A utilização do corticosteróide antenatal objetivando induzir artificialmente a maturação fetal e garantir a sobrevivência de neonatos críticos é bem estabelecido e rotineiramente utilizado em Medicina. Por outro lado, a utilização pós-natal de corticóide, como garantia de melhores condições clínicas do neonato, ainda figura como expressivo desafio tanto em neonatologia humana quanto veterinária. Deste modo, este estudo tem como objetivo avaliar a eficácia da corticoterapia pré ou pós-natal em cordeiros prematuros extremos na melhora da condição clínica, pulmonar, metabólica e hemodinâmica; necessidade de assistência ventilatória e na garantia de sobrevivência neonatal. Para tal, cordeiros prematuros, nascidos aos 135 dias de gestação, foram aleatoriamente alocados nos grupos: corticoterapia materna pré-natal (CORT PRÉ; n=8), corticoterapia pós-natal (CORT PÓS; n=9) e controle (CONT; n=5). A corticoterapia foi realizada com betametasona em dose única de 0,5 mg/Kg, por via de aplicação intra muscular, aos 133 dias de gestação ou aos 10 minutos após o nascimento para os grupos CORT PRÉ e CORT PÓS, respectivamente. O parto foi induzido utilizando-se o fármaco aglepristona às 49 horas prévias à data estimada para o parto. Os neonatos foram avaliados quanto ao escore Apgar, condição clínica geral (freqüência cardíaca, freqüência respiratória, tônus muscular e irritabilidade reflexa), temperatura corpórea, hemogasometria arterial, glicemia, lactatemia, concentrações séricas das enzimas antioxidantes (superoxido dismutase SOD e glutationa peroxidase GPx) e marcador do estresse oxidativo (TBARS) em 10 momentos pontuais durante os 3 dias subsequentes ao parto. Para os cordeiros destinados ao suporte ventilatório, avaliamos o tempo (em minutos) necessário para o início do protocolo ventilatório a partir do nascimento e o tempo de permanência na ventilação. Os dados foram analisados por meio de testes paramétricos e não-paramétricos, com nível de significância de 95%. As variáveis também foram submetidas ao teste de correlação de Spearman. Como resultados, observamos melhor condição de vitalidade e tônus muscular nos neonatos tratados em relação ao grupo controle. Quanto à avaliação cardiogênica, a betametasona pré-natal apresentou efeito bradicárdico, enquanto a administração pós-natal resultou em efeito taquicárdico. Tanto os resultados de frequência respiratória como temperatura corpórea foram estatisticamente superiores nos neonatos tratados em relação ao controle. Todos os cordeiros nasceram bradicárdicos e bradipneicos, com valores normais atingidos a partir de 10 minutos. Observamos hiperglicemia nos grupos tratados, com valor estatisticamente superior no grupo CORT PÓS. O valor de lactato foi estatisticamente superior no grupo CORT PÓS em relação ao controle. Quanto aos componentes do equilíbrio ácido-básico, os neonatos do grupo CORT PRÉ tiveram valores significativamente maiores de bicarbonato, enquanto menores pressões de CO2 foram observadas a partir de 60 minutos, embora sem diferença quanto ao pH e BE. Os tratamentos não determinaram alterações nos valores de PO2 e SO2. Entretanto, os diferentes protocolos corticoterápicos influenciaram no perfil hematológico neonatal, com valores significativamente maiores de hematócrito no grupo CORT PÓS, seguido pelo grupo CORT PRÉ. Observamos também atuação do tratamento pós-natal nos valores de SOD e correlação positiva com os valores de hematócrito e hemoglobina. Comparando-se o percentual de cordeiros submetidos à assistência ventilatória, verificou-se maior necessidade no grupo controle. Os neonatos do grupo CORT PRÉ permaneceram por tempo menor sob assistência ventilatória, em relação ao grupo controle Com base nos resultados obtidos, concluímos que a corticoterapia pós-natal ou pré-natal favorece a condição clínica neonatal (vitalidade, tônus muscular e funções vitais), a função pulmonar (trocas gasosas e compensação aos desequilíbrios ácido-básicos) e a atividade metabólica (controle glicêmico). O tratamento pós-natal aumentou a atividade da enzima SOD, reduzindo os riscos de danos pulmonares. Ainda, o tratamento com betametasona pós-natal ou materna pré-natal diminui a necessidade de assistência ventilatória em cordeiros prematuros extremos / The use of corticosteroid aiming artificially fetal lung maturation and survival of critical neonates is used as a routine in medicine. On the other hand, the postnatal steroid therapy used to improve clinical conditions of the newborn, It\'s still a therapeutic challenge both in human as veterinary neonatology. Thus, the aims this study is to assess the effectiveness of corticosteroid, used in the pre or postnatal period, in extremely preterm lambs to improve clinical, pulmonary, metabolic and hemodynamic condition; the need for ventilatory support and