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Production de gencive humaine par génie tissulaire pour le traitement des récessions gingivales : étude in vitro

Luitaud, Cyril 12 April 2018 (has links)
Les récessions gingivales, définies par le déplacement des tissus parodontaux apicalement à la jonction énamo-cémentaire, ont un impact considérable sur la qualité de vie. Le but du traitement de ces récessions est de prévenir la douleur, la sensibilité dentaire, la perte de vitalité dentaire et les caries radiculaires. Le traitement de référence de ces récessions est l'utilisation d'un tissu autologue provenant du palais. Cependant, cela comporte de nombreuses contraintes. L'anatomie palatine peut limiter la quantité de tissu disponible et la douleur post-opératoire sera plus importante car il existe un deuxième site opératoire. Pour surpasser ces contraintes, une procédure non invasive est hautement recommandée. Ce projet de recherche démontre que des cellules autologues (fibroblastes et cellules épithéliales) ensemencées sur une membrane biodégradable permettent de créer une muqueuse orale prête à être greffée. Après leur isolement et leur ensemencement dans une matrice coUagénique, les fibroblastes adhèrent et colonisent tout l'espace disponible au niveau de cette matrice coUagénique. La croissance des fibroblastes est importante lorsqu'ils sont ensemencés dans cette matrice. Cette croissance est dépendante du temps. D'un autre côté, les cellules épithéliales ensemencées sur la matrice adhèrent et colonisent la portion supérieure de cette dernière. Dans des conditions appropriées, les cellules épithéliales prolifèrent et se stratifient, donnant ainsi un epithelium kératinisé. Les résultats d'une co-culture (matrice coUagénique ensemencée avec des fibroblastes puis des cellules épithéliales) démontrent la création d'une muqueuse orale produite par génie tissulaire qui pourrait être utilisée pour le traitement des récessions. / Gingival recessions, defined as the displacement of the marginal tissue apical to the cementoenamel junction, have a considerable impact on day-to-day life and quality of life. The aim of gingival recession treatments, is to prevent pain, tooth sensitivity, loss of vitality of teeth and root caries. The gold standard for treating gingival recession is the use of autologous palatal tissue graft. However, this is hampered by significant limitations such as multiple areas requiring tissue grafts, palatal anatomy that may limit the amount of autologous tissue that can be collected, increased invasive pain related to the presence of two surgical sites. To overcome these limitations, a non-invasive procedure is highly recommended. This research proposal is aimed at demonstrating that autologous gingival cells (fibroblasts and epithelial cells) in combination with a safe biodegradable biomaterial can be used to engineer oral mucosa tissue for grafting. Following their extraction and seeding into a collagen matrix, human gingival fibroblast adhere and populate almost all available space in the scaffold. The cell growth assessment showed that fibroblasts significantly proliferate when seeded into the collagen matrix. The fibroblasts growth tends to be time dependent. On the other hand, human gingival cell cultured onto the collagen matrix showed that these cells adhere and populate the upper layers of the scaffold. Having appropriate growth conditions, epithelial cells proliferate and stratify. Epithelial structure was significantly improved when epithelial cells were cultured onto connective tissue (collagen matrix populated with gingival fibroblasts). Altogether, the results point out the usefulness of engineered oral mucosa tissue as an alternative to replace damaged gingiva.
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Greffe de gencive humaine produite par génie tissulaire : étude expérimentale

Allaire, Patricia 13 April 2018 (has links)
Les objectifs de cette étude est de produire un équivalent de gencive humaine par génie tissulaire et d'évaluer la régénération d'une structure de gencive humaine in vivo grâce à un modèle animal. Nos travaux montrent qu'après greffe sur une souris immunodéprimée, le tissu obtenu présente une jonction épithélio-conjonctive linéaire, ainsi qu'un amincissement de l'épithélium entre les jours 15 et 60 suivant la greffe. Une stratification des couches cellulaires épithéliales est visible aux différents stages de guerison. Les cellules épithéliales sont plus cuboïdes à la base, et s'aplatissent vers les couches externes. Les cellules épithéliales démontrent également un patron de différenciation et de prolifération. La membrane basale, formée de glycoprotéines, de laminine et de collagène IV est présente. Ces différentes protéines sont présentes dans les tissus de gencives normales. Ceci montre donc que la gencive produite par génie tissulaire contribue à la régénération in vitro d'un tissu gingival structuré et fonctionnel. De plus, nos analyses montrent des vaisseaux sanguins au niveau du tissu conjonctif, ce qui explique la structure normale du nouveau tissu. L'ensemble de nos travaux démontre la faisabilité d'utiliser la gencive humaine produite par génie tissulaire dans le traitement des défauts intra-oraux

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