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Estudo dos efeitos da Ipomoea batatas (L.) Lam. na resposta inflamatória e no biofilme dental / Evaluation of the effects of Ipomoea batatas (L.) Lam. on inflammatory response and dental biofilm

Pochapski, Márcia Thaís 17 August 2018 (has links)
Orientador: Francisco Carlos Groppo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-17T06:42:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pochapski_MarciaThais_D.pdf: 4960978 bytes, checksum: c0aeb42ab2686a52248c714bbe0b69ad (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: O objetivo dessa pesquisa foi realizar o screening fitoquímico, quantificar metabólitos secundários e determinar a atividade antioxidante do extrato bruto hidroalcoólico das folhas de Ipomoea batatas (L.) Lam. (batata-doce) (EBHBD). Foi determinada também sua toxicidade, atividade antimicrobiana e anti-inflamatória. Uma formulação farmacêutica em gel contendo o EBHBD foi desenvolvida para testar o seu efeito clínico no biofilme dental e gengivite em humanos. Os testes fitoquímicos foram realizados para determinar os componentes e quantificar os metabólitos secundários. A atividade antioxidante foi determinada pelo método do fosfomolibdênio. A análise toxicológica foi feita pelo teste de viabilidade celular e com o bioensaio utilizando Artemia salina (microcrustáceo). A análise microbiológica foi realizada por meio da sensibilidade em microrganismos aeróbios. A atividade anti-inflamatória foi avaliada em cultura de fibroblastos e com os testes de edema de orelha (camundongo) e pata (rato). A formulação em gel foi desenvolvida com EBHBD em hidroxietilicelulose, sendo conduzidos os testes de controle de qualidade (pH, densidade absoluta, consistência e avaliação microbiológica). O efeito do gel contendo EBHBD no biofilme dental e gengivite foi estudado utilizando um modelo de gengivite experimental parcial em humanos. Vinte e cinco indivíduos foram selecionados para participar deste estudo cruzado duplo-cego, no qual foram estabelecidos três períodos experimentais de 15 dias cada um com intervalo de 10 dias. Os pacientes foram submetidos a 3 tratamentos (T): T1- Gel placebo, T2- Gel contendo EBHBD a 10%; T3- Gel de clorexidina a 2% (controle positivo). Os parâmetros avaliados foram: índice de placa; índice de sangramento marginal modificado; fluido gengival e análise microbiológica do biofilme supragengival. Os dentes analisados foram: 15, 16, 35 e 36. Os resultados do estudo fitoquímico demonstraram a presença de flavonóides, alcalóides, antraquinonas, taninos e saponinas. A quantificação de metabólicos secundários mostrou em 100 g de material vegetal seco: fenólicos totais: 662,02 ± 28,91 mg; alcalóides: 345,65 ± 15,52 mg e antraquinonas: 328,44 ± 8,17 mg. A média da atividade antioxidante relativa do EBHBD foi igual a 43% e do gel foi 57%, em relação a 100% do total de atividade antioxidante atribuída ao ácido ascórbico. O EBHBD foi considerado atóxico e sem atividade antimicrobiana de acordo com os testes realizados. Foi observada redução na liberação de citocinas pró-inflamatórias em cultura de fibroblastos gengivais de humano (p<0,05) e diminuição da atividade anti-inflamatória no edema de orelha em camundongos (redução de 27%) e no edema de pata em ratos (redução de 24%). No estudo clínico não se observaram diferenças estatísticas (p>0,05) entre os parâmetros avaliados (índice de placa, sangramento marginal, fluído gengival e contagem de unidades formadoras de colônias de biofilme supragengival). Dentro das limitações deste estudo, sugere-se que o EBHBD apresentou moderada atividade antioxidante e propriedades anti-inflamatórias in vitro, porém não apresentou efeito clínico sobre biofilme dental e inflamação gengival / Abstract: The aim of this research was to perform the phytochemical screening, secondary metabolites quantification and determine the antioxidant activity of crude extract of the leaves of Ipomoea batatas (L.) Lam. (sweet potato) (EBHBD). The crude toxicity, antimicrobial activity and anti-inflammatory properties were also determined. A gel pharmaceutical formulation containing EBHBD was developed and evaluated the clinical effect on dental biofilm and gingivitis in humans. Phytochemical tests were conducted to determine the components and quantify secondary metabolites. The antioxidant activity was determined by the phosphomolybdenum method. Toxicological bioassays were carried out on brine shrimp (Artemia salina) and cell viability test. The Antimicrobial activity was performed on aerobic microorganisms. The anti-inflammatory activity was assessed in fibroblast cell culture and on the ear (mouse) and paw (rats) edema tests. The EBHBD hidroxietilicelulose gel formulation was developed and control quality tests were conducted (pH, absolute density, consistence and microbiological analysis). The effect of EBHBD gel on plaque and gingivitis was studied using an experimental model of partial gingivitis in humans. Twenty-five individuals were selected to participate in this double-blind crossover study, with three experimental periods of 15 days each with an interval of 10 days. The patients underwent three treatments (T): T1- Placebo gel, T2- 10% EBHBD gel T3- 2% chlorhexidine gel (positive control). The parameters evaluated were: plaque index, modified marginal bleeding index, gingival fluid and microbiological analysis of supragingival biofilm. Teeth evaluated: 15, 16, 35 and 36. The results demonstrated the presence of flavonoids, alkaloids, anthraquinones, tannins and saponins. The secondary metabolites quantification showed in 100 g of dried plant material: phenolic: 662.02 ± 28.91 mg; alkaloids: 345.65 ± 15.52 mg and anthraquinones: 328.44 ± 8.17 mg. The EBHBD antioxidant activity relative average was 43% and the 10% EBHBD gel was 57% in comparison of the ascorbic acid antioxidant activity (100%). The EBHBD was considered no toxic and no antimicrobial activity according to tests. The EBHBD reduced the release of pro-inflammatory cytokines on human gingival fibroblast cell culture (p <0.05) and decreased anti-inflammatory activity on ear edema in mouse (27% reduction) and paw edema in rats (24% reduction). In the clinical study there were no statisticaldifferences (p> 0.05) among the parameters (plaque index, marginal gingival bleeding, gingival fluid and colony-forming unit of supragingival biofilm). Within the limits of this study, it was possible suggest that the EBHBD showed moderate antioxidant and antiinflammatory properties in vitro, but showed no clinical effect on plaque and gingivitis / Doutorado / Farmacologia, Anestesiologia e Terapeutica / Doutor em Odontologia

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