Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-11-29T13:20:47Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Rogério de O. Neves.pdf: 1385774 bytes, checksum: ffa92314f32d6b5261145ca973e972c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-11-29T13:21:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Rogério de O. Neves.pdf: 1385774 bytes, checksum: ffa92314f32d6b5261145ca973e972c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-11-29T13:21:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Rogério de O. Neves.pdf: 1385774 bytes, checksum: ffa92314f32d6b5261145ca973e972c7 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-29T13:21:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Rogério de O. Neves.pdf: 1385774 bytes, checksum: ffa92314f32d6b5261145ca973e972c7 (MD5) Previous issue date: 2013-03-11 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The microorganisms of the community aquatic system of the Solimões and Negro rivers, as well as the diversity of these ecosystems have not been thoroughly investigated so far. The aim of this study was to characterize the bacterial microbiota of the Negro River in relation to seasonality, both in its quantitative aspect (forming units count colonies - CFUs) and qualitative (taxonomic identification via DNA sequencing RNA encoding small ribosomal subunit SSU -rRNA). Negro River water samples were collected at five different points on 4 and 5 depths dates from different times of the year, and all samples CFUs were counted. Total DNA was extracted from the biomass contained in the water of the Negro in full periods (N2) and receding (RN3) and analyzed spectrophotometrically and by agarose gel electrophoresis 0.8%. They were amplified variable regions V3 and V4 SSU-rRNA PCR (Reaction Polymerase Chain DNA) and the amplicons were sequenced by pyrosequencing using equipment 454 (Roche®). Files (reading DNA) of RN2 and Rio Negro RN3 libraries were submitted to the Mothur program suite for quality control, alignment of sequences, calculation of genetic distances and definition of Operational Taxonomic Units - OTUs, plus an estimate of the richness and diversity of species. The CFU count was possible to compare the number of culturable bacteria in the different collection points and due to seasonality. By molecular analysis we found that the phylum Proteobacteria proved dominant in these two collections of the river (full and low tide), the dominant genera of this phylum in full were Limnohabitans, methylomonas, and other expressive filo was Acidobacteria the GP3 race. In the ebb period abundant genera were Polynucleobacter, Acinetobacter and Curvibacter within the phylum Proteobacteria. Rarefaction curves demonstrated that RN3 library is more diverse in number of species than the RN2 library and confirmed by Shannon and InvSimpson index. It can be seen from the ACE 1 indexes and Cha RN3 the library is richer in species compared to RN2. / A comunidade de microrganismos do sistema aquático dos rios Solimões e Negro, bem como a diversidade destes ecossistemas não foram exaustivamente estudadas até o momento. O objetivo deste trabalho foi caracterizar a microbiota bacteriana do rio Negro em relação a sazonalidade, tanto em seu aspecto quantitativo (contagem de Unidades Formadoras de Colônias - UFCs) e no qualitativo (identificação taxonômica via sequenciamento do DNA codificador do RNA de pequena subunidade ribossomal SSU-rRNA). Amostras de água do rio Negro foram coletadas em cinco diferentes pontos, em 4 profundidades e em 5 datas de diferentes épocas do ano, sendo que de todas amostras as UFCs foram contadas. O DNA total foi extraído da biomassa contida na água do rio Negro em períodos de cheia (RN2) e vazante (RN3) e analisado espectrofotometricamente e por eletroforese em gel de agarose 0,8%. Foram amplificadas as regiões variáveis V3 e V4 do SSU-rRNA por PCR (Reação em Cadeia da DNA Polimerase) e os amplicons foram sequenciados por pirosequenciamento utilizando o equipamento 454 (Roche®). Os arquivos brutos das bibliotecas RN2 e RN3 do Rio Negro foram submetidas à suíte do programa Mothur para o controle de qualidade, alinhamento das sequências, cálculo das distâncias genéticas e definição das Unidades Taxonômicas Operacionais – OTUs, além de, estimativa da riqueza e diversidade das espécies. Pela contagem de UFCs foi possível comparar o número de bactérias cultiváveis nos diferentes pontos de coleta e em função da sazonalidade. Pela análise molecular verificou-se que o filo Proteobacteria mostrou-se dominante nestas duas coletas do rio (cheia e vazante), os gêneros dominantes deste filo na cheia foram Limnohabitans, Methylomonas, e outro filo expressivo foi Acidobacteria do gênero Gp3. No período de vazante os gêneros abundantes foram Polynucleobacter, Acinetobacter e Curvibacter, dentro do filo Proteobacteria. As curvas de rarefação demonstraram que a biblioteca RN3 é mais diversa em número de espécies do que a biblioteca RN2 e confirmado pelo índice de Shannon e InvSimpson. Pode-se observar a partir dos índices de ACE e Cha 1 que a biblioteca RN3 é mais rica em espécies comparada com a RN2.