Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2007. / Submitted by Rebeca Araujo Mendes (bekinhamendes@gmail.com) on 2009-12-18T02:11:46Z No. of bitstreams: 1 2007_LidiaFreireAbdalla.PDF: 358902 bytes, checksum: 85db0385518ba439900890edce556742 (MD5) / Approved for entry into archive by Daniel Ribeiro(daniel@bce.unb.br) on 2009-12-23T20:46:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_LidiaFreireAbdalla.PDF: 358902 bytes, checksum: 85db0385518ba439900890edce556742 (MD5) / Made available in DSpace on 2009-12-23T20:46:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_LidiaFreireAbdalla.PDF: 358902 bytes, checksum: 85db0385518ba439900890edce556742 (MD5) Previous issue date: 2007 / O Diabetes Mellitus é uma doença multifatorial, que exige controle metabólico para evitar o desenvolvimento de complicações crônicas, pela adoção de medidas terapêuticas específicas, visando melhorar o prognóstico da doença. O presente estudo visou avaliar os benefícios da utilização do sistema de monitoramento contínuo da glicose (CGMS) comparado com métodos convencionais de controle metabólico tais como hemoglobina glicada, glicemia capilar e venosa, lipidograma e insulinemia. Foram avaliados 55 pacientes diabéticos consecutivos, recrutados do Ambulatório de Endocrinologia do Hospital Universitário de Brasília, distribuídos em dois grupos, sendo 16,4% (9/55 pacientes) portadores de diabetes mellitus tipo 1 e 83,6% (46/55 pacientes) portadores de diabetes mellitus tipo 2. Os distúrbios do metabolismo lipídico e critérios para resistência insulínica, avaliada pela freqüência de índice HOMA-IR > 2,71, foi observada em 77,8% dos pacientes diabéticos tipo 2. A hipertrigliceridemia foi observada em todos os pacientes que possuíam índice de HOMA-IR maior que 2,71. O monitoramento contínuo de glicose foi feito por 72 horas, registrou 288 medidas de glicoses intersticiais por período de 24 horas, totalizando a média de 1152 registros por paciente. Para a realização da análise de dados, foram considerados 63.360 registros da média de glicose intersticial, para o total de 55 pacientes estudados por 72 horas. Nos 55 pacientes estudados foram obtidas as médias de 11,6 2,9 leituras pareadas, com coeficiente de correlação de Pearson entre as leituras de glicose capilar realizadas no glicosímetro e as leituras de glicose intersticial realizadas pelo CGMS, r=0,86 0,14. As diferenças médias absolutas (MAD) foram calculadas e o valor obtido foi de 12,5% 7,5%, o que estabeleceu a confiabilidade na acurácia do método. A análise da amostra dos grupos estudados evidenciou que os pacientes mantiveram-se em média 32,4% do tempo acima de 180 mg/dl, 6,16% do tempo abaixo de 70 mg/dl e 61,4% do tempo em normoglicemia. Os pacientes do tipo 1 apresentaram-se com 11,7% do período com glicoses inferiores a 70 mg/dl, enquanto que no tipo 2 esse achado foi constatado em 5,1% dos casos. O CGMS evidenciou episódios de hipoglicemia que não haviam sido flagrados pelo controle de glicemia venosa ou capilar. Todavia, deve-se considerar o tempo de equilíbrio da glicose entre os compartimentos intersticial e venoso para a interpretação adequada dos resultados. A comparação entre os dados obtidos pelo CGMS e os métodos convencionais de controle da glicose, demonstrou forte correlação entre a hemoglobina glicada e o período de tempo que os pacientes permaneceram em hiperglicemia, apresentando fraca correlação com a frutosamina e a insulinemia basal. O CGMS permitiu a identificação de fenômenos fisiológicos subdiagnosticados tais como os fenômenos do alvorescer, Somogi e hipoglicemias assintomáticas. O método de monitoramento contínuo utilizado nesse estudo não permite a visualização e correção imediatas das excursões glicêmicas. ________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The Mellitus Diabetes is a multi-factorial disease, which requires intensive metabolic control in order to avoid the development of chronic complications. The metabolic control includes specific therapeutic measures aiming the improvement of the disease’s prognostic. The objective of this study is to evaluate the benefits of using the Continuous Glucose Monitoring System (CGMS) in comparison to the conventional methods of metabolic control, such as glucohemoglobin (HbA1C), capilary and venous glucose determinations, lipidogram, and insulin levels. We evaluated 55 diabetic patients from the Endocrinology Unit of the Hospital Universitario de Brasília. The patients were divided into two groups, one with 16.4% of the total number of patients (9/55 patients), which were diagnosed with diabetes mellitus type 1, and a second group, with 83.6% of all patients (46/55 patients), which presented diabetes mellitus type 2. The disturbs of the lipidic metabolism, and the criteria for insulin resistance, evaluated by using the index HOMA-IR > 2.71, were observed in 77.8% of all diabetic patients Type 2. The presence of hypertrigliceridemy was observed in all patients which presented the index HOMA-IR value larger than 2.71. The continuous monitoring of glucose was conducted during 72 hours, and we observed a total of 288 interstitial glucose determinations for each 24 hour period, totalling the average of 1,152 measurements for each patient. For the analysis of the data, we considered a total of 63,360 records of interstitial glucose, for a total of 55 patients, each observed during a 72 hour period. For the 55 patients considered in this