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Toxicidade e criopreservação do sêmen de Astyanax altiparanae, utilizando dimetilsufóxido e metilglicol como crioprotetores /Leite, Laicia Carneiro January 2019 (has links)
Orientador: Alexandre Ninhaus Silveira / Resumo: A criopreservação é uma tecnologia empregada para preservação de células, tecidos e embriões em baixas temperaturas. Para o desenvolvimento de tal tecnologia para a preservação seminal, é necessário o conhecimento sobre as características seminais da espécie que se pretende trabalhar, o estabelecimento de soluções diluentes que protegerão as células espermáticas e, dos respectivos protocolos de resfriamento, congelamento e descongelamento do sêmen criopreservado. As soluções crioproteroras devem ser atóxicas às células espermáticas, mantendo as características do fluido seminal. Assim, este trabalho teve por objetivos além de conhecer as características seminais do sêmen de Astyanax altiparanae, desenvolver um protocolo eficiente para a criopreservação seminal da espécie e sua utilização posterior. Para isso, exemplares adultos e maduros de A. altiparanae foram induzidos hormonalmente à reprodução com Ovopel®, sendo o sêmen coletado após 226 horas-grau em com auxílio de micropipetas. Deste foram avaliadas as características seminais como, osmolalidade, concentração espermática, motilidade espermática subjetiva e motilidade objetiva e vários outros aspectos de cinética dos espermatozoides pelo uso do CASA (Integrated Semen Analysis System). Foram avaliadas dez soluções crioprotetoras compostas por três bases diluentes A (5% de glicose + 10% gema de ovo), B (Bestville Thawing Solution (BTS®) a 5%) e C (5% de glicose), combinadas com um crioprotetor interno dimetilsulfóxido ou m... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Cryopreservation is a technology used to preserve cells, tissues and embryos at low temperatures. For the development of such seminal preservation technology, it is necessary to know the seminal characteristics of the species to be worked on, the establishment of diluent solutions that will protect the sperm cells, and the respective protocols of cooling, freezing and thawing of the cryopreserved semen. Cryoprotective solutions should be non-toxic to sperm cells, while maintaining seminal fluid characteristics. Thus, this work had as objectives besides knowing the seminal characteristics of Astyanax altiparanae, to develop an efficient protocol for the seminal cryopreservation of the species for its later use. For this, adult and mature A. altiparanae specimens were hormonally induced to Ovopel® reproduction, and the semen was collected after 226 hours-degree with the help of micropipettes. Seminal characteristics such as osmolality, sperm concentration, subjective sperm motility and objective motility, and several other aspects of sperm kinetics were evaluated using CASA (Integrated Semen Analysis System). Ten cryoprotectant solutions composed of three diluent bases A (5% glucose + 10% egg yolk), B Bestville Thawing Solution (BTS®) 5% and C (5% glucose), combined with a cryoprotectant internal dimethylsulfoxide or methylglycol, in concentrations of 10% and 15%. The efficiency of these solutions was evaluated by the analysis of the computerized sperm motility. For cryopreserv... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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