Submitted by PAULO HENRIQUE LEAL BERTOLO null (henrique_medvet@yahoo.com.br) on 2017-04-13T18:33:10Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Paulo_Henrique_leal_Bertolo.pdf: 1792617 bytes, checksum: 2f57fae9d383e993afd0d14baabfbac8 (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-04-17T13:09:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 bertolo_phl_me_jabo.pdf: 1792617 bytes, checksum: 2f57fae9d383e993afd0d14baabfbac8 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-17T13:09:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 bertolo_phl_me_jabo.pdf: 1792617 bytes, checksum: 2f57fae9d383e993afd0d14baabfbac8 (MD5) Previous issue date: 2017-02-20 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A onicogrifose é um dos principais achados clínicos em cães com Leishmaniose Visceral (LV), porém são escassas as pesquisas com enfoque na região ungueal de cães infectados. O objetivo do presente estudo foi avaliar a região ungueal de cães com LV que apresentaram ou não onicogrifose, por meio das análises histopatológica e imuno-histoquímica. O terceiro dígito dos membros torácico e pélvico foi colhido de 16 cães naturalmente infectados com Leishmania infantum, sem predileção por sexo, raça ou idade. Os animais foram divididos em dois grupos, cães com onicogrifose (GO; n=7) e sem onicogrifose (GSO; n=9). Os dígitos foram avaliados em quatro regiões (epiderme/derme dorsal, epiderme/derme ventral, matriz ungueal dorsal e matriz ungueal ventral). Todas as lesões observadas (infiltrado inflamatório mononuclear, degeneração vacuolar dos queratinócitos basais, separação dermo-epidérmica e incontinência pigmentar) estavam presentes em ambos os grupos, porém em maior intensidade nos dígitos de cães com onicrogrifose. A imunomarcação das formas amastigotas de Leishmania infantum foi observada nas diferentes áreas do dígito. Observou-se diferença estatística entre as áreas de epiderme/derme dorsal com a matriz dorsal e com a matriz ventral nos dígitos do membro pélvico e, entre a epiderme/derme dorsal com a matriz dorsal no membro torácico do grupo GO. Conclui-se que a principal alteração histopatológica da região ungueal de cães com LV é o infiltrado inflamatório mononuclear independente da presença de onicogrifose. Estes animais apresentaram a presença do parasita na região responsável pelo crescimento da unha. Esta onicopatia parece estar associada à presença do parasita e ao microambiente inflamatório local. / Onychogryphosis is among the main clinical findings in dogs with Visceral Leishmaniasis (VL). However, there are few researches focusing on the claw region of infected dogs. This aim of this study was to evaluate claw region of dogs with symptomatic CanL with and without onychogryphosis, through histopathological and immunohistochemical analyzes. The third digit of the right thoracic and pelvic limbs was collected from 16 dogs with CanL, without for sex, breed or age predilection. The dogs were divided into two groups, dogs with (GO; n = 7) and without onychogryphosis (GSO; n = 9). The digits were evaluated in four regions (dorsal epidermis / dermis, dorsal matrix / dermis, ventral matrix / dermis, ventral epidermis / dermis). All the lesions observed (mononuclear inflammatory infiltrate, basal keratinocyte vacuolation, dermoepidermal clefting and pigmentary incontinence) were presente in both groups, but more strongly in the digits of dogs with onychogryphosis. Immunohistochemistry revealed numerous amastigotes in the different areas of the digit. Statistical difference was observed between dorsal epidermis / dermis areas with dorsal matrix / dermis and ventral matrix / dermis in the digits of the pelvic limb, and between dorsal epidermis / dermis áreas with dorsal matrix / dermis of the thoracic limb in dogs with onychogryphosis. In conclusion, main histopathological alteration of the claw region of dogs with CanL was mononuclear inflammatory infiltrate in the dorsal epidermis / dermis area independently of onychogryphosis. The dogs presented high parasitic load in the region responsible for the growth of the nail. This onycopathy does not appear to be associated only with presence of the parasite, but also with local inflammatory microenvironment, which possibly contributes to onychogryphosis by release of inflammatory mediators at the site.