study, we calculated the average of 11.56 ± 2.9 paired measurements, with the resulting Pearson correlation coefficient values obtained when comparing the glucose readings from the glucose meter and those interstitial glucose readings from the CGMS. The obtained Pearson correlation coefficient values were r=0.86 ± 0.14 (ideal > 0.79). The mean absolute difference values (MAD) were calculated and the obtained value was 12.5% ± 7.5% (ideal < 18%), which established the confidence levels to the accuracy of this method. The analysis of the data we had showed that the patients studied were, on average and throughout the time, 32.4% above 180 mg/dl, 6.2% below 70 mg/dl, and 61.4% of the time within the normal glucose levels. The patients from the type 1 group presented, during 11.7% of the time, glucose level lower than 70 mg/dl, while those patients from the type 2 group presented glucose level lower than 70 mg/dl during 5.1% of the considered period of time. The CGMS showed periods of hypoglicemia, which were not observed during the venous or capilar control data. On the other hand, we need to take into account the required time for the balance of glucose between the intersticial and the venous compartments for the appropriate interpretation of the results. The comparison of the data obtained using the CGMS analysis and the traditional glucose control techniques showed a strong correlation between the HbA1C and the total period of time in which the patients were kept under hyperglycemia, presenting a very weak correlation with the frutosamie and the basal insulin levels. The continuous monitoring method used in this study does not allow instantaneous pick and correction of glicemic variations.

Orientadores: Edi Lucia Sartorato, Denise Yvonne Janovitz Norato / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-27T18:22:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Reis_FernandadeCastro_M.pdf: 23985784 bytes, checksum: e92f2903bb320c3ac779c96e20940b1a (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: A doença de depósito de glicogênio do tipo Ia (GSDIa), é a forma mais comum entre as glicogenose do tipo I (GSDI), com uma freqüência de 1:100.000 nascimentos. É uma doença de herança autossômica recessiva, clinicamente caracterizada por hipoglicemia, hepatomegalia, retardo no crescimento, hiperlipidemia, hiperuricemia e acidose láctica. Esses sintomas são provocados pela deficiência da enzima glicose 6- fosfatase (G6Pase), que cataliza as etapas finais da gliconeogênese e glicogenólise através da conversão da glicose 6-fosfato (G6P) em glicose e fosfato. No passado, muitos pacientes com GSDI morriam pela doença. Atualmente, com o diagnóstico precoce e início de um tratamento contínuo e adequado, complicações como adenomas hepáticos e renais podem ser prevenidas. O isolamento do cDNA humano da G6Pase demonstrou que o gene G6PC é composto de cinco exons, possui um tamanho de 12,5Kb e se localiza no cromossomo 17. Desde sua clonagem, mais de 50 diferentes mutações foram descritas no gene. Em pacientes caucasianos provenientes dos EUA e do Noroeste europeu, as mutações R83C e Q347X são responsáveis por 22,5% e 22,4% de todos os alelos mutantes respectivamente. O diagnóstico de GSDIa pode ser feito através de testes enzimáticos e confirmado pela análise de mutação no gene G6PC. A caracterização do gene da G6Pase possibilitou a identificação de mutações que causam GSDIa. Este fato nos dá a opção de aplicar um diagnóstico baseado em análise de DNA para detecção de portadores e diagnóstico prénatal. A caracterização do gene também possibilita um insight em tomo da relação estrutura-função da catálise da G6Pase, revelando a função estrutural de aminoácidos específicos. No presente estudo, vinte e sete pacientes de GSDIa provenientes de 26 famílias não relacionadas foram investigados. O diagnóstico pela análise da atividade da enzima G6Pase em biópsia de fígado foi confirmado em apenas quatro pacientes. A estratégia dos minigenes foi utilizada para verificar o efeito das mutações intrônicas sob o mecanismo de splicing, não sendo identificados transcritos aberrantes. A perda de exons ou incorporação de fragmentos intrônicos nos exons são mecanismos mutacionais comuns, freqüentemente causados por mudanças nas seqüências conservadas de regiões de sítios de splicing. Da mesma forma seqüências fora dessas regiões também podem afetar a inclusão ou exclusão de exons. Essas alterações que atuam nos mecanismos de splicing podem estar localizadas em introns ou em exons, e padrões de splicing alternativos podem ser determinados pela visualização do tamanho do produto de transcrição. Foram identificadas oito alterações no gene G6PC, incluindo uma nova mutação de ponto encontrada até o momento somente na população brasileira, publicada por nosso grupo, duas mutações intrônicas, uma mutação silenciosa e quatro mutações de ponto previamente descritas. Foi analisado também o polimorfismo T1176C que está em associação com a mutação R83C. Esse polimorfismo pode ser utilizado como marcador para o diagnóstico de portadores e pré-natal de famílias com GSDIa que têm mutações não identificadas e que são informativas para esse marcador. Esse estudo enfatiza que a análise molecular genética é uma alternativa confiável e conveniente ao ensaio enzimático feito em biópsia de figado para o diagnóstico de GSDIa / Abstract: Glycogen storage disease type (GSD) is the most prevalent form among