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Implante de células-tronco mesenquimais autólogas, associadas ao plasma rico em plaquetas em tendinites experimentais de equinos /

Carvalho, Armando de Mattos. January 2012 (has links)
Orientador: Ana Liz Garcia Alves / Coorientador: Carlos Alberto Hussni / Banca: Alexandre Secorun Borges / Banca: Elenice Deffune / Banca: Anna Paula Balesdent Barreira / Banca: Rafael Resende Faleiros / Resumo: A lesão do tendão flexor digital superficial (TFDS) é uma importante causa de claudicação em equinos. Embora existam diversos tratamentos descritos, poucos são eficazes na melhora significativa da qualidade da matriz extracelular. Recentemente, diversos experimentos vêm focando no potencial terapêutico das células-tronco mesenquimais (CTMs) e do plasma rico em plaquetas (PRP) em casos de lesões de difícil cicatrização. O objetivo geral deste estudo foi a obtenção, cultivo e caracterização das células tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo (AdCTMS), a adoção de uma nova técnica de indução de lesão tendínea utilizando colagenase em gel e a avaliação da reparação tendínea após terapia com a associação terapêutica de AdCTMs e PRP através da análise clínica, ultrassonográfica, histopatológica, imunoistoquímica (colágeno tipo III e fator VIII) e da expressão gênica (COL1A1, COL3A1, TNC, TNMD, SCX). Foi possível isolar e cultivar as AdCTMs, concluir sua caracterização através da diferenciação adipogênica, osteogênica e condrogênica, além da confirmação da expressão destas células aos marcadores CD44, CD90 e CD105 na citometria de fluxo. A indução da lesão do TFDS foi realizada com sucesso, sendo observado na avaliação clínica e ultrassonográfica o desenvolvimento de tendinite focal similar a lesão de ocorrência natural. O uso das AdCTMs associadas ao PRP demonstrou ser viável e resultou na prevenção da progressão da área da lesão no grupo tratado na avaliação ultrassonográfica, maior fluxo sanguíneo do grupo tratado na avaliação com Power Doppler, e melhora da organização cicatricial, com diminuição do infiltrado inflamatório na avaliação histopatológica. Não foram observadas diferenças entre os grupos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Superficial digital flexor tendon (SDFT) lesion is an important cause of lameness in horses. Although there are many treatments described, few are effective in maintain the quality of the extracellular matrix. Recently several studies have focused on the therapeutic potential of mesenchymal stem cells (MSCs) and platelet-rich plasma (PRP) in some damage tissues. The aim of this study was to perform the isolation, cultivation and characterization of mesenchymal stem cells derived from adipose tissue (AdMSCs), the adoption of a new tendon lesion induction technique using collagenase in gel, and evaluation of tendon repair after treatment with the AdMSCs and PRP association by clinical, ultrasonographic, histopathological, immunohistochemical (collagen type III and factor VIII) and gene expression (COL1A1, COL3A1, TNC, TNMD, SCX) analysis. It was possible to isolate, cultivate and perform the characterization of AdMSCs by adipogenic, osteogenic, chondrogenic differentiation, and to confirm the expression of CD44, CD90 and CD105 cell markers on flow cytometry. The SDFT injury induction was successful observed in clinical and ultrasonographic evaluation, with development of focal lesion similar to naturally occurring. The use of AdMSCs and PRP association proved to be feasible and resulted in preventing the progression of the lesion area in the treated group on ultrasound evaluation, increased blood flow on the Power Doppler evaluation and decreased inflammatory infiltrate and improved the organization on histopathological evaluation. No differences were observed between the groups regarding the immunohistochemistry evaluation and the expression of the tested genes. It can be concluded based on the results observed: (1) that the AdMSCs were properly processed and characterized with the methods employed; (2) tendon.. (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Borreliosis in horses : epidemiology, experimental infection and therapeutic /

