antifungal Candida non albicans. This study´s main proposed objective is to characterize clinical isolated cases of Candida spp. to epidemiological and therapeutic aspects resisting to antifungal agents during treatment. Plant extracts of Brazilian Cerrado were used to evaluate. Microbiological identification on classic and molecular methods, and disk diffusion test were used as a protocol reference. The microbiological identification methods characterized 150 isolated clinical in patients suspected of systemic infection in the Federal District, Brazil, between January/2011 and December/2012. Candida albicans is the most commonly isolated species (50.6%), followed by Candida parapsilosis (21.3%), Candida tropicalis (16.6%), Candida glabrata (8.0%), Candida krusei (0.7%), Candida guilliermondii (0.7%), Candida intermedia (0.7%) and Kadamaea ohmeri (0.7%), which were isolated in bronchoalveolar lavage samples, blood and mucus, predominantly in male patients aged between 21 and 60 years. The disk diffusion test was used to determine the antifungal activity of conventional agents and plant extracts. In conventional antifungal agents, most isolated clinical cases of Candida were sensitive to amphotericin B (97.9%); 91.9% were susceptible to voriconazole; 91.3% to fluconazole; 73% itraconazole and 2.7% 5-fluorocytosine. The cross resistance to azoles has been demonstrated by isolated cases of C. glabrata and C. intermedia. When evaluating the antifungal activity of the extracts, the six species of plants, Eugenia dysenterica, Pouteria ramiflora, Pouteria torta, Erythroxylum subrotundum, Erythroxylum daphnites and Bauhinia rufa showed inhibitory effect on various Candida species, and Candida glabrata the most inhibited species. Our results suggest that the extracts evaluated have compounds with potential antifungal activity against Candida species, especially Candida non albicans species, representing currently important great clinical and therapeutic.

A gomesina é um peptídeo antimicrobiano catiônico, purificado dos hemócitos da aranha caranguejeira Acanthoscurria gomesiana. Possui amplo espectro de atividade contra bactérias, fungos, protozoários e células tumorais. Candida albicans é uma levedura comensal que faz parte da microbiota humana. O tratamento desta micose geralmente é feito com fluconazol, contudo casos de resistência vêm sendo reportados, com isso vários peptídeos antimicrobianos vêm sendo estudados a fim de se tornarem tratamentos alternativos. Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficácia do tratamento com a gomesina em um modelo de candidíase disseminada e vaginal. O tratamento de gomesina foi eficaz no controle do fungo. Verificou-se um efeito imunomodulatório, pois seu tratamento aumentou as concentrações de IL-6, TNF-<font face=\"symbol\">a e INF-<font face=\"symbol\">g dos rins dos animais com candidíase disseminada. A gomesina não apresentou nenhum efeito tóxico para os animais. Os dados apresentados neste estudo reforçam o potencial da gomesina para ser um agente. / The gomesin is a cationic antimicrobial peptide, purified from hemocytes of the spider Acanthoscurria gomesiana. It has a broad spectrum of activity against bacteria, fungi, protozoa and tumor cells. Candida albicans is commensal yeast that is part of the human microbiota. The treatment of this mycosis is usually done with fluconazole although cases of resistance have been reported. With the emergence of microorganisms resistance, several antimicrobial peptides have been studied in order to become alternative treatments. This study aimed to evaluate the effectiveness of treatment with gomesin in a model of disseminated and vaginal candidiasis. The treatment with gomesin showed to be effective in controlling the fungus. There was also found an immunomodulatory effect as its treatment increased concentrations of IL-6, TNF-<font face=\"symbol\">a and INF-<font face=\"symbol\">g in the kidneys of animals with disseminated candidiasis. The gomesin did not show any toxic effect to animals. The data presented in this study reinforce the potential of gomesin to be an antifungal agent.

A gomesina é um peptídeo antimicrobiano catiônico, purificado dos hemócitos da aranha caranguejeira Acanthoscurria gomesiana. Possui amplo espectro de atividade contra bactérias, fungos, protozoários e células tumorais. Candida albicans é uma levedura comensal que faz parte da microbiota humana. O tratamento desta micose geralmente é feito com fluconazol, contudo casos de resistência vêm sendo reportados, com isso vários peptídeos antimicrobianos vêm sendo estudados a fim de se tornarem tratamentos alternativos. Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficácia do tratamento com a gomesina em um modelo de candidíase disseminada e vaginal. O tratamento de gomesina foi eficaz no controle do fungo. Verificou-se um efeito imunomodulatório, pois seu tratamento aumentou as concentrações de IL-6, TNF-<font face=\"symbol\">a e INF-<font face=\"symbol\">g dos rins dos animais com candidíase disseminada. A gomesina não apresentou nenhum efeito tóxico para os animais. Os dados apresentados neste estudo reforçam o potencial da gomesina para ser um agente. / The gomesin is a cationic antimicrobial peptide, purified from hemocytes of the spider Acanthoscurria gomesiana. It has a broad spectrum of activity against bacteria, fungi, protozoa and tumor cells. Candida albicans is commensal yeast that is part of the human microbiota. The treatment of this mycosis is usually done with fluconazole although cases of resistance have been reported. With the emergence of microorganisms resistance, several antimicrobial peptides have been studied in order to become alternative treatments. This study aimed to evaluate the effectiveness of treatment with gomesin in a model of disseminated and vaginal candidiasis. The treatment with gomesin showed to be effective in controlling the fungus. There was also found an immunomodulatory effect as its treatment increased concentrations of IL-6, TNF-<font face=\"symbol\">a and INF-<font face=\"symbol\">g in the kidneys of animals with disseminated candidiasis. The gomesin did not show any toxic effect to animals. The data presented in this study reinforce the potential of gomesin to be an antifungal agent.