the glycogen storage disease type I (GSDI), with an overall frequency of 1:100.000 live births. It' s an autosomal recessive disorder clinically characterized by hypoglycemia, hepatomegaly, growth retardation, hyperlipidemia, hyperuricemia, and lactic acidemia. These symptoms are caused by a deficiency in glucose 6-phosphatase (G6Pase), which catalyzes the terminal steps in gluconeogenesis and glycogenolysis by converting glucose 6-phosphate (G6P) into glucose and phosphate. In the past, many patients with type I glycogen storage disease used to die. At present, with early diagnosis and initiation of continuous proper treatment such as hepatic and renal adenomas can be prevented. Isolation of human G6Pase cDNA showed that G6PC gene is composed of five exons, spanning approximately 12,5Kb on chromosome 17.From its cloning, more than 50 different mutations have been reported in this gene. In Caucasian patients trom the USA and from North-West Europe, R83C and Q347X account for 25.2% and 22.4% of all mutant alleles respectively. Diagnosis of GSDla can be done by enzymological tests and confirmed by mutation analysis of the G6PC gene. The characterization of the G6Pase gene enabled the identification of the mutations causing GSDla. This fact provides an option on applying DNA-analysis based diagnosis for carrier detection and prenatal diagnosis. The characterization of the gene also provides an insight into the structure-function relation of the G6Pase catalysis, by revealing the structural roles of specific amino acid residues. In the present study, twenty seven GSDla patients trom twenty six unrelated families were investigated. The diagnosis by the G6Pase enzyme activity analysis in the liver biopsy was confirmed only in four patients. The minigenes strategy was used in order to verify the effect of the intronic mutations in the splicing mechanism. No aberrant transcripts were identified. Exon skipping or exon intronic fragment incorporation is an usual mutational mechanism, often caused by changes in the consensus sequences at splicing site region. Likewise, sequences outside these regions can also affect the inclusion or exclusion of exons. Such splicing enhancers may be located in introns or exons, and alternative splicing pattems could be determined by visualization of a sized transcription product. Eight alterations in the G6PC gene were identified, including a new point mutation found so far only in Brazilian population and published by our group, two intronic mutations, a silent mutation, and four point mutations previously described. It was also analyzed the T1176C polymorphism that is in association with the R83C mutation. This polymorphism can be used as a marker in carrier and prenatal diagnosis of GSDla families which have unidentified mutations and are informative for this marker. This study emphasizes that molecular genetic analysis is a reliable and convenient altemative to the enzyme assay in a tresh liver biopsy specimen to diagnose GSDla / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Antonio Carlos Boschero / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-29T00:26:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Nunes_WiltonMarlindoSantana_M.pdf: 2015825 bytes, checksum: 6eb45e8857bc5c00df750d8c4caf8378 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Dentre os vários compostos inorgânicos que mimetizam as ações da insulina os derivados do vanadato são, sem dúvida, os mais estudados. No presente trabalho, analisamos os efeitos de um desses derivados, o tungstato de sódio, sobre a homeostasia da glicose e a secreção de insulina em ilhotas de Langerhans isoladas de ratos tornados resistentes à insulina pela dexametasona. Quinze dias antes dos experimentos, ratos machos adultos da linhagem Wistar foram distribuídos casualmente em quatro grupos, a saber: controle, dexametasona, tungstato e dexametasona + tungstato. Durante os quinze dias, os ratos dos grupos controle e dexametasona tiveram livre acesso à água e ração. Os ratos dos grupos tungstato e dexametasona + tungstato receberam tungstato de sódio (2mg/ml), dissolvido na água de beber. Nos últimos 5 dias que precederam os experimentos, os ratos dos grupos dexametasona e dexametasona + tungstato receberam, via intraperitoneal, doses diárias de dexametasona (1 mg/kg- / Abstract: Among the severa I inorganic compounds that mimic the effect of insulin vanadium derivatives are the most widely studied. In the present work we have analyzed the effects of tungstate on glucose homeostasis and insulin secretion in healthy and in insulin resistant rats by dexamethasone. Fifteen days before the experiments the rats were randomly distributed in four groups: control, dexamethasone, tungstate and dexamethasone + tungstate. Control and dexamethasone groups had free access to water. Tungstate and dexamethasone + tungstate groups received tungstate dissolved in the drink water (2mg/ml). The dexamethasone and dexamethasone + tungstate groups received during the last 5 days daily doses of 1 mg/Kg-1 of dexamethasone, intraperitoneally. In insulin resistant rats, tungstate treatment normalized plasma glucose whereas plasma insulin and triglycerides remained significantly higher than controls. The glucose disappearance rate after an ivlTT and the glucose uptake by soleus muscle of insulin resistant rats were lower compared to control rats and was normalized by tungstate. The dose-response curve of