Made available in DSpace on 2017-07-10T17:37:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Camila Peiter Beninca.pdf: 379262 bytes, checksum: 2683f759673a0f79789d731e9e40a850 (MD5) Previous issue date: 2007-05-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The induced resistance is an alternative for control of plant diseases, because the incorrect use of chemical products have been caused several problems to the environment. With the induced resistance, plants can produce secondary compounds, as the phytoalexins with antimicrobial activity. Additionally, peroxidases can be activated, causing cell walls reinforcement, through the formation of lignin that blocking the attack of pathogens. The resistance induced can be carried through by several substances, as secondary compounds produced by fungus, as the Basidiomycota Pycnoporus sanguineus. This work aimed to verify the phytoalexins induced and the peroxidases activity in sorghum and soybean treated with P. sanguineus basidiocarp extracts. With this purpose, the dichloromethanic, hexanic and ethanolic extracts, in concentrations of 100, 250, 500 and 750 mg L-1 were used for phytoalexins production and peroxidases activity in soybean cotyledons and sorghum etiolated mesocotyls. The acybenzolar-S-metil (ASM) (100 mg L-1 of active ingredient) and distilled water + Tween 20 (0.5%) were used as positive and negative patterns, respectively. For the phytoalexins assay in sorghum mesocotyls, the hexanic extract in concentration of 750 mg L-1 provided the highest induction in comparison to the control with water, however without differences to ASM. For the phytoalexins assay in the soybean cotyledons, the P. sanguineus extracts not induced activity significantly different of the positive and negative patterns, but also causing a suppression of the glyceollin synthesis for the dichloromethanic extract. In relation to the peroxidases activity, the dichloromethanic extracts for sorghum and soybean and ethanolic for soybean had inhibited the enzymatic activity. The induction verified for the hexanic extract in sorghum was not different from ASM control. The specific activity of peroxidase in soybean was inhibited by the ethanolic extract and it was induced by the hexanic, but with no differences of the treatment with ASM. These results indicate the weak potential of these extracts for the resistance induction in sorghum and soybean / A indução de resistência em plantas ganhou destaque como alternativa no controle de doenças em decorrência dos problemas do uso indevido de produtos químicos. Através desta técnica, algumas plantas respondem com a produção de compostos secundários, como as fitoalexinas, que são substâncias capazes de impedir a atividade de agentes causadores de doenças. Além destas, há a ativação de peroxidases que contribuem no fortalecimento das paredes celulares, pela formação de lignina em resposta ao ataque de patógenos, bloqueando a entrada do agente causador da doença. A indução de resistência pode ser realizada por diversas substâncias, como os compostos secundários presentes nos fungos, tendo como exemplo o Basidiomycota Pycnoporus sanguineus. Este trabalho teve como objetivo avaliar a indução de fitoalexinas e a atividade de peroxidases em sorgo e soja tratados com extratos de basidiocarpos de P. sanguineus. Com essa finalidade, os extratos diclorometânico, hexânico e etanólico nas concentrações de 100, 250, 500 e 750 mg L-1 foram testados em relação à produção de fitoalexinas e atividade de peroxidases em cotilédones de soja e mesocótilos estiolados de sorgo. Acibenzolar-S-metil (ASM) (100 mg L-1 i.a.) e água destilada + Tween 20 (0,5%) foram utilizados como tratamentos controle positivo e negativo, respectivamente. Para o ensaio de fitoalexinas em mesocótilos de sorgo, o extrato hexânico na concentração de 750 mg L-1 proporcionou a maior indução, sendo estatisticamente superior à testemunha negativa, porém sem diferir significativamente do ASM. Para fitoalexinas em cotilédones de soja, os extratos de P. sanguineus não induziram atividade significativamente diferente dos tratamentos controles positivo e negativo, havendo inclusive uma tendência de supressão da síntese de gliceolina pelo extrato diclorometânico. Em relação à atividade de peroxidases, os extratos diclorometânico para sorgo e soja e etanólico para soja inibiram a atividade enzimática. A atividade específica de peroxidase em soja foi inibida pelo extrato etanólico e induzida pelo hexânico, mas sem diferença do tratamento com ASM. Esses resultados indicam o pequeno potencial destes extratos para a indução de resistência em sorgo e soja

Made available in DSpace on 2017-07-10T17:37:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cristiane_Claudia_Meinerz.pdf: 977726 bytes, checksum: 47602589d307d4398cc6061bcd0d1eeb (MD5) Previous issue date: 2010-02-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Induction of resistance involves the activation of plant defense mechanisms in response to treatment with biotic or abiotic elicitors. The application of plant extracts in order to induce resistance mechanisms is an interesting alternative to chemical control, however, besides the presence of inducers, can occur the presence of suppressors. This study aimed to partially purificate through gel filtration chromatography (GFC) and precipitation with ammonium sulfate (SA), compounds present in decoct of Adiantum capillus-veneris, capable to induce defense mechanisms in sorghum mesocotyls, including