Orientadora: Janete Apparecida Desidério / Banca: Agda Paula Facincani / Banca: Irlan Leite de Abreu / Resumo: Como uma alternativa para diminuir as agressões constantes que o ecossistema vem sofrendo, devido à grande quantidade de produtos químicos utilizados no controle de pragas, pesquisas envolvendo microrganismos capazes de promover o controle biológico tem se intensificado. Dentre estes microrganismos a bactéria Bacillus thuringiensis tem se destacado. Essa bactéria caracteriza-se pela produção de proteínas tóxicas a representantes de diversas ordens de insetos. Em particular, as proteínas Vip3A, estão em amplo estudo devido a sua especificidade, alto potencial ativo e como alternativa para o controle da resistência de insetos às proteínas Cry. Diante disto, o objetivo deste trabalho foi selecionar, a partir de 1080 isolados de diferentes regiões brasileiras, aqueles portadores de genes vip3A e obter a sequência de nucleotídeos completa dos mesmos. As linhagens padrão B. thuringiensis var. kurstaki HD1, B. thuringiensis var. tolworthi HD125 e o isolado I187 tiveram seus DNAs amplificados com oligonucleotídeos baseados na sequência de genes vip3A, descritos no banco de dados de B. thuringiensis e, a partir dos amplicons obtidos, a sequência completa de nucleotídeos dos mesmos foi determinada, utilizando-se da estratégia de "primer walking". A proteína Vip3Aa43 (GenBank: [HQ594534]) da linhagem HD1 demonstrou ser 100% idêntica às proteínas Vip3Aa já descritas. Já as proteínas Vip3Aa42 (GenBank: [HQ587048]) da linhagem HD125 e Vip3Ag5 (GenBank: [HQ542193]) do isolado I187 demonstraram similaridade de 99% com as proteínas descritas Vip3Aa35 e Vip3Ag2, respectivamente, demonstrando serem duas novas proteínas Vip3A, devido às substituições de aminoácidos ocorridas. Os três genes vip3A obtidos poderão ser utilizados na produção de plantas Bt, piramidadas ou não, visando ao manejo da resistência dos insetos praga / Abstract: As an alternative to decrease the constant aggressions that the ecosystem has suffered due to the large amount of chemical products used in pest control, researches involving microorganisms able to promoting biological control have been intensified. Among these microorganisms the bacterium Bacillus thuringiensis has been stood out. This bacterium is characterized by the production of toxic proteins to representatives of several insect orders. In particular, the Vip3A proteins are in large study due to its specificity, and high active potential as an alternative to control of insect's resistance to Cry proteins. According to this, the aim of this work was to select from 1080 isolates in different Brazilian regions, those carrying vip3A genes and obtain the complete nucleotide sequence of the same. The standard strains B. thuringiensis var. kurstaki HD1, B. thuringiensis var. tolworthi HD125 and the isolate I187 had their DNA amplified with primers based on vip3A gene sequence described in database of B. thuringiensis, and from the amplicons obtained, the full sequence of nucleotides was determined, by the use of the strategy of "primer walking". The protein Vip3Aa43 (GenBank: [HQ594534]) of HD1 strain showed to be 100% identical to Vip3Aa proteins already described. However, the proteins Vip3Aa42 (GenBank: [HQ587048]) of HD125 strain and Vip3Ag5 (GenBank: [HQ542193]) of the isolate I187 showed 99% similarity with the Vip3Aa35 and Vip3Ag2 proteins described, respectively, showing been two new Vip3A proteins due to amino acid substitutions occurred. The three vip3A genes obtained can be used in the production of Bt crops, pyramidal or not, aiming to resistance management of pest insects / Mestre

Orientador: Sérgio Antonio de Bortoli / Banca: Nelson Wanderley Perioto / Banca: Luis Garrigós Leite / Banca: Ricardo Antonio Polanczyk / Banca: Alexandre de Sene Pinto / Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar a ação do produto comercial Agree® nas características biológicas de três inimigos naturais em laboratório, utilizando a traça-das-crucíferas, P. xylostella. Os experimentos foram conduzidos em sala climatizada a 25±1°C, umidade relativa de 70±10% e fotofase de 12 horas. Foram verificados os aspectos biológicos de P. nigrispinus, Orius insidiosus e Trichogramma pretiosum por meio da ação do produto. Para os predadores foram elaboradas tabelas de vida de fertilidade. Os dados biológicos obtidos indicaram que quando P. nigrispinus se alimenta de lagartas infectadas com o produto os predadores sofrem efeito negativo em sua biologia, provocado provavelmente por alterações fisiológicas na lagarta. No experimento com O. insidiosus as características duração do segundo instar ninfal, o consumo ninfal e a longevidade das fêmeas foram afetadas pela ação do produto. Para T. pretiosum o produto não apresentou efeitos negativos que possam inviabilizar sua utilização conjunta com o produto para o Manejo Integrado de P. xylostella em brassicáceas. Apesar de o produto ter provocado efeitos negativos a P. nigrispinus e O. insidiosus estudos e técnicas complementares devem ser realizados para que, no futuro, esses inimigos naturais possam ou não ser utilizados em programas de controle biológico em culturas de brassicáceas associados com a bactéria entomopatogênica / Abstract: This work aimed to evaluate the action of biological insecticide Agree on biological characteristics of 3 natural enemies in laboratory, using the host diamondback moth, Plutella xylostella. The experiments were conducted in acclimatized room under 25±1°C, 70±10% relative umidity and 12 h photophase. The biological aspects of Podisus nigrispinus, Orius insidiosus and Trichogramma pretiosum were verified through the product action. Life and fertility table were elaborated to the predators. The biological data obtained showed that P. nigrispinus has the biology affected negatively when fed on infected caterpillars, probably occurred by physiological alterations in caterpillar. The characteristics duration and consumption of second nymphal instar, nymphal consumption and female longevity were affected by products in the assay with Orius insidiosus. The insecticide didn't show negative effects that can be unfeasible the use associated with the parasitoid T. pretiosum in the Integrated Pest Management to P. xylostella in brassicas. Thus the product cause negative effects on P. nigrispinus and O. insidiosus, complementary studies need to be realized in order to the future, these natural enemies can be used in Biological Programs associated with Bt in brassicas crops / Doutor