insulin secretion (5.6 to 27.7 mM glucose) in isolated islets from dexamethasone-treated rats was shifted to the left compared to control islets. Administration of tungstate to these animais induced a dose-response curve closar to contrai islets. The EC50 for the dose-response curves were 13.7, 7.9, 15.7 and 11.8 mM glucose for contrai, ...J dexamethasone, tungstate and dexamethasone + tungstate-treated rats, respectively. In conclusion, tungstate-induced plasma glucose normalization seems to be, at least in part, dependent on the restoration of glucose uptake by muscle cells of insulin resistant rats / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Carlos Roque Duarte Correia / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-24T07:29:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Patto_DanieladaCunhaSouza_M.pdf: 2344681 bytes, checksum: 3616b3a70a46b22c485673cdc2c691c6 (MD5) Previous issue date: 1998 / Mestrado

Made available in DSpace on 2019-03-30T00:12:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2016-12-16 / Background: Telangiectasias and reticular veins are highly prevalent worldwide and constitute the most common cause of esthetic vascular surgery among patients with varicose disease in the lower limbs. In Brazil, the condition is most often treated by angiologists and vascular surgeons using sclerotherapy chemical with 75% glucose. The cryo-sclerotherapy combined with skin cooling and sclerotherapy, in both cases, a solution containing hypertonic glucose and lidocaine are safe methods and effectives. Purpose: To evaluate the efficiency of the two methods in the same patient with regard to pain, clearance percentage and skin hyperpigmentation. Materials and methods: This was an 8-month prospective, random, blind, descriptive and analytical study conducted between february and september 2016. The sample included 29 female patients aged 24-65 years (mean: 43.8) presenting telangiectasias with or without reticular veins with classification CEAP (clinical, etiologic, anatomic and pathophysiology) class 1 on their thighs, legs and feet, distributed into two groups: GI - telangiectasias without reticular veins; GII - telangiectasias with reticular veins. Each patient was treated with both methods, one in each limb, selected at random. Two independent vascular surgeons evaluated treatment efficiency by comparing photos taken at baseline and after therapy. Pain was scored on an analog scale. Results: Pain was significantly less intense in limbs treated with cryo-sclerotherapy combined with skin cooling, but the methods did not differ significantly with regard to clearance percentage and adverse effects. No cases of allergy, vertigo, hypotension, visual changes or deep vein thrombosis were observed. Conclusion: Both methods were found to be safe and provide esthetic improvement of telangiectasias and reticular veins, but cryo-sclerotherapy combined with skin cooling reduced pain more efficiently than sclerotherapy. Keywords: Cryo-sclerotherapy; Glucose; Sclerotherapy. / Introdução: As telangiectasias e veias reticulares são bastante prevalentes na população mundial, sendo a causa mais comum de procura das pacientes ao consultório dos cirurgiões vasculares com o objetivo de corrigir os danos estéticos causados pelas varizes nos membros inferiores. A escleroterapia química com glicose a 75% é o tratamento mais utilizado pelos angiologistas e cirurgiões vasculares no Brasil. A crioescleroterapia associada com resfriamento cutâneo com ar gelado e a escleroterapia com glicose hipertônica e lidocaína são métodos seguros e eficazes. Objetivo: Avaliar a eficiência entre os métodos de tratamento na mesma paciente com as seguintes variáveis: dor, percentual de desaparecimento das varizes e aparecimento de hiperpigmentação. Material e Métodos: Foi realizado um estudo prospectivo, randomizado, cego, descritivo e analítico com duração de 8 meses (fevereiro a setembro de 2016). O estudo analisou 29 pacientes, do sexo feminino, entre 24 a 65 anos com média de idade 43,8 anos, com telangiectasias com ou sem veias reticulares com classificação CEAP (clínica, etiológica, anatômica e fisiopatológica) classe 1 em coxas, pernas e pés. Foram divididas em dois grupos: (GI) com telangiectasias sem veias reticulares e outro grupo (GII) com telangiectasias com veias reticulares, e submetidas a um tipo de tratamento em um membro inferior e a outro tipo de tratamento no membro inferior contralateral. A escolha dos métodos de tratamento foi feita de forma aleatória. Foi analisada a sequência de evolução da documentação fotográfica antes e depois por dois cirurgiões vasculares de forma independente. Foi utilizada a escala analógica da dor como registro para comparações. Resultados: A percepção da intensidade da dor foi significativamente menor nas pernas tratadas com crioescleroterapia associada ao resfriamento cutâneo com ar gelado. Quanto ao parâmetro de desaparecimento de varizes e efeitos colaterais não houve diferença estatística entre os diferentes métodos. No estudo ocorreu ausência de efeitos colaterais graves, tais como alergias, tonturas, hipotensão, alterações visuais e trombose venosa profunda. Conclusão: Ambas os métodos foram seguros e mostraram benefício estético. Observou-se que a técnica de crioescleroterapia foi mais eficiente em reduzir a dor comparada com a escleroterapia convencional. Palavras-chave: Crioescleroterapia; Glicose; Escleroterapia.

