El objetivo de esta investigación fue evaluar el efecto genotóxico causado por los Rayos X, en el ADN linfocitario en sangre periférica, utilizando el ensayo cometa como técnica de análisis, en el personal del Servicio de Radiología del Hospital Nacional LUIS N.SAENZ PNP. La población de estudio fue de 40 personas separadas en 2 grupos, el 1ero de 20 trabajadores expuestos a los Rayos X, con un tiempo laboral de exposición de 2-15 años y 16 años a más y de edades entre 20-30 y 31 años a más. El 2do grupo fue el grupo control, formado por personas del mismo centro de trabajo sin exposición a Rayos X. Las muestras de sangre fueron obtenidas por punción venosa en tubos con heparina, de los cuales fueron aislados los linfocitos y asu vez estos fueron colocados en láminas porta objetos con geles, para la realización del ensayo cometa. Las láminas fueron sometidas a lisis alcalina seguida de la corrida electroforética (pH=13), para seguir con la tinción lectura en un microscopio de fluorescencia. El análisis de imágenes se realizó usando el programa informático Komet 4, en el cual se almacenaron los datos recolectados en formato Excel y analizados en el programa estadístico SPSS. Los resultados indicaron que existe un incremento significativo (p<0.05) de daño genotóxico en el 10% de los trabajadores expuestos a los Rayos X y solo el 1% del grupo control. Respecto a la variable de estudio de la edad en el personal expuesto no se encontró resultados significativos. Por el contrario para la variable de tiempo de exposición, los individuos expuestos entre 2 a 15 años presentaron mayor daño celular (Nivel I y II) en relación a los expuestos de 16 a más años que presentaron niveles bajos. Los Rayos X causan un efecto medianamente nocivo en la integridad del genoma teniendo una correlación con los años de exposición del personal que trabaja en el servicio radiología. Los hallazgos confirman la utilidad del ensayo cometa como una herramienta útil para evaluar daño genotóxico y prevenir tempranamente el aparecimiento patologías radio inducidas. The objective of this research was to evaluate the genotoxic effect caused by X-rays in DNA in peripheral blood lymphocytes, using the comet assay and analysis technique, the staff of the National Hospital Radiology LUIS N.SAENZ PNP. The study population was 40 persons separated into 2 groups, the 1st of 20 workers exposed to X-rays, with a working time of exposure 2-15 years and 16 years and over age 20-30 and 31 years later. The 2nd group was the control group, consisting of people from the same workplace without exposure to X-ray Blood samples were obtained by venipuncture into heparinized tubes, which were isolated lymphocytes and assume time these were placed in partment sheets gels, for performing the comet assay. Slides were subjected to alkaline lysis followed by electrophoretic run (pH = 13) to continue reading staining fluorescence microscopy. Image analysis was performed using the Komet 4 software, in which the collected data to Excel and analyzed using the SPSS statistical program was stored. The results indicated that there is a significant increase (p <0.05) of genotoxic damage in 10% of workers exposed to X-rays and only 1% in the control group. With regard to the study variables of age in the exposed staff found no significant results. In contrast to the variable exposure time, exposed individuals between 2-15 years showed greater cell damage (Level I and II) compared to those exposed to more than 16 years had low levels. The X-rays cause a moderately adverse effect on the integrity of having a correlation with years of exposure of personnel working in the radiology service genome. The findings confirm the usefulness of the comet assay as a tool to assess genotoxic damage and prevent early onset pathologies induced within the tool.