Basile, Roberta Carvalho. January 2016 (has links)
Orientador: Antônio de Queiroz Neto / Coorientador: Delphim da Graça Macoris / Banca: Adolorata Aparecida Bianco Carvalho / Banca: Estevam Guilherme Lux Hoppe / Banca: Natalino Hajime Yoshinari / Banca: Jairo Jaramillo Cardenas / Resumo: A Borreliose de Lyme é uma doença causada pela espiroqueta Borrelia burgdorferi sensu lato, cosmopolita, transmitida por meio da picada de carrapatos que permanecem aderidos ao hospedeiro por mais de 24 horas. Em humanos, pode provocar doenças articulares, cardíacas e neurológicas. Nos equinos, até o presente momento a doença havia sido descrita por meio de relatos de caso e extrapolações de sua patogenia nos humanos. Por meio do presente estudo, pretende-se pesquisar os sinais clínicos e alterações hematológicas da borreliose de Lyme nos equinos. Além disso, avaliou-se também a viabilidade de se tratar os equinos infectados com ceftriaxona sódica. Para tanto, o experimento foi composto por três principais fases. A primeira fase foi composta por um levantamento epidemiológico da doença no Estado de São Paulo, especificamente nas cidades com casos suspeitos de borreliose de Lyme em humanos. Coletou-se amostras de sangue e histórico clínico de 760 equinos e obteve-se média de 21% de soropositividade no estado. Desta fase, concluiu-se que existe grande relação entre a soropositividade, presença de carrapatos Amblyomma sculptum, presença de capivaras na propriedade, linfopenia, abortamento e retenção de placenta. A segunda fase foi composta por uma infecção experimental de dois equinos adultos com B. burgdorferi cepa G39/40. Os equinos foram avaliados durante 90 dias de infecção e foi possível verificar que os animais apresentaram sinais clínicos e alterações hematológicas inespecíficas somente nos primeiros 11 dias de infecção. Notou-se a presença de anemia normocítica hipocrômica discreta, dores musculares, palidez de mucosas, letargia e aumento de linfonodos, sinais que podem facilmente ser confundidos com a piroplasmose crônica. Durante a fase 3 do experimento, os dois equinos infectados experimentalmente foram submetidos ao tratamento com ceftriaxona... / Abstract: Lyme borreliosis is a disease caused by the spirochete Borrelia burgdorferi sensu lato, cosmopolitan and transmitted by the bite of ticks which remain adhered to the host for more than 24 hours. In humans, it can cause articular, cardiac and neurological diseases. In horses, so far the disease had been described by means of case reports and extrapolations of its pathogenesis in humans. This study aimed to investigate the clinical signs and hematological changes of Lyme disease in horses. Furthermore, it is also assessed the feasibility of treating infected horses with sodium ceftriaxone. To this end, the experiment consisted of three main phases. The first phase consisted of an epidemiological survey of the disease in São Paulo State, specifically in cities with suspected cases of Lyme borreliosis in humans. It was collected blood samples and clinical history of 760 horses that resulted in an average of 21% seropositivity in the state. In this stage, it was concluded that there was a high relationship between seropositivity, Amblyomma sculptum tick presence, the presence of capybaras in the property, lymphopenia, abortion and retained placenta. The second phase consisted of an experimental infection of two adult horses with B. burgdorferi strain G39 / 40. The horses were evaluated for 90 days of infection and we found that the animals showed nonspecific clinical signs and hematologic changes only in the first 11 days of infection. It was noted the presence of mild hypochromic normocytic anemia, muscle pain, pale mucous membranes, lethargy and swollen lymph nodes, signs that can easily be confused with chronic piroplasmosis. During phase 3 of the experiment, the two horses experimentally infected underwent treatment with intravenous sodium ceftriaxone. Already during the first application, both developed an anaphylactoid reaction moderate to severe with colic syndrome as consequence for one ... / Doutor

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