A monitorização da glicemia é a forma mais popular de acompanhar o tratamento do diabetes e entender o funcionamento do organismo em relação a certos alimentos, à prática de atividades físicas e à administração de medicamentos. O presente trabalho teve como objetivo a produção de sensores para detecção de glicose, utilizando polipirrol (PPi) disperso, poli(3,4-etilenodioxitiofeno) (PEDOT) submetido a tratamento corona ou poli(hidroximetil-3,4-etilenodioxitiofeno) (PEDOT-OH) como transdutores e glicose oxidase (GOx) como enzima responsável pela catálise da glicose. O polipirrol foi obtido em dispersão através de síntese química com poli (óxido de etileno) (PEO), para facilitar o método de aplicação no sensor por casting, enquanto que o PEDOT e o PEDOT-OH foram sintetizados eletroquimicamente proporcionando excelente cobertura do eletrodo de trabalho. A enzima GOx foi imobilizada por adsorção sobre os três diferentes sensores produzidos com PPi/PEO, PEDOT ou PEDOT-OH, ainda foi produzido um biossensor com GOx imobilizada por entrapment ou confinamento durante a síntese eletroquímica do PEDOT-OH, com o propósito de avaliar o melhor método de imobilização enzimática para a produção de um biossensor sensível e seletivo. A morfologia e as estruturas dos biossensores foram analisados por microscopia eletrônica de varredura, espectroscopia de energia dispersiva de raios-X, microscopia de força atômica, espectroscopia no infravermelho e espectroscopia RAMAN. A eletroatividade dos polímeros e das etapas de desenvolvimento dos sensores foi verificada com voltametria cíclica. Provou-se, através de analises de cronoamperometria, que os sensores desenvolvidos são capazes de detectar diferentes concentrações de glicose, além de obter a equação característica, que determina a densidade de corrente elétrica em função da concentração de substrato utilizado. O sensor de PEDOT-OH não necessitou da enzima GOx para a detecção de glicose, inclusive em amostras sanguíneas. / Blood glucose monitoring is the most popular way of monitoring the treatment of diabetes and understanding the functioning of the body in relation to certain foods, the practice of physical activity and medication administration. This study aimed to produce sensors for glucose detection using dispersed polypyrrole (PPi), poly(3,4-ethylenedioxythiophene) (PEDOT) subjected to corona treatment or poly(hydroxymethyl-3,4-ethylenedioxythiophene) (PEDOT -OH) as transducers and glucose oxidase (GOx) as the enzyme responsible for the catalysis of glucose. The polypyrrole dispersion was obtained by chemical synthesis with poly(ethylene oxide) (PEO), in order to facilitate the application method in the sensor by casting, while the PEDOT and PEDOT-OH were synthesized electrochemically providing excellent cover to work electrode. The GOx enzyme was immobilized by adsorption on three different sensors made with PPi/PEO, PEDOT or PEDOT-OH; it was also produced a biosensor with GOx immobilized by entrapment during the electrochemical synthesis of PEDOT-OH, with the purpose of evaluating the best method for enzyme immobilization for producing a sensitive and selective biosensor. The morphology and structures of biosensors were analyzed by scanning electron microscopy, energy dispersive X-ray, atomic force microscopy, infrared spectroscopy and Raman spectroscopy. The electroactivity of polymers and sensor development stages was checked with cyclic voltammetry. It has been proven through analysis of chronoamperometry that it was developed sensors capable of detecting different concentration of glucose and allow the obtaining of the characteristic equation, which determines the current density as a function of the substrate concentration used. The PEDOT-OH sensor does not require the GOx enzyme for the detection of glucose, including blood samples.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2008. / Submitted by Guimaraes Jacqueline (jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2009-05-11T11:45:22Z No. of bitstreams: 1 2008_AngelicaAmorimAmato.pdf: 2144968 bytes, checksum: 0be7dca3570a2aded6a2c838981942df (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2009-05-11T13:17:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_AngelicaAmorimAmato.pdf: 2144968 bytes, checksum: 0be7dca3570a2aded6a2c838981942df (MD5) / Made available in DSpace on 2009-05-11T13:17:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_AngelicaAmorimAmato.pdf: 2144968 bytes, checksum: 0be7dca3570a2aded6a2c838981942df (MD5) Previous issue date: 2008 / As tiazolidinedionas (TZDs) melhoram a sensibilidade insulínica e a homeostase da glicose em diversos modelos animais de obesidade e diabetes, e também em humanos. Esses benefícios são atribuídos, em grande parte, aos efeitos antiinflamatórios da ativação do receptor gama ativado por proliferadores peroxissomais (PPARg). No entanto, a utilização clínica das TZDs é