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Morfometria, amostragem populacional e reinvestigação do feromônio de Sphenophorus levis (Coleoptera: Curculionidae) / Morfometry, field samples and reinvestigation of Sphenophorus levis (Coleoptera: Curculionidae) pheromone

Wadt, Lucila 17 May 2016 (has links)
Sphenophorus levis (Coleoptera: Curculionidae) é uma das principais pragas de importância econômica na cana-de-açúcar. Seu ataque pode causar a morte da planta, promovendo falhas na rebrota e dependendo do nível de infestação, inviabilizar novos cortes. Além disso, é considerado um inseto de difícil manejo. Dentre as razões, destacam-se o hábito críptico de suas larvas, que se alimentam no interior do colmo da cana, e dos adultos, que permanecem boa parte de seu tempo abaixo da palhada sobre o solo. Por esta razão, os métodos tradicionais de controle, como os agroquímicos têm sido pouco eficientes. Neste sentido, a busca por novos conhecimentos e novas estratégias para o manejo desta praga tem se tornado frequente. Assim, o objetivo principal deste trabalho foi o de reinvestigar o feromônio de S. levis, visando a possível existência de novos compostos químicos na sua composição. Além disso, foram estudados ainda a morfologia e morfometria de S. levis, visando uma ágil e fácil separação por sexo nesta espécie, e uma amostragem populacional das formas biológicas de S. levis em campo, ao longo de uma safra, tendo em vista o manejo desta praga. As fêmeas apresentaram maior tamanho corporal que os machos, porém, houve sobreposição entre o tamanho mínimo da fêmea e máximo do macho, comprometendo uma distinção pelo tamanho. A separação dos sexos em S. levis pode ser feita observando-se a parte ventral do abdome, com os machos apresentando toda a região pilosa e as fêmeas somente com pelos na região apical. Uma maior concavidade presente no final do abdome dos machos, também pode ser utilizada como um parâmetro auxiliar nesta separação. Observando-se a flutuação populacional das diferentes fases biológicas de S. levis, por meio de trincheiras, verificou-se que as larvas ocorrem praticamente durante todos os meses do ano, enquanto que pupas e adultos recém emergidos, em menos da metade das amostras. O pico populacional de larvas, pupas e adultos recém emergidos ocorreu em outubro. Para os adultos, a amostragem por meio de iscas indicou que o pico de maior intensidade foi em dezembro. Na etapa de reinvestigação do feromônio de agregação de S. levis, foram obtidas respostas positivas nas antenas de machos e fêmeas para três compostos químicos. Um destes compostos foi o álcool 2-metil-4-octanol, já identificado anteriormente por Zarbin et al. (2003). Os outros dois, são novos compostos denominados 2,3-butanodiol diacetil (2,3 diacetilbutano) e meso 2,3 butanodiol diacetil (meso 2,3 diacetilbutano). Os três compostos sintéticos foram testados em GC-EAG, porém ainda sem uma resposta conclusiva. Novos testes necessitam ainda ser conduzidos para elucidar a composição química do feromônio de agregação de S. levis. / Sphenophorus levis (Coleoptera: Curculionidae) is one of the main pests of economic importance in sugarcane in Brazil. The attack can result plant death promoting the regrowth and failures depending on the level of infestation, derail further cuts. S. levis is a hard management pest. Among the reasons, it highlights the cryptic habits of larva, which feed inside the sugarcane stalk, and adults live in the soil surface, above of straw. Due to this, the traditional control methods such as agrochemicals have been inefficient. The search for new knowledge and new strategies for the management of this pest has become frequent. Thus, the main objective of this work was to reinvestigate the S. levis pheromone, aiming the possible existence of new chemical compounds in its composition. Beside that, this study aimed to morphometric and morphological comparison between males and females, seeking sex separation in a fast and effective manner. Moreover, population sample of S. levis in field was performed, aiming at an improvement in planning of the management of this pest. Females of S. levis have a greater body size than males; however this parameter cannot be used as a sex indicator, because there was overlap between the minimum and maximum body sizes of females and males respectively. S. levis sex separation can be carried observing abdomen ventral side, where males present hairy venter and females just a tuft in the apical region, and by a greater concavity of the end of the abdomen in males. The fluctuation of S. levis biological stages through trenches, it was found that the larvae occurs during almost all months of the year, while pupae and recently emerged adults in less than half of the samples. The population peak for larvae, pupae and recently emerged adults was in October. For adults, the sampling through baits indicated that the peak intensity was higher in December. Then, in the reinvestigate the S. levis pheromone, natural extracts from males showed responses of antennas of males and females of the species for three chemical compounds. One of these compounds was the alcohol 2-methyl-4-octanol, previously identified by Zarbin et al. (2003). The other two are new compounds, called 2.3-butanediol diacetil (2.3 diacetilbutano) and meso 2.3 butanediol diacetyl (meso 2.3 diacetilbutano). The three synthetic compounds were tested in GC-EAG, but there is still no conclusive answer. New tests still need to be conducted to elucidate the chemical composition of S. levis aggregation pheromone.