neonatal survival rate. For it, preterm lambs, born with 135 days of gestation, were randomly allocated into three groups: prenatal maternal corticosteroid therapy (CORT PRE; n = 8), postnatal corticosteroid therapy (CORT POST; n = 9) and control (CONT; n = 5). The steroid therapy was performed with betamethasone in a single dose of 0.5 mg/ kg, by intramuscular route of administration, at 133 days of pregnancy our after 10 minutes from the birth in the groups CORT PRÉ and CORT PÓS, respectively. The labor was induced with aglepristone administrated 49 hours prior to the estimated date of birth. Newborns were assessed by Apgar score, general medical condition (heart rate, respiratory rate, muscle tone and reflex irritability), body temperature, blood gas analysis, blood glucose, blood lactate concentration, serum concentrations of antioxidant enzymes (superoxide dismutase - SOD and glutathione peroxidase - GPx) and marker of oxidative stress (TBARS). The assessments were performed in 10 moments during the three days from delivery. For ventilated newborns, we assessed the needed time (in minutes) between birth and the beginning of ventilatory protocol, as well as length of stay on ventilatory support. Data were analyzed using parametric and nonparametric tests, with 95% of significance level. The variables were assessed from Spearman correlation test. As results, we noted better condition of vitality and muscle tone in newborns treated when compared with control group. Regarding cardiogenic values, antenatal betamethasone resulted in bradycardic effect, while its postnatal administration was related with tachycardia. Both results of respiratory and body temperature rates were significantly higher in newborns treated compared to the control. All lambs born whith bradycardia and bradypnea, reached normal values from 10 minutes of life. Hyperglycemia was observed in the treated groups, with statistically higher values in CORT PÓS group. The lactate value was statistically higher in CORT PÓST group compared to the control. Concerning the components of the acid-base balance, the CORT PRÉ showed significantly higher values of bicarbonate, while lower pressures of CO2 were observed from 60 minutes, although there were no differences in pH and BE values. The treatments did not determine changes in PO2 and SO2 values. However, the different protocols of steroid therapy influenced on neonatal blood profile, with significantly higher hematocrit values in CORT POST group, followed by CORT PRÉ. We also observed influence of postnatal treatment in SOD values as well as positive correlation between SOD and the hematocrit and hemoglobin values. Comparing the percentage of lambs submitted to mechanical ventilation, there were most ventilated neonates in the control group. Lower ventilation time was observed in the CORT PRÉ group. Then we conclude that, the postnatal or antenatal steroids improve neonatal clinical condition (vitality, muscle tone and vital functions), lung function (gas exchange and compensation to acid-base imbalances) and metabolic activity (glycemic control). The postnatal treatment increased the activity of SOD by reducing the risks of pulmonary damage. Moreover, treatment with postnatal betamethasone or prenatal maternal reduces the need for mechanical ventilation in extremely preterm lambs

A utilização do corticosteróide antenatal objetivando induzir artificialmente a maturação fetal e garantir a sobrevivência de neonatos críticos é bem estabelecido e rotineiramente utilizado em Medicina. Por outro lado, a utilização pós-natal de corticóide, como garantia de melhores condições clínicas do neonato, ainda figura como expressivo desafio tanto em neonatologia humana quanto veterinária. Deste modo, este estudo tem como objetivo avaliar a eficácia da corticoterapia pré ou pós-natal em cordeiros prematuros extremos na melhora da condição clínica, pulmonar, metabólica e hemodinâmica; necessidade de assistência ventilatória e na garantia de sobrevivência neonatal. Para tal, cordeiros prematuros, nascidos aos 135 dias de gestação, foram aleatoriamente alocados nos grupos: corticoterapia materna pré-natal (CORT PRÉ; n=8), corticoterapia pós-natal (CORT PÓS; n=9) e controle (CONT; n=5). A corticoterapia foi realizada com betametasona em dose única de 0,5 mg/Kg, por via de aplicação intra muscular, aos 133 dias de gestação ou aos 10 minutos após o nascimento para os grupos CORT PRÉ e CORT PÓS, respectivamente. O parto foi induzido utilizando-se o fármaco aglepristona às 49 horas prévias à data estimada para o parto. Os neonatos foram avaliados quanto ao escore Apgar, condição clínica geral (freqüência cardíaca, freqüência respiratória, tônus muscular e irritabilidade reflexa), temperatura corpórea, hemogasometria arterial, glicemia, lactatemia, concentrações