limitada por retenção hídrica, ganho ponderal e adipogênese, e recentemente tem sido relacionada a aumento da mortalidade cardiovascular e perda de massa óssea. O mecanismo desses efeitos não é completamente definido, mas acredita-se que possa envolver ativação suprafisiológica do PPARg, e até mesmo ações independentes da ativação do PPARg pelas TZDs. Essas limitações aumentaram o interesse pela identificação de ligantes de PPARg que mantenham os efeitos antiinflamatórios benéficos da ativação do receptor, sem os efeitos desfavoráveis das TZDs. Acredita-se que a ativação parcial e específica do PPARg, assim como sua modulação diferencial em tecidos distintos, possa ser mais efetiva e segura que a ativação completa e não seletiva pelas TZDs. Com o objetivo de identificar novos ligantes de PPARg, diversas benzilideno- e acridinilideno-TZDs sintéticas foram investigadas quanto à atividade agonista em PPAR por meio de ensaios de gene repórter em pró-monócitos humanos U-937. Somente o GQ-16 induziu a atividade transcricional do PPARg, e apresentou características de agonista parcial do receptor. Esse composto não ativou PPARa, -d ou RXRa, nem antagonizou a atividade transcricional do PPARg induzida pela rosiglitazona. Estudos in vitro mostraram que o GQ-16 se ligou diretamente ao domínio de ligação ao ligante do PPARg, com menor afinidade que a rosiglitazona e que, em concordância com seu efeito agonista, induziu a interação entre o PPARg e o coativador SRC-1. O GQ-16 também foi capaz de induzir a adipogênese em cultura de células, embora em menor intensidade que a rosiglitazona. Esses resultados indicam que o GQ-16 é um agonista parcial e seletivo do PPARg e apresenta menor potencial adipogênico, características que o distinguem das TZDs clássicas. As possíveis vantagens dessas características devem ser confirmadas por estudos in vivo. Além disso, a definição do modo de ligação do GQ-16 ao PPARg por estudos cristalográficos poderia contribuir para melhor compreensão dos determinantes da especificidade da ligação de ligantes entre os diferentes isotipos de PPARs e, assim, para o desenvolvimento de agonistas específicos de PPARg, possivelmente com efeitos mais favoráveis que os das TZDs clássicas. ______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Thiazolidinediones (TZDs) can improve whole body insulin sensitivity and ameliorate glucose metabolism in many animal models of obesity and diabetes, and also in humans. These beneficial effects are largely attributed to the antiinflammatory actions of activated peroxisome proliferator-activated receptor gamma (PPARg). Despite the established therapeutic value of TZDs, their clinical use is limited by fluid retention, weight gain and adipogenesis, and more recently these agents have been associated with increased cardiovascular mortality and bone loss. The mechanisms underlying these deleterious effects are not yet clear, but may be related to supraphysiological activation of PPARg, and also to PPARg independent actions of TZDs. These concerns have increased the interest for ligands which maintain the beneficial metabolic and anti-inflammatory effects of PPARg activation but mitigate the documented unfavorable effects of TZDs. There is evidence that partial and specific activation of PPARg, and also its selective modulation in different tissues, might be more effective and safe, in contrast to full and nonspecific activation by TZDs. Aiming to identify novel PPARg ligands, several synthetic benzilidene and acridinylidene TZDs were screened for PPAR agonist activity using reporter gene assay in U-937 human pro-monocytes. GQ-16 was the only novel TZD found to have agonist activity on PPARg, and displayed features of a partial agonist. It did not activate PPARa, -d or RXRa, neither influenced PPARg transcriptional activity induced by rosiglitazone. Competition assays showed GQ-16 bound directly to the ligand binding domain of PPARg with reduced affinity when compared to rosiglitazone. In support of GQ-16 agonist effect on PPARg transcriptional activity, glutatione-S-transferase pull-down experiments showed it induced the interaction between PPARg and SRC-1. The adipogenic potential of GQ-16 was less pronounced than that of rosiglitazone. Collectively, these results indicate GQ16 is a partial and specific agonist for PPARg with reduced adipogenic potential. These features differentiate this novel compound from TZDs currently used in clinical practice, and its potential therapeutic advantages should be confirmed by in vivo studies. In addition, although the exact binding mode of GQ-16 to PPARg still requires the resolution of a crystal structure, these results could provide insights into the determinants of ligand binding selectivity between PPARg and the other PPAR isotypes, and hence contribute to the development of new PPARg-selective ligands with improved specificity and metabolic effects.