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Morfometria geométrica, dimorfismo sexual e avaliação da atratividade de Cratosomus flavofasciatus (Coleoptera: Curculionidae) ao feromônio sintético

Campos, Philippe Correia Souza 24 February 2017 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Knowledge about biology and animal behavior is critical to understanding how a particular organism interacts with its environment. Identifying the sex of individuals is an essential step in conducting behavioral studies. An integral part of animal behavior is communication, which can be intermediated by pheromones. Within different groups, insects are the animals use pheromones the most in order to carry out their fundamental activities. Cratosomus flavofasciatus, a Coleoptera of the Curculionidae family, popularly called the Orange-tree-borer, is considered one of the main citrus pests, occurring in Sergipan orchards. The objective of this work was to evaluate the morphological characteristics that allow the sexual differentiation of C. flavosfaciatus and to evaluate the attractiveness of C. flavosfaciatus to the synthetic compounds that make up the pheromone of this species. To verify the sexual dimorphism of C. flavofasciatus, a geometric morphometry analysis was first made using 80 adult individuals of each sex. There were 27 landmarks in the ventral region in each individual. The anatomical landmarks 2, 9, 10, 11, 18, 21 were the ones that contributed most to the distinction between males and females, which represent the region of the rostrum, the final portion of the abdomen and the end of the thorax. For sex confirmation, a withdrawal of the genitalia of both sexes was also performed. In females it was possible to recognize the following structures: sternite VIII and bursa copulatrix. In males, it was possible to observe the gastric spicule and the aedeagus with a pair of parammero. The Procrustes Anova showed significant differences between the sexes (P<0.001) and the size (centroid) in relation to sex (P <0.001), but there was no difference in shape in relation to size (P = 0.229) and the form in relation to sex in conjunction with the size (P = 0.707). Principal component analysis demonstrated an evident differentiation between the genders based on the ventral region of the species. The first two main components explained 51.909% (PC1 + PC2: 39.563% + 12.346%) of the shape variation. The discriminant analysis indicated a significant difference (permutation test = 10,000 permutations; P < 0.001) for the sexual dimorphism of the ventral region. The determination of the adult sex of C. flavofasciatus through the last abdominal sternum is as accurate as the dissection of the genitalia. The behavioral response of C. flavofasciatus to synthetic pheromonal compounds (a mixture of 2-((1R, 2S)-1-methyl-2-(prop-1-en-2-yl)cyclobutil)ethanol (grandisol), (E)-2-(3,3-dimethyl-cyclohexylidene)ethanol (alcohol E) and (Z)-2-(3,3-dimethyl-cyclohexylidene)ethanol (alcohol Z)) and for their host plants Cordia curassavica (Maria-Preta) and Citrus sinensis (Orange Tree) were evaluated by olfactory tests performed on a Y-tube olfactometer. Both sexes were significantly more attracted to C. sinensis stalks (P <0.05) than to filtered air. Tests with C. curassavica stalk attracted only males (P = 0.02). When the insects had the opportunity to choose between C. curassavica stalks and C. sinensis stalks, males preferred those from C. curassavica (P = 0.01), whereas females showed no significant preference (P> 0.05). The combination of the C. curassavica and C. sinensis volatiles associated with the synthetic pheromone at 100ppm concentration was more attractive for both sexes (P <0.05) than for the control (hexane together with the host plant). On the other hand, at the concentration of 10ppm, only the association with C. curassavica attracted males (P = 0.009). These results can be used as a basis for field testing, contributing to the development of an environmentally safe and effective method for