Until first half of the XX century, sickle cell disease was practically limited to the malaria endemic areas and countries having known an important surge of African slaves. Today, migratory flows and progress of medicine have modified considerably the distribution of sickle cell disease which is from now on a frequent affection in Western Europe. The preventive implementation of medical care makes it possible to reduce morbidity and mortality associated with this pathology. Stake of a medical policy and economic interests, neonatal screening for hemoglobin disorders justifies then fully the implementation of powerful and adapted means. In order to initiate a newborn screening programme in our centre, we developed various immunological tests allowing to identify the sickle hemoglobin. We first of all developed an indirect immunoassay and led a population study on 46082 Belgian newborns and 1825 neonates from Central Africa. The performances of this assay were improved thereafter by conceiving a competitive test. Next, for reasons independent of our will, we had unfortunately to abandon the immunological approach. This methodology was thus supplanted in our center by an innovative method for this indication: the mass spectrometry. Our promising results currently authorize us to perennialize our policy in the neonatal screening for sickle cell disease and open the way for new developments in other fields. / Jusquà la première moitié du XXe siècle, la drépanocytose se limitait pratiquement aux zones dendémie palustre et aux pays ayant connu un important afflux desclaves dorigine africaine. Aujourdhui, les flux migratoires et les progrès de la médecine ont considérablement modifié la distribution de cette maladie qui est désormais une affection fréquente en Europe occidentale. La prise en charge précoce permet de réduire la morbidité et la mortalité associées à cette maladie. Enjeu dune politique sanitaire et dintérêts économiques, le dépistage néonatal de la drépanocytose justifie donc ainsi pleinement la mise en uvre de moyens performants et adaptés. Afin dinitier un programme de dépistage au sein de notre centre, nous avons initialement développé divers tests immunologiques permettant didentifier lhémoglobine anormale. Nous avons tout dabord mis au point un immunoessai indirect et conduit une étude de population sur 46082 nouveau-nés belges et 1825 bébés originaires dAfrique centrale. Les performances de lessai ont par la suite été améliorées en concevant un test compétitif. Lapprovisionnement laborieux danticorps nécessaires aux tests de détection a par la suite entravé notre programme. En effet, la commercialisation en a été interrompue et la production danticorps monoclonaux par nos moyens propres na pas été couronnée du succès escompté. Lapproche immunologique du dépistage néonatal de la drépanocytose a ainsi été supplantée dans notre centre par une méthode novatrice pour cette indication : la spectrométrie de masse. Nos résultats prometteurs nous autorisent actuellement à pérenniser notre nouvelle façon de faire dans le dépistage néonatal de la drépanocytose et ouvre la voie pour de nouveaux développements dans dautres domaines.

La drépanocytose résulte d’une mutation du gène β-globine entrainant la synthèse d’une hémoglobine anormale, l’HBS, qui polymérise en condition désoxygénée. Le globule rouge deviendra plus rigide et plus fragile, donnant lieu a deux conséquences majeures : l’hémolyse accrue et l’occlusion vasculaire.Récemment, un nouvel acteur moléculaire, l’adénosine, a été identifie. Ce nucléoside présente des effets bénéfiques sur les atteintes pulmonaires en inhibant l’activation des cellules « tueur naturel t inductibles », mais aussi délétères en favorisant la polymérisation de l’HBS et la survenue du priapisme, une des complications drépanocytaires.Les travaux menés ont pour objectifs d’étudier les effets délétères potentiels de l’adénosine, à travers l’étude de l’implication des enzymes de la voie métabolique de l’adénosine dans l’hémolyse ainsi que dans la survenue du priapisme chez des patients drépanocytaires. Pour ce faire, une cohorte composée d’adultes et d’enfants SS a été étudiée. Les résultats obtenus ont permis de préciser le rôle du métabolisme de l’adénosine dans les mécanismes physiopathologiques de la drépanocytose. Nos résultats n’ont pas permis de mettre en évidence de différence d’expression (ARN, protéine) des enzymes du métabolisme de l’adénosine entre les patients présentant des antécédents priapiques et ceux indemnes de cette complication. Néanmoins, nos recherches ont permis d’identifier l’adénylate cyclasse 6 comme gène modulateur de l’hémolyse et d’apporter de nouveaux éléments en accord avec la classification du priapisme comme appartenant au sous-phénotype hyperhémolytique à travers notamment l’étude des caractéristiques hemorhéologiques. / Sickle-cell disease is caused by a mutation in the β-globin gene leading to an abnormal hemoglobin, hbs. This change allows polymerization of HBS when deoxygenated. Erythrocytes become more rigid and fragile, leading to the two major manifestations of the disease: hemolysis and vaso-occlusion.Recently, adenosine has been identified as a new molecular actor of this disease. This nucleoside may have beneficial effects by preventing inkt cells activation and pulmonary inflammation. But it may also exhibit deleterious effects by activing a signalling pathway leading to erythrocyte sickling and the occurrence of priapism, a sickle cell disease complication.The purpose of our work, based on the potential deleterious effects induced by adenosine was to precise the involvement of adenosine metabolic pathway enzymes in hemolysis and the occurrence of priapism. Two cohorts of children and adult ss patients and men ss have been studied respectively.Our results had clarified the role of metabolism of adenosine in the pathophysiological mechanisms of sickle cell disease. Our results did not allow detecting evidence of differential expression (rna, protein levels) of adenosine metabolism enzymes between ss adult patients exhibiting priapic events and those who had never experienced this complication. Nevertheless, our work has led to the identification of adenylate cyclase as modifier gene of hemolysis and has bring new elements on the priapism classification to the hyper hemolytic sub-phenotype with the description of the hemorheological features associated with this complication.