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FIGUEIREDO, Lanesse Medeiros de. Efeito da acupuntura e da eletro acupuntura sobre a glicemia lactacemia e as concentrações de lactato no fígado e rim de ratos sadios. 2009. 87 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2009. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2016-03-07T13:19:38Z No. of bitstreams: 1 2009_dis_lmfigueiredo.pdf: 1247442 bytes, checksum: bbbefbe2ba9dafba54aaee552ed20deb (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2016-03-07T14:08:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_dis_lmfigueiredo.pdf: 1247442 bytes, checksum: bbbefbe2ba9dafba54aaee552ed20deb (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-07T14:08:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_dis_lmfigueiredo.pdf: 1247442 bytes, checksum: bbbefbe2ba9dafba54aaee552ed20deb (MD5) Previous issue date: 2009 / Acupuncture (Ac) and electroacupuncture (EAc) have been widely used in clinical practice for the treatment of various diseases. Traditional Chinese medicine (TCM) recommends the use of acupoints Zusanli (E-36) and Zhongwan (RM-12) for relief of symptoms of diabetes mellitus. Ac and EAc stimulation may release some endogenous opioids, including - endorphins, enhancing insulin secretion. The aim of this study was to evaluate the effects of Ac and EAc on acupoints ST-36 and RM-12 on glycemia, lactacemia and liver and kidneys lactate concentrations in healthy rats. In this study, 48 rats were divided into 4 groups (baseline [GVB] , Ac, EAc10Hz and EAc100Hz) and subdivided into 2 subgroups according to the time of samples collection (T-30, immediately after the end of the session or Ac or EAc and T-60: 30 minutes after the end of the session). All rats were anesthetized and experimental groups (Ac, EAc10Hz and EAc100Hz) were submitted respectively to the EAc and Ac (10 Hz and 100 Hz) on acupoints ST-36 and RM-12 for 30 minutes. Glucose, lactate and LDH were assayed in the blood. Tissue lactate concentration was assayed in liver and kidney of rats at T-30 and T-60 timepoints. Stimulation of acupoints ST-36 and RM-12 by EAc 10Hz significantly reduced blood glucose levels in healthy rats, at the end of electrical stimulation (190.80 ± 24.88 vs. 138.50 ± 21.09, p> 0.001) and 30 minutes later (186.30 ± 23.76 vs. 134.10 ± 25.65 , p> 0.001). Using a frequency 10 times higher (100Hz) similar results were obtained (T-30, 186.30 ± 23.76 vs. 99.17 ± 8.79, p> 0.001, and T-60, 190.80 ± 24.88 vs. 113.40 ± 7.37, p> 0.001). Ac stimulation did not significantly alter blood glucose. There was also a significant reduction in the concentrations of LDH immediately after the acupuncture session and 30 minutes later, both in animals subjected to Ac (T-30, 518.20 ± 43.31 vs. 354.80 ± 44.66, p <0.001, T-60, 637.80 ± 61.01 vs. 325.70 ± 10.54, p <0.001) and EAc (10Hz: T-30, 518.20 ± 43.31 vs. 286.50 ± 59.86, p <0.001, T-60, 637.80 ± 61.01 vs 268.80 ± 43.51, p <0.001 and 100Hz: T-30, 518.20 ± 43.31 vs. 213, 80 ± 24.85, p <0.001, T- 60, 637.80 ± 61.01 vs 188.20 ± 24.00, p <0.001), suggesting a lower anaerobic metabolism. In this study, a significant decrease in serum lactate 30 minutes after the start of the study in rats subjected to EAc 100 Hz suggests the prevalence of aerobic glycolysis (2.10 ± 0.23 vs. 1.19 ± 1.02, p < 0.001). Similar result was observed in the levels of lactate in the liver (T-60, 10 Hz: 1.92 ± 0.42 vs. 0.69 ± 0.29, p <0.001 and 100 Hz: 1.92 ± 0.42 vs. 0.44 ± 0.21, p <0.001) and kidney (T-30, 100 Hz: 1.86 ± 0.87 vs. 0.91 ± 0.38, p <0.05). The results of this study show that the Ac and EAc, can reduce the concentrations of blood glucose in hyperglycemic animals. Higher frequencies have greater hypoglycemic effect. The reduction of blood glucose should be a consequence of the action of endogenous opioids and - endorphin, as suggested in previous studies. The mechanism of reduction of lactate and LDH appears to be related to a prevalence of aerobic glycolysis. / A Acupuntura (Ac) e a Eletroacupuntura (EAc) tem sido amplamente utilizadas na prática clínica para o tratamento de várias doenças. A Medicina Tradicional Chinesa (MTC) preconiza o uso dos acupontos Zusanli (E-36) e Zhongwan (RM-12) para alívio dos sintomas de diabetes mellitus. Por ação da Ac e EAc, ocorre liberação de opióides endógenos, incluindo β-endorfinas, que comprovadamente estimulam a secreção de insulina. O objetivo desse estudo foi avaliar os efeitos da Ac e EAc nos acupontos E-36 e RM-12 sobre as concentrações de glicose e lactato no sangue, fígado e rim de ratos sadios. No presente estudo, 48 ratos foram divididos em 4 grupos (Valores Basais, Ac, EAc10Hz e EAc100Hz) e subdivididos em 2 subgrupos de acordo com os tempos de coleta dos substratos (T-30: imediatamente após o término da sessão de Ac ou EAc e T-60: 30 minutos após o término da sessão). Todos os ratos foram anestesiados e os grupos experimentais (Ac, EAc10Hz e EAc100Hz) foram submetidos, respectivamente, à Ac e à EAc (10 Hz e 100 Hz) nos acupontos E-36 e RM-12, durante 30 minutos. Foram dosadas as concentrações de glicose, lactato e LDH no sangue, fígado e rim dos animais nos tempos T-30 e T-60. A estimulação dos acupontos E-36 e RM-12 por EAc de 10Hz reduziu significativamente a glicemia em ratos sadios, ao término da estimulação elétrica (190,80±24,88 vs. 138,50±21,09, p>0,001) e 30 minutos mais tarde (186,30±23,76 vs. 134,10±25,65, p>0,001). Utilizando-se uma freqüência 10 vezes maior (100Hz) demonstrou-se resultado semelhante (T-30, 186,30±23,76 vs. 99,17±8,79, p>0,001; e T-60, 190,80±24,88 vs. 113,40±7,37, p>0,001). A Ac não alterou significativamente a glicemia. Houve também redução significante das concentrações de LDH imediatamente após o término da sessão de acupuntura e 30 minutos depois, tanto nos animais submetidos à AC (T-30, 518,20± 43,31 vs. 354,80±44,66, p<0,001; T-60, 637,80±61,01 vs. 325,70±10,54, p<0,001) quanto à EA (10Hz: T-30, 518,20± 43,31 vs. 286,50±59,86, p<0,001; T-60, 637,80±61,01 vs 268,80±43,51, p<0,001 e 100Hz: T-30, 518,20± 43,31 vs. 213,80±24,85, p<0,001; T-60, 637,80±61,01 vs 188,20±24,00, p<0,001), sugerindo um menor metabolismo anaeróbio. No presente estudo, a redução significante do lactato sérico 30 minutos após o início do estudo em ratos submetidos à EAc com 100 Hz sugere prevalência da glicólise aeróbica (2,10±0,23 vs. 1,19±1,02, p<0,001). Resultado semelhante foi observado nos níveis de lactato no fígado (T-60, 10 Hz: 1,92±0,42 vs. 0,69±0,29, p<0,001 e 100 Hz: 1,92±0,42 vs. 0,44±0,21, p<0,001) e rim (T-30, 100 Hz: 1,86±0,87 vs. 0,91±0,38, p<0,05). Os resultados deste estudo mostram que a Ac e a EAc nos animais hiperglicêmicos podem reduzir as concentrações de glicose no sangue. Freqüências maiores tem maior efeito hipoglicemiante. A redução da glicemia deve ser conseqüência da ação de opióides endógenos e da β-endorfina, como sugerido em estudos anteriores. O mecanismo e redução das concentrações de lactato e LDH parece estar relacionado a uma prevalência da glicólise aeróbica.