monitoring orange tree borer. / O conhecimento sobre a biologia e o comportamento animal é fundamental para compreensão de como determinado organismo interage com o seu ambiente. A identificação do sexo dos indivíduos é um passo essencial na execução de estudos comportamentais. Um ponto integrante do comportamento animal é a comunicação, a qual pode ser intermediada por feromônios. Dentre os vários grupos, os insetos são os animais que mais utilizam os feromônios para desempenhar suas atividades fundamentais. Cratosomus flavofasciatus, um coleóptero da família Curculionidae, popularmente chamado de broca-da-laranjeira, é considerado uma das principais pragas do citros, apresentando grande ocorrência em pomares sergipanos. O presente trabalho teve como objetivo avaliar características morfológicas que permitam a diferenciação sexual de C. flavosfaciatus e avaliar a atratividade de C. flavosfaciatus aos compostos sintéticos que compõem o feromônio de agregação dessa espécie e à suas plantas hospedeiras. Para verificar o dimorfismo sexual de C. flavofasciatus, primeiramente foi feito uma análise de morfometria geométrica utilizando 80 indivíduos adultos de cada sexo. Foram feitos 27 marcos anatômicos (landmarks) na região ventral em cada indivíduo. Os marcos anatômicos 2, 9, 10, 11, 18 e 21 foram os que mais contribuíram para a distinção entre machos e fêmeas, os quais representam a região do rostro, a porção final do abdômen e o final do tórax. Para confirmação do sexo, foi realizada também a retirada da genitália de ambos os sexos. Nas fêmeas foi possível o reconhecimento das seguintes estruturas: esternito VIII e bursa copulatrix. Já nos machos foi possível observar a espícula gastral e o edeago com par de parâmeros. A Anova de Procrustes demonstrou diferença significativa da forma (P < 0,001) e do tamanho (centróide) (P < 0,001) entre os sexos, porém não houve diferença da forma em relação ao tamanho (P = 0,229) bem como da forma em relação ao sexo em conjunto com o tamanho (P = 0,707). A análise de componentes principais demonstrou uma evidente diferenciação entre os sexos com base na região ventral da espécie. Os dois primeiros componentes principais explicaram 51,91% (PC1 + PC2: 39,56% + 12,35%) da variação da forma. A análise de discriminantes indicou diferença significativa (teste de permutação = 10000 permutações; P < 0,001) quanto ao dimorfismo sexual da forma da região ventral. A determinação do sexo em adultos de C. flavofasciatus através do último esternito abdominal é tão precisa quanto à dissecação da genitália. A resposta comportamental de C. flavofasciatus aos compostos feromonais sintéticos (mistura de 2-((1R, 2S)-1-metil-2-(prop-1-en-2-il)ciclobutil)etanol (grandisol), (E)-2-(3,3-dimetilciclohexilideno)etanol (álcool E) e (Z)-2-(3,3-dimetilciclohexilideno)etanol (álcool Z)) e para suas plantas hospedeiras Cordia curassavica (Maria-Preta) e Citrus sinensis (Laranjeira) foi avaliada por meio de testes olfativos realizados em um olfatômetro em “Y”. Ambos os sexos foram significativamente mais atraídos para os caules de C. sinensis (P < 0,05) que para o ar filtrado. Já os testes com caules de C. curassavica atraíram significativamente somente os machos (P = 0,02). Quando os insetos tiveram a oportunidade de escolher entre caules de C. curassavica e caules de C. sinensis, os machos preferiram os de C. curassavica (P = 0,01), já as fêmeas não apresentaram preferência significativa (P > 0,05). A combinação dos voláteis de C. curassavica e C. sinensis associadas ao feromônio sintético na concentração de 100ppm foi mais atrativa para ambos os sexos (P < 0,05) que para o controle (hexano juntamente com a planta hospedeira). Por outro lado, na concentração de 10ppm, somente a associação com C. curassavica atraiu apenas os machos (P = 0,009). Tais resultados podem ser utilizados como base para testes de campo, contribuindo para o desenvolvimento de um método ambientalmente seguro e eficaz para o monitoramento da broca-da-laranjeira.

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