Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-08-14Bitstream added on 2014-06-13T19:49:26Z : No. of bitstreams: 1 marchesin_ml_me_rcla.pdf: 512126 bytes, checksum: f1af03206b1ca9a151524c3b6960cca3 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A formação da musculatura esquelética nos membros de frango é um processo complexo, dividido em várias etapas, desde a formação do somito, progenitor da musculatura, até o músculo propriamente dito. O presente trabalho teve o objetivo de caracterizar o perfil de expressão de genes associados aos fatores miogênicos MyoD, MRF4 e Miogenina (responsáveis pela formação e manutenção da musculatura) e Miostatina. Utilizaram-se 40 animais de duas linhagens (20 de corte e 20 de postura), cujos tecidos das coxas e sobrecoxas foram coletados em duas idades (21 e 42 dias póseclosão). A técnica de PCR quantitativa foi empregada nas análises da expressão gênica e os dados obtidos foram analisados com a utilização do programa REST (Ferramenta para análise de expressão relativa - Relative Expression Software Tool) que se baseia em quantificação relativa. Devido à divergência fenotípica no padrão de crescimento das linhagens estudadas, esperava-se encontrar diferenças na expressão de miostatina, as quais não foram confirmadas. Por outro lado, foram verificadas diferenças para MRF4 nos músculos Gastrocnêmio (coxa) e Biceps (sobrecoxa) em ambas as idades, e 9 para Miogenina, em Gastrocnêmio, aos 42 dias; com maior expressão na linhagem CC. A caracterização dos genes estudados foi parcial, abrindo a possibilidade para que outros genes possam ser selecionados com intuito de compreender o desenvolvimento muscular em frangos. / The development of the chicken limb muscles is a complex process, divided into several stages from the initial somite formation to the muscle itself. This study aimed to characterize expression profile of genes associated to myogenic factors MyoD, MRF4 and Miogenin (responsible for muscle formation and maintenance) and Miostatin. It was used 40 animals from two lines (20 broiler and 20 layer), whose thigh and drumstick tissues were collected at two ages (21 and 42 days post-hatch). Gene expression employed techniques of quantitative PCR and data were analyzed by REST program, which is based on a relative quantification. Due to phenotypic divergence in the growth pattern of the strains studied, it was expected to find differences in the expression of miostatin that were not confirmed. On the other hand, differences were found for MRF4, with highest expression in CC line. The characterization of genes studied was partial, opening the possibility that other genes may be selected in order to understand the muscle development in chickens.

Dissertação(mestrado)- Universidade Federal do Rio Grande, Programa de Pós-Graduação em Aqüicultura, Instituto de Oceanografia, 2009. / Submitted by Cristiane Silva (cristiane_gomides@hotmail.com) on 2012-08-10T13:50:16Z No. of bitstreams: 1 Rafael.pdf: 548290 bytes, checksum: 93681ab1550a68d8844eefffd0bf0b49 (MD5) / Approved for entry into archive by Bruna Vieira(bruninha_vieira@ibest.com.br) on 2012-09-18T02:09:25Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Rafael.pdf: 548290 bytes, checksum: 93681ab1550a68d8844eefffd0bf0b49 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-09-18T02:09:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rafael.pdf: 548290 bytes, checksum: 93681ab1550a68d8844eefffd0bf0b49 (MD5) Previous issue date: 2009 / O hormônio do crescimento (GH) é produzido e secretado pela adeno-hipófise tendo como efeito principal promover o crescimento somático em vertebrados. No presente estudo foi analisada a morfometria do crescimento, estrutura do tecido muscular e expressão de fatores miogênicos em indivíduos machos e fêmeas da linhagem F0104 de zebrafish transgênico para o GH. Os índices morfométricos sugerem que o excesso de GH circulante está promovendo uma antecipação na idade de maturação sexual. Também, foi observado um menor fator de condição nos transgênicos de ambos os sexos (P<0,05) e uma alteração nos padrões morfométricos ao longo do tempo evidente nos machos transgênicos. As análises multivariadas demonstraram dois fenótipos distintos de machos transgênicos. O primeiro assemelha-se às fêmeas transgênicas (tamanho grande e baixo fator de condição), e o segundo aos machos não transgênicos (menor tamanho e baixo fator de condição). Este padrão de crescimento heterogêneo nos machos transgênicos pode ser explicado pela alteração do perfil de secreção do GH associado à variabilidade genética individual na resposta ao excesso de GH circulante. As análises histológicas demostraram que os transgênicos apresentam uma hipertrofia muscular acentuada quando comparados com os não transgênicos, sendo as fêmeas transgênicas mais hipertróficas do que os machos transgênicos. A expressão dos genes relacionados com o crescimento muscular mostrou que a hipertrofia muscular observada nos transgênicos é independente do fator de crescimento tipo insulina I (IGF-I). Adicionalmente, nos machos transgênicos foi observada uma indução significativa na expressão da miogenina, indicando que esta proteína pode estar mediando, pelo menos em parte, o crescimento hipertrófico neste grupo. A expressão gênica também mostrou uma indução da a-actina somente em machos, independentemente da transgenia. Entretanto, não foi observada alteração no teor de proteínas totais de músculo. Dentro do contexto dos resultados obtidos no presente estudo, ficou evidente que o excesso de GH nos peixes transgênicos da linhagem F0104 provavelmente esteja promovendo uma maturação sexual precoce, uma hipertrofia muscular independente de IGF-I, e um crescimento heterogêneo em machos transgênicos devido à alteração do padrão de secreção do hormônio como efeito da expressão constitutiva do transgene. Este modelo é uma ferramenta interessante para o estudo de peixes com crescimento limitado. / Growth hormone (GH) is produced and released by the adenohypohysis being its main role to promote vertebrate somatic growth. The present study analyzed growth morphometrics, muscular tissue structure and myogenic factors expression in males and females from F0104 transgenic zebrafish lineage for GH. Morphometric indexes suggest that systemic GH excess is promoting an early sexual maturation. It was also observed a minor conditional factor in both sexes of transgenic group (P<0.05), and an evident time-course male altering in morphometric patterns. The first is similar to transgenic females (big size and low condiction factor) and the second to non-transgenic males (smaller size and low condiction factor). This heterogeneous male growth pattern may be explained by the altering of the GH secretion profile associated to individual genetic variability in answer to systemic GH excess. Histological analysis demonstrated that transgenic presented an enhanced muscle hypertrophy when compared to non-transgenic, being transgenic females more hypertrophic than transgenic males. Gene expression related to muscle growth revealed that transgenic hypertrophy observed is independent from insulin-like growth factor I (IGF-I). In addition, transgenic males had a significantly myogenin gene expression induction indicating that, at least partially, this protein may be mediating hypertrophic growth in this group. It was also shown an induction in males of the a-actin gene independently from transgenesis. However, there were no diferences in total protein content from the muscle. According the data presented in this study, it was evident that GH excess in F0104 transgenic fish lineage is probably promoting an early sexual maturation, a muscle hypertrophy independent from IGFI, and a heterogeneous transgenic males growth due to hormone secretion pattern altering as an effect of the transgene constitutive expression. This model is an interesting tool for the study of fishes with limited growth.