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Avaliação in vitro da atividade antibacteriana de extratos de Byrsonima ssp E Alchornea ssp: estudo comparativo entre as técnicas de diluição em tubos e microplacas /Moraes, Helen Pimenta de. January 2006 (has links)
Orientador: Taís Maria Bauab / Banca: Sérgio Aparecido Torres / Banca: Daisy Nakamura Sato / Resumo: O Brasil apresenta uma grande diversidade de plantas medicinais, cuja utilização pela população vem aumentando cada vez mais. Byrsonima (Malpighiaceae) e Alchornea (Euphorbiaceae) que são plantas do Bioma-Cerrado do estado de São Paulo apresentam compostos com grande potencial de atividade biológica, sendo entretanto, pouco estudadas. A atividade antimicrobiana é uma etapa de extrema importância na caracterização biológica de produtos naturais com potencial farmacológico. Nossos objetivos foram investigar a atividade antibacteriana de extratos metanólicos e clorofórmicos de Byrsonima spp. e Alchornea spp empregando as técnicas de diluição em tubos e em microplacas com leitura espectrofotométrica e visual utilizando resazurina como revelador. Foram utilizadas as bactérias: Escherechia coli, Staphylococcus aureus, Yersinia enterocolitica e Aeromonas hydrophila. Nos ensaios em microplacas e em tubos foi determinada a concentração inibitória mínima (CIM) dos extratos vegetais testados à concentração de 1000æg/mL a 31,25æg/mL. Objetivou-se também comparar a eficácia das metodologias empregadas. Nosso estudo demonstrou maior atividade antibacteriana dos extratos metanólicos tanto de Byrsonima quanto de Alchornea, ressaltando os dados obtidos com B. crassa (MeOH) e B. basiloba (MeOH) que apresentaram acentuada atividade antibacteriana frente aos diferentes microrganismos testados. As metodologias empregadas foram eficazes para essa finalidade sendo as de diluição em microplacas mais vantajosas, pelo emprego de pequenos volumes principalmente os de extratos vegetais que são obtidos em pequenas quantidades. Dentre os dois métodos de microdiluição, a que empregava leitura espectrofotométrica apresentou-se mais sensível, porém a de leitura visual mostrou-se mais prática na leitura final e na interpretação dos resultados. / Abstract: Brazil presents a great diversity of medicinal plants, whose use by people increases more and more. Byrsonima (Malpighiaceae) and Alchornea (Euphorbiaceae) are plants of Bioma-Cerrado of the state of São Paulo and present composites with great potential of biological activity, but, however, they are little studied. The antimicrobial activity is a stage of extreme importance in the biological characterization of natural products with pharmacological potential. Our objectives were to investigate the antibacterial activity of methanolic and chlorophormic extracts of Byrsonima spp and Alchornea spp using the techniques of dilution in tubes and in microplates with spectrophotometric and visual readings using resazurin. Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Yersinia enterocolitica and Aeromonas hydrophila were tested. In the microplate and tubes assays, the minimum innhibitory concentration (MIC) of plant extracts were tested in concentrations between 1000æg/mL and 31.25æg/mL. It was also compared the effectiveness of the methodologies employed. Our study demonstrated greater antibacterial activity of methanolic extracts of both Byrsonima and Alchornea, standing out the data obtained for B. crassa (MeOH) and B. basiloba (MeOH), which presented accented antibacterial activity against the different tested microrganisms. The methodologies employed were efficient for this purpose and the microplate dilution assay is more advantageous, for the fact it uses smaller volumes, mainly for those vegetal extracts that normally are obtained in small amounts. Amongst the two methods of microdilution, the one that used spectrophotometric reading proved to be more sensitive, however, the visual reading procedure was shown to be more practical in the final reading and interpretation of the results. / Mestre
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Fertilização artificial de ovócitos de curimbatá, Prochilodus lineatus /Souza, Bruno Estevão de. January 2007 (has links)
Orientador: Elizabeth Romagosa / Banca: Antonio Fernando Gervásio Lenardo / Banca: Newton Castagnolli / Resumo: A motilidade espermática é um fator chave para a determinação da qualidade do sêmen e sua capacidade de fertilização. Vários fatores influenciam a motilidade espermática como: espécie estudada, qualidade dos gametas, tipo, volume, temperatura e pH da solução ativadora. Assim sendo, o presente trabalho objetivou avaliar o efeito que a temperatura da solução ativadora e, a relação volume de sêmen:água exercem sob a duração da motilidade espermática. Foram utilizados 12 machos de curimbatá, Prochilodus lineatus com peso e comprimento padrão médio de 405,83 ± 134,20 g, 25,63 ± 3,19cm, respectivamente. Os reprodutores receberam duas doses de extrato de hipófise de carpa (dose inicial de 0,5 mg.kg-1 e final de 5,0 mg.kg-1). Do sêmen dos 12 machos foi realizado um "pool" e, analisada a concentração e o índice de sobrevivência espermática, bem como, a duração da motilidade espermática. Para o primeiro ensaio foi utilizado um delineamento experimental inteiramente casualizado e os tratamentos foram compostos pelos volumes de sêmen provenientes do "pool" e a água nas proporções de: 1:1, 1:2, 1:20, 1:200, 1:2000, 1:20000 e 1:100000SL, respectivamente. O segundo ensaio utilizou um delineamento experimental inteiramente casualizado os tratamentos foram constituídos por alíquotas de 5μL do "pool" de sêmen e, adicionadas a 200μL de solução ativadora nas seguintes temperaturas: 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45 e 50°C. A duração da motilidade espermática do curimbatá, P. lineatus teve um comportamento linear ascendente em função do aumento da diluição a partir de 1:2SL sêmen:água (23,04s), até atingir o valor máximo estudado que foi de 1:100.000SL sêmen:água, com a duração da motilidade espermática de 28,83s Os melhores resultados de duração da motilidade espermática em função da temperatura da solução ativadora foram obtidos ...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Sperm motility is a key element to qualify semen and its fertilization capacity. Several factors act on sperm motility such as studied species, gametes quality, kind, volume, temperature and pH of activation swimming solution. That way, this study had as a goal evaluate the efect that the temperature of active solution and semen:water volume roll exert on the sperm motility duration. Twelve male curimbatás, Prochilodus lineatus with average weight and medium standard length of 405,83 ± 134,20 g, 25,63 ± 3,19cm, respectively were used. Reproducers got two doses of pituitary extract from carp (initial dose of 0,5 mg.kg-1 and final of 5,0 mg.kg- 1). Whit the semen of those 12 male animals was made a pool and analysed its concentration and spermatic survival index and also sperm motility duration. For the first analysis it was utilized an experimental design entirely randomized and treatments were compound by semen volume deriving from that pool and the water on the proportion of 1:1, 1:2, 1:20, 1:200, 1:2000, 1:20000 e 1:100000SL, respectively. The second analysis utilized an experimental delineation entirely randomized, treatment were composed by 5μL from the pool of the semen and added to a 200μL active solution on the following temperatures: 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45 e 50°C. Sperm motility duration of "curimbatá", P. lineatus had an ascendent linear behavior in function of dilution increasing from 1:2SL semen:water (23,04s), until it gets the maximum studied value that was 1:100.000SL semen:water with the sperm motility duration of 28,83s. Best results of sperm motility duration in function of active solution temperature were gotten in temperature of 20°C wich provided a medium duration of motility of 22,51 ± 0,79 seconds. / Mestre
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