A monitorização da glicemia é a forma mais popular de acompanhar o tratamento do diabetes e entender o funcionamento do organismo em relação a certos alimentos, à prática de atividades físicas e à administração de medicamentos. O presente trabalho teve como objetivo a produção de sensores para detecção de glicose, utilizando polipirrol (PPi) disperso, poli(3,4-etilenodioxitiofeno) (PEDOT) submetido a tratamento corona ou poli(hidroximetil-3,4-etilenodioxitiofeno) (PEDOT-OH) como transdutores e glicose oxidase (GOx) como enzima responsável pela catálise da glicose. O polipirrol foi obtido em dispersão através de síntese química com poli (óxido de etileno) (PEO), para facilitar o método de aplicação no sensor por casting, enquanto que o PEDOT e o PEDOT-OH foram sintetizados eletroquimicamente proporcionando excelente cobertura do eletrodo de trabalho. A enzima GOx foi imobilizada por adsorção sobre os três diferentes sensores produzidos com PPi/PEO, PEDOT ou PEDOT-OH, ainda foi produzido um biossensor com GOx imobilizada por entrapment ou confinamento durante a síntese eletroquímica do PEDOT-OH, com o propósito de avaliar o melhor método de imobilização enzimática para a produção de um biossensor sensível e seletivo. A morfologia e as estruturas dos biossensores foram analisados por microscopia eletrônica de varredura, espectroscopia de energia dispersiva de raios-X, microscopia de força atômica, espectroscopia no infravermelho e espectroscopia RAMAN. A eletroatividade dos polímeros e das etapas de desenvolvimento dos sensores foi verificada com voltametria cíclica. Provou-se, através de analises de cronoamperometria, que os sensores desenvolvidos são capazes de detectar diferentes concentrações de glicose, além de obter a equação característica, que determina a densidade de corrente elétrica em função da concentração de substrato utilizado. O sensor de PEDOT-OH não necessitou da enzima GOx para a detecção de glicose, inclusive em amostras sanguíneas. / Blood glucose monitoring is the most popular way of monitoring the treatment of diabetes and understanding the functioning of the body in relation to certain foods, the practice of physical activity and medication administration. This study aimed to produce sensors for glucose detection using dispersed polypyrrole (PPi), poly(3,4-ethylenedioxythiophene) (PEDOT) subjected to corona treatment or poly(hydroxymethyl-3,4-ethylenedioxythiophene) (PEDOT -OH) as transducers and glucose oxidase (GOx) as the enzyme responsible for the catalysis of glucose. The polypyrrole dispersion was obtained by chemical synthesis with poly(ethylene oxide) (PEO), in order to facilitate the application method in the sensor by casting, while the PEDOT and PEDOT-OH were synthesized electrochemically providing excellent cover to work electrode. The GOx enzyme was immobilized by adsorption on three different sensors made with PPi/PEO, PEDOT or PEDOT-OH; it was also produced a biosensor with GOx immobilized by entrapment during the electrochemical synthesis of PEDOT-OH, with the purpose of evaluating the best method for enzyme immobilization for producing a sensitive and selective biosensor. The morphology and structures of biosensors were analyzed by scanning electron microscopy, energy dispersive X-ray, atomic force microscopy, infrared spectroscopy and Raman spectroscopy. The electroactivity of polymers and sensor development stages was checked with cyclic voltammetry. It has been proven through analysis of chronoamperometry that it was developed sensors capable of detecting different concentration of glucose and allow the obtaining of the characteristic equation, which determines the current density as a function of the substrate concentration used. The PEDOT-OH sensor does not require the GOx enzyme for the detection of glucose, including blood samples.