Submitted by Luanna Matias (lua_matias@yahoo.com.br) on 2015-03-30T11:13:52Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Antônio Dionísio Feitosa Noronha Filho - 2013.pdf: 1195605 bytes, checksum: 6407e61f5c39652f43701aff78788bfd (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luanna Matias (lua_matias@yahoo.com.br) on 2015-03-30T12:42:48Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Antônio Dionísio Feitosa Noronha Filho - 2013.pdf: 1195605 bytes, checksum: 6407e61f5c39652f43701aff78788bfd (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-30T12:42:48Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Antônio Dionísio Feitosa Noronha Filho - 2013.pdf: 1195605 bytes, checksum: 6407e61f5c39652f43701aff78788bfd (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2013-03-15 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Digital diseases worries livestock industry and arouse interest in extensionists because of the economic losses and difficult control. Losses come from decrease in productive and reproductive performance and, in some cases, the premature culling of high value breeding animals. Besides these, lameness causes negative impact on animal welfare. Digital diseases assume different characteristics in distinct production systems, requiring specific solutions that fits each farms condition. Innovative treatments have been discussed, but are not always economically viable, however, in last years in Veterinary Medicine has increased the interest on the possibility of applying cell therapy in the treatment of diseases related to the locomotor systems, including digital diseases. In the equine, it has been studied its use in the repair of tendineous, articular and osseous lesions, and the perspective of application in other important diseases like laminitis. Considering the importance of digital diseases, especially laminitis, for cattle, cell therapy can represent an additional option for treatment. This study evaluated the development of digital lesions in cattle intensively managed and its response to the treatment with bone marrow mononuclear cells. Were used 15 animals, male, cross-bred (Bos taurus X Bos indicus), healthy, aging about 12 months and with average weight of151,6 ± 24,65 kg, divided in two groups (GT, n=7, GC, n=8). The study was developed in three stages divided in evaluation moments. On first stage, on second month of confinement, after adjustment of management over concrete floor and feeding of corn silage and concentrate, hooves were trimmed and started evaluation of digital disease wich extended to the tenth month. At this time, were observed digital lesions that developed in the period, their influence over behavior and was conducted radiographic examinations trying to establish relationship between external and internal lesions of digits. After ten months of study all animals had its hooves trimmed and all digital lesions, in decorrence of management, were surgically treated. At this time, started last stage in wich animals received cell therapy. To obtain material needed for the protocol, were harvested samples of bone marrow from animals belonging to treatment group (GT). After this, mononuclear cells were isolated and samples were injected at jugular vein. In the protocol for bone marrow harvest and isolation of mononuclear cells was used Ficoll-Paque. On animals from control group (GC), their lesions were treated during hoof trimming, but all anials were evaluated at twelfth month. To certify the effect of cell therapy, besides clinical examination, identification of possible recidivance or new lesions, were done histological examination for occurrence of hyperemia, hemorrhages or edema on dermis, presence of white blood cells inside or outside vessels and necrosis of basal cells from epidermis, and radiographic examination. On direct inspection were observed expressive occurrence of digital lesions like heel horn erosion, haematoma and erosions of sole and white line disease, however with no difference between groups. Major changes in behavior observed along time were decrease in eating time and increase in times lying down and in leisure. Radiographic evaluation didn´t show signs of distal phalanx rotation suggesting external alterations may not be related to internal alterations. Protocols for bone marrow aspiration and for cell isolation using Ficoll-Paque were effective, resulting in obtainance of mononuclear cells with satisfatory viability. But, since it wasn´t observed significative differences between groups related to digital lesions, histological and radiographical examinations, the reoccurrence and appearance of new lesions after cell therapy cannot be related to this treatment, because seem to be more related to management conditions. It can be concluded that applying of bone marrow derived mononuclear cells at jugular vein didn´t show benefits as auxiliary treatment of digital lesions in cattle. The control of risk factors and site of cell application seem to explain the apparent failure of the therapeutic protocol used. / As doenças