Orientador: Licio Augusto Velloso / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-26T23:18:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rocha_EduardoMelani_D.pdf: 3720932 bytes, checksum: c01b00052a61b99bdf9da344920c7519 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: As células da superficie ocular assim como os tecidos das glândulas salivares e lacrimais respondem à insulina quando em cultura, e podem softer modulação no seu ritmo de proliferação quando expostas a este hormônio. Os objetivos do presente estudo foram: (1) investigar a presença da insulina no filme lacrimal; (2) identificar o receptor de insulina, bem como os elementos participantes da via de sinalização intracelular da insulina nestes tecidos; (3) conhecer os efeitos de diabetes mellitus, envelhecimento e gênero sobre as etapas iniciais da sinalização da insulina em glândulas lacrimais e salivares de ratos. A presença de insulina na lágrima foi avaliada por radioimunoensaio enquanto que a identificação dos elementos envolvidos na transmissão do sinal insulínico e a resposta celular ao hormônio foram avaliados através de imunohistoquímica, imunoprecipitação e "imunoblotting". A insulina foi identificada em lágrima humana, havendo aparente relação com níveis circulatórios do hormônio. Demonstrou-se que: o receptor de insulina e o IGFIR estão presentes na cómea e na conjuntiva humana, e também que o RI, IRS-l, IRS-2, Shc, IGF-IR e STAT-l estão presentes em glândulas lacrimais e salivares de ratos; a fosforilação insulino-induzida do receptor de insulina foi significativamente menor em glândula lacrimal de ratos diabéticos, senis e do gênero feminino se comparados a seus respectivos grupos-controle; a fosforilação do receptor de insulina foi significativamente menor em glândulas salivares de ratos velhos e do gênero feminino do que em seus respectivos grupos-controle. O presente estudo traz evidências da ação da insulina sobre glândulas lacrimais e salivares, e na superficie ocular, bem como indícios de que o dia,betes mellitus, o envelhecimento e o gênero influenciam a transmissão do sinal da insuIIDa em glândulas lacrimais e salivares / Abstract: Insulin plays a major role in lacrimal and salivary gland function and may also regula te growth, metabolism and gene expression in those tissues and in ocular surface cells as well. In addition, cells isolated ITom the ocular surface and ITom exocrine glands depend on insulin for optimal survival in culture. The objectives of the present study were to investiga te the presence of insulin in tears as well as the expression and functional, status of the insulin receptor and elements participating in the insulin signaling pathway in ocular surface, salivary and lacrimal glands. Insulin was detected by radioimmunoassay in tear fi1m of humans and apparently correlates with plasma insulin. Immunoperoxidase technique was used to localize insulin and IGF-I receptors in human comea and conjunctiva and rat lacrimal and salivary glands. The insulin-induced phosphorylation in a time- and dosedependent fashion was observed for insulin receptors IGF-IR, IRS-l, IRS-2, Shc and STAT1, as evaluated by mmunoprecipitation and immunoblotting procedures. The insulin receptor phosphorylation in response to insulin was lower in lacrimal glands of diabetic, senile and female rats as compared to controIs. In salivary glands, similar findings were also observed in senile and female rats as compared to the controIs. There was also a significantly lower phosphorylation of ST A T -1 in response to insulin in lacrimal glands of diabetic rats and salivary glands of senile rats, compared to their respective controIs. The present study suggests that insulin, by acting through elements of its signaling pathwày may directly participate in the modulation of cellgrowth and survival in the ocular surface and lacrimal and salivary glands, and that insulin signaling in such sites may be influensed by diabetes mellitus, aging and gender / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica