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Évaluation de l'adhésion et de la différenciation endothéliale de cellules souches mésenchymateuses issues de la gelée de Wharton du cordon ombilical humain sur des supports fonctionnalisés du type chitosane/hyaluronane / Evaluation of adhesion and endothelial differentiation of WJ-MSCs on functionalized scaffolds of chitosane/hyaluronane

Harmouch, Chaza 29 January 2014 (has links)
Récemment, l'utilisation de la technique d'assemblage couche par couche de polyélectrolytes naturels a été suggérée comme une nouvelle procédure de modification de surface. Le but de notre travail était de développer des films à base de CHI et de HA fonctionnalisés et réticulés. La biocompatibilité a été évaluée par MEB et visualisation des filaments d'actine. La différenciation endothéliale des CSMs a été suivie par Western Blot. Ensuite, la fonctionnalité des cellules a été évaluée par immunofluorescence du vWF et marquage au Dil-Ac-LDL. Le MEB a montré une morphologie fibroblastique des cellules sur CHI/HA et CHI-SH/HA-Thio. L'analyse par WB des cellules différenciées a montré une augmentation de l'expression de CD31, VEGF-R2 et VE-cadhérine sur CHI-SH/HA-Thio et CHI/HA. Les films CHI-SH/HA-Thio étaient biocompatibles et promouvaient le potentiel de différenciation endothéliale / Recently, the use L-b-L assembly of natural polyelectrolytes has been suggested as a new technique of surface modification. The aim of our work was to develop multilayered films based on CHI and HA polymers bearing chemical. WJ-MSCs were seeded on these substrates. Biocompatibility was assessed by SEM and actin visualization. WJ-MSCs differentiation into endothelial phenotype was followed by western blot. First of all, SEM showed a fibroblastic morphology of adherent cells on CHI/HA and CHI-SH/HA-Thio as for control. WB analysis showed a rise of CD31, VEGF-R2 and VE-cadherin expression on CHI-SH/HA-Thio and CHI/HA. Films CHI-SH/HA-Thio were biocompatible and promoted endothelial differentiation potential
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Caractérisation d'ENDO1, une nouvelle protéine contenant un domaine PHD et un régulateur potentiel de la différenciation endothéliale

Pelland, Julie 06 1900 (has links)
Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal. / Chez les mammifères, rétablissement de la circulation est critique pour la formation des différents organes et la programmation du développement embryonnaire. Ceci implique la formation du cœur et des vaisseaux et la différenciation des cellules hématopoïétiques. Malgré leur importance pour la formation des vaisseaux, les mécanismes cellulaires et moléculaires qui régulent la différenciation et la fonction des cellules endothéliales demeurent peu compris. L'identification de facteurs de transcription impliqués dans la régulation du programme génétique et ou de la différenciation endothéliale pourrait aider à élucider les diverse étapes du développement vasculaire. Au cours de cette étude, nous avons cherché à identifier de nouveaux gènes, potentiellement des facteurs de transcription qui seraient régulés durant les étapes précoces de la différenciation endothéliale. A cette fin, nous avons utilisé un modèle in vitro de différenciation endothéliale pour isoler des gènes dont l'expression est induite tôt durant ce processus. Ceci a permis le clonage et la caractérisation d'un nouveau gène qui code pour END01, une nouvelle protéine à domaine PHD finger régulée durant la différenciation précoce des cellules endothéliales. END01 est une protéine de 26.6 kd exprimée dans le cytoplasme et dans les corps nucléaires. Les analyses fonctionnelles indiquent qu'ENDOl est un activateur transcriptionel d'au moins un promoteur endothélial, l'endothélinel. L'expression d'ENDOl dans les cellules endothéliales des vaisseaux, dans l'endocarde, dans les cellules sanguines, dans différentes lignées hématopoïétiques et dans le foie fetal suggère un rôle d'ENDOl au cours du développement des cellules endothéliales et hématopoïétiques. L'expression d'ENDOl dans ces deux types cellulaires suggère qu'il s'agit d'un marqueur des hémangioblastes précurseurs communs des cellules endothéliales et hématopoïétiques. L'analyse de ce marqueur aidera à mieux comprendre le développement et la différenciation endothéliale dans le contexte du développement vasculaire normal et de l'angiogénèse.

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