digitais causam preocupação ao setor produtivo e despertam grande interesse nos técnicos ligados à bovinocultura em função do impacto econômico e do difícil controle. Os prejuízos decorrem de queda no desempenho produtivo, reprodutivo, tratamento oneroso e em alguns casos descarte prematuro de animais de alto mérito genético. Além disso, ameaçam seriamente o bem estar animal. Essas doenças assumem características distintas nos diversos sistemas de produção, o que em alguns casos demandam soluções específicas e tratamentos que atendam a realidade do criatório. Tratamentos inovadores têm sido discutidos, mas nem sempre são viáveis economicamente. Contudo, nos últimos anos, na Medicina Veterinária cresce o interesse na possibilidade de se empregar a terapia celular, que poderia ser aplicada como auxiliar no tratamento de várias enfermidades do aparelho locomotor, incluindo as enfermidades digitais. Em equinos, já se tem investigado seu emprego no reparo de lesões tendíneas, articulares e ósseas, havendo ainda a perspectiva de aplicação em outras doenças importantes como a laminite. Portanto, considerando a importância que as doenças digitais, em especial a laminite, assumem na espécie bovina, a terapia celular pode representar uma ferramenta adicional no tratamento. Esta pesquisa objetivou avaliar o desenvolvimento de lesões digitais em bovinos manejados intensivamente e sua resposta ao tratamento com células mononucleares da medula óssea. Foram empregados 15 bovinos machos, mestiços (Bos taurus X Bos indicus), hígidos com idade inicial aproximada de 12 meses e peso corporal médio de 151,6 ± 24,65 kg, alocados em dois grupos (Grupo tratamento, GT, n=7; Grupo controle, GC, n=8). O estudo foi desenvolvido em três etapas divididos em momentos de avaliação. Na primeira etapa, no 2o mês de confinamento após ajustar o manejo em piso de concreto e a alimentação a base de silagem de milho e concentrado, realizou-se ajuste nas medidas digitais dos animais e iniciou-se o acompanhamento para avaliar a ocorrência de doenças digitais, que se estendeu até o décimo mês. Nesse período, foram realizadas avaliações para diagnosticar as enfermidades que eventualmente surgissem. Estudou-se a influência delas sobre o comportamento diário dos bovinos e procedeu-se a análise macroscópica das lesões digitais e a avaliação radiográfica para se tentar estabelecer uma relação entre as lesões externas e internas dos dígitos. Após dez meses de confinamento, todos os animais tiveram as medidas digitais novamente ajustadas e as enfermidades digitais que surgiram na etapa anterior, em decorrência do manejo, foram tratadas cirurgicamente. Nesse momento iniciou-se a ultima etapa na qual os animais receberam a terapia celular. Para se obter o material necessário que o protocolo exigia colheu-se medula óssea dos bovinos pertencentes ao grupo tratamento (GT), na sequência, as células mononucleares foram isoladas e uma amostra destas foram aplicadas pela veia jugular em cada animal. No protocolo de colheita da medula óssea e isolamento celular empregou-se o Ficoll-Paque®. O grupo controle (GC) foi apenas submetido ao tratamento das lesões e tiveram as medidas dos cascos ajustadas, mas os bovinos de ambos os grupos foram reavaliados ao final do 12o mês do estudo. Para certificar o efeito da terapia celular, além do exame clínico, identificação de possível recrudescimento ou surgimento de novas lesões, realizou-se exame radiográfico, avaliação histológica da região coronária para avaliar presença de hiperemia, hemorragia ou edema da derme, presença de células brancas dentro ou fora dos vasos e necrose de células basais da epiderme. Na avaliação macroscópica foi observada ocorrência expressiva de lesões digitais como erosão de talão, hematoma e erosão de sola e lesão de linha branca, porém, sem diferenças entre grupos. As principais alterações de comportamento observadas ao longo das avaliações foram a redução no tempo de alimentação e aumento nos tempos em ócio e em decúbito, mas, sem diferenças entre grupos tratamento e controle. A avaliação radiográfica não mostrou ter ocorrido a rotação da falange distal indicando que as lesões externas podem não ter relação com as alterações internas. Os resultados obtidos indicam que o protocolo de aspiração de medula óssea e de isolamento celular usando Ficoll-Paque® foi eficaz, resultando na obtenção de células mononucleares com rendimento e viabilidade satisfatórios. Mas, como não foram observadas diferenças significativas entre grupos, tanto com relação as enfermidades como em relação aos resultados histológicos e radiográficos as recidivas ou o aparecimento de novas lesões após a terapia celular não podem ser imputadas a esse tratamento, pois parecem ter relação com o manejo. Conclui-se que a aplicação de células mononucleares da medula óssea pela veia jugular não apresentou benefícios no tratamento auxiliar de lesões digitais em bovinos, sendo que aspectos relacionados ao controle dos fatores de risco e local de aplicação das células parecem explicar a aparente falta de sucesso do protocolo terapêutico empregado.