phytoalexins and peroxidase, polyphenoloxidase (PPO), phenylalanine ammonia-lyase (PAL) and chitinase. The decoct 1% was fractionated with concentrations of ammonium sulfate, 0-20%, 20-40%, 40-60%, 60-80% and 80-100% of SA and those fractions were subjected to GFC. We obtained nine protein peaks and one glucosic peak for decoct with molecular weights ranging from 0.61 to 0.01 KDa; to fraction 0-20% were obtained two protein and two glucosic peaks, with molecular weights lower than 0.01 KDa, and concentration of sugars ranging from 4.1 to 17.5 mg mL-1; to fraction 20-40% were obtained three protein peaks (0.98 to 111.5 KDa) and five glucosic peaks (11.3 to 73.7 mg mL-1); to fraction 40-60% were obtained two protein peaks (0.09 to 111.5 KDa) and two glucosic peaks (5.6 to 7.5 mg mL-1); to fraction 60-80% were obtained six protein peaks (lower than 0.02 KDa) and two glucosic peaks (16.5 to 51.3 mg mL-1); and to fraction 80-100% were obtained three protein peaks (lower than 0.09 KDa). Sorghum mesocotyl were treated with fractions from the GFC, and decoct, acibenzolar-S-methyl (ASM) (125 mg L-1 of a. i. as elicitor of reference) and sodium phosphate buffer 10 mM pH 6.0. After incubation of 96 h were measured the levels of phytoalexins in mesocotyls and the activity of defense-related enzymes in leaves. Treatment with peak II (0,09 KDa) induced phytoalexin 6.68% more than. Among the fractionn, 60-80% increased 76% compared to ASM. To peroxidase the peak IV (lower than 0,01 KDa) increased 21% the activity compared to control water, and 44% compared to ASM. For the fraction 0-20% the protein peak II (lower than 0,01 KDa) increased 39% the activity in relation to the fraction 0-20% and 19% in relation to decoct. The fraction, 80-100% increased 89% compared to, ASM. For the PPO the peak VI (lower than 0,01 KDa) from decoct decreased 88% the activity compared to ASM. For PAL the peak II (lower than 0,01 KDa) from fraction 0-20% was 91% higher than decoct. For chitinase 1% peak IV (lower than 0,01 KDa) from decoct was 68% higher than the ASM. It was possible to induce defense mechanisms in sorghum by the application of partially purified fractions from A. capillus-veneris, which can allow to obtain new molecules and development alternative methods to control plant diseases / A indução de resistência envolve a ativação de mecanismos de defesa latentes existentes nas plantas em resposta ao tratamento com agentes bióticos ou abióticos. A aplicação de extratos vegetais visando à indução de mecanismos de resistência é uma alternativa interessante ao controle químico, entretanto, nestes extratos pode ocorrer além da presença de indutores, a presença de supressores. Este trabalho teve por objetivo a purificação parcial, por meio de cromatografia de filtração em gel (CFG) e precipitação com sulfato de amônio (SA), de compostos presentes em decocto de avenca (Adiantum capillus-veneris), eficientes na indução de mecanismos de defesa em mesocótilos de sorgo, incluindo as fitoalexina deoxiantocianidinas e as proteínas peroxidase, polifenoloxidase, fenilalanina amônia-liase e quitinase, buscando selecionar frações potencialmente eficientes na indução de resistência em plantas. Decocto (EA 1%) de A. capillus-veneris foi fracionado com concentrações de sulfato de amônio de 0-20%, 20-40%, 40-60%, 60-80% e 80-100% e esses cortes foram submetidos à cromatografia de filtração em gel (CFG). Foram obtidos nove picos protéicos e um pico glicídico para EA 1% com massas moleculares variando de 0,61 à 0,01 KDa; no corte 0-20% foram obtidos dois picos protéicos e dois glicídicos, com massas moleculares menores que 0,01 KDa, e concentração de açúcares redutores variando de 4,1 a 17,5 µg mL-1; no corte 20-40% três picos protéicos (111,5 à 0,98 KDa) e cinco glicídicos (11,3 a 73,7 µg mL-1 de açúcares); no corte 40-60% dois picos protéicos (111,5 à 0,09 KDa) e dois glicídicos (5,6 a 7,5 µg mL-1); no corte 60-80% seis picos protéicos (menor que 0,02 KDa) e dois glicídicos (16,5 a 51,3 µg mL-1); e no corte 80-100% três picos protéicos (menor que 0,09 KDa). Mesocótilos de sorgo foram tratados com as frações provenientes da CFG, além do decocto a 1%, acibenzolar-S-metil (ASM) (125 mg. L-1 do i.a. como elicitor de referência) e tampão fosfato de sódio 10 mM pH 6,0, totalizando 42 tratamentos. Após incubação por um período de 96 h, avaliou-se dos teores de fitoalexinas nos mesocótilos e análises bioquímicas dos folíolos. O tratamento pico II (0,09 KDa) do EA 1% mostrou-se eficiente na indução de fitoalexinas, sendo superior em 6,68% ao ASM. Entre os cortes, 60-80% permitiu incremento de 76% em relação ao ASM. Para peroxidase o pico IV (menor que 0,01 KDa) do EA 1% incrementou 21% a atividade em relação a testemunha água e 44% ao ASM. Para os precipitados 0-20% o pico protéico II (menor que 0,01 KDa) promoveu incremento de 39% na atividade em relação ao corte 0-20% e 19% para o EA 1%. O precipitado 80-100% foi superior 89% ao ASM. Para polifenoloxidase o pico protéico VI (menor que 0,01 KDa) do EA1% reduziu 88% a atividade em relação ao ASM. Para fenilalanina amônia-liase o pico protéico II (menor que 0,01 KDa) do corte 0-20% foi 91% superior ao EA 1%. Para quitinase o pico protéico IV (menor que 0,01 KDa) do EA 1% foi 68% superior ao ASM. Foi possível induzir mecanismos de defesa em sorgo pela aplicação de frações parcialmente purificadas de A. capillus-veneris, o que pode permitir a obtenção de novas moléculas e o desenvolvimento de métodos alternativos para controle de doenças em plantas