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Conception, montage et caractérisation d'un système optique afin de mesurer le temps de vie de fluorescence par la méthode de comptage de photon unique corrélé au temps

Live, Ludovic Saiveng January 2008 (has links)
Ces dernières années, un besoin instrumental s'est développé au sein de notre laboratoire afin d'approfondir la caractérisation temporelle des propriétés photochimiques ainsi que photophysiques de divers systèmes fluorescents (fluorophores, structures inorganiques marquées, sondes d'ADN, structures micellaires, etc.). A partir de la mesure du temps d'émission de fluorescence, il est possible d'effectuer l'étude de la dynamique de relaxation d'un fluorophore lors de différentes circonstances (inhibition de la fluorescence, relaxation avec le solvant, anisotropie, FRET, etc.) sur une période oscillant entre quelques nanosecondes jusqu'à quelques picosecondes. Parmi les techniques disponibles pour effectuer de telles mesures, deux ont été sélectionnées et implantées dans notre laboratoire, soit la fluorimetrie de phase et de modulation dans le domaine frequentici ainsi que la fluorimetrie impulsionnelle dans le domaine temporel. Cet ouvrage porte uniquement sur la fluorimetrie impulsionnelle, dont la principale méthode est le comptage de photon unique corrélé au temps (Time-Correlated Single Photon Couniing, TCSPC). En somme, nous avons conçu un système TCSPC en géométrie confocale à partir d'une diode laser émettant à 405 nm et d'une photodiode avalanche à comptage de photons que nous avons caractérisée temporellement à l'aide de fluorophores organiques couramment utilisés (coumarin 153, érythrosine B, fluorescéine, rhodamine B, lucifer yellow). Certaines études sur des échantillons plus complexes (micelles inverses, nanoparticules de silice avec un coeur d'argent) ont aussi été entamées.

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