séricas das enzimas antioxidantes (superoxido dismutase SOD e glutationa peroxidase GPx) e marcador do estresse oxidativo (TBARS) em 10 momentos pontuais durante os 3 dias subsequentes ao parto. Para os cordeiros destinados ao suporte ventilatório, avaliamos o tempo (em minutos) necessário para o início do protocolo ventilatório a partir do nascimento e o tempo de permanência na ventilação. Os dados foram analisados por meio de testes paramétricos e não-paramétricos, com nível de significância de 95%. As variáveis também foram submetidas ao teste de correlação de Spearman. Como resultados, observamos melhor condição de vitalidade e tônus muscular nos neonatos tratados em relação ao grupo controle. Quanto à avaliação cardiogênica, a betametasona pré-natal apresentou efeito bradicárdico, enquanto a administração pós-natal resultou em efeito taquicárdico. Tanto os resultados de frequência respiratória como temperatura corpórea foram estatisticamente superiores nos neonatos tratados em relação ao controle. Todos os cordeiros nasceram bradicárdicos e bradipneicos, com valores normais atingidos a partir de 10 minutos. Observamos hiperglicemia nos grupos tratados, com valor estatisticamente superior no grupo CORT PÓS. O valor de lactato foi estatisticamente superior no grupo CORT PÓS em relação ao controle. Quanto aos componentes do equilíbrio ácido-básico, os neonatos do grupo CORT PRÉ tiveram valores significativamente maiores de bicarbonato, enquanto menores pressões de CO2 foram observadas a partir de 60 minutos, embora sem diferença quanto ao pH e BE. Os tratamentos não determinaram alterações nos valores de PO2 e SO2. Entretanto, os diferentes protocolos corticoterápicos influenciaram no perfil hematológico neonatal, com valores significativamente maiores de hematócrito no grupo CORT PÓS, seguido pelo grupo CORT PRÉ. Observamos também atuação do tratamento pós-natal nos valores de SOD e correlação positiva com os valores de hematócrito e hemoglobina. Comparando-se o percentual de cordeiros submetidos à assistência ventilatória, verificou-se maior necessidade no grupo controle. Os neonatos do grupo CORT PRÉ permaneceram por tempo menor sob assistência ventilatória, em relação ao grupo controle Com base nos resultados obtidos, concluímos que a corticoterapia pós-natal ou pré-natal favorece a condição clínica neonatal (vitalidade, tônus muscular e funções vitais), a função pulmonar (trocas gasosas e compensação aos desequilíbrios ácido-básicos) e a atividade metabólica (controle glicêmico). O tratamento pós-natal aumentou a atividade da enzima SOD, reduzindo os riscos de danos pulmonares. Ainda, o tratamento com betametasona pós-natal ou materna pré-natal diminui a necessidade de assistência ventilatória em cordeiros prematuros extremos / The use of corticosteroid aiming artificially fetal lung maturation and survival of critical neonates is used as a routine in medicine. On the other hand, the postnatal steroid therapy used to improve clinical conditions of the newborn, It\'s still a therapeutic challenge both in human as veterinary neonatology. Thus, the aims this study is to assess the effectiveness of corticosteroid, used in the pre or postnatal period, in extremely preterm lambs to improve clinical, pulmonary, metabolic and hemodynamic condition; the need for ventilatory support and neonatal survival rate. For it, preterm lambs, born with 135 days of gestation, were randomly allocated into three groups: prenatal maternal corticosteroid therapy (CORT PRE; n = 8), postnatal corticosteroid therapy (CORT POST; n = 9) and control (CONT; n = 5). The steroid therapy was performed with betamethasone in a single dose of 0.5 mg/ kg, by intramuscular route of administration, at 133 days of pregnancy our after 10 minutes from the birth in the groups CORT PRÉ and CORT PÓS, respectively. The labor was induced with aglepristone administrated 49 hours prior to the estimated date of birth. Newborns were assessed by Apgar score, general medical condition (heart rate, respiratory rate, muscle tone and reflex irritability), body temperature, blood gas analysis, blood glucose, blood lactate concentration, serum concentrations of antioxidant enzymes (superoxide dismutase - SOD and glutathione peroxidase - GPx) and marker of oxidative stress (TBARS). The assessments were performed in 10 moments during the three days from delivery. For ventilated newborns, we assessed the needed time (in minutes) between birth and the beginning of ventilatory protocol, as well as length of stay on ventilatory support. Data were analyzed using parametric and nonparametric tests, with 95% of significance level. The variables were assessed from Spearman correlation test. As results, we noted better condition of vitality and muscle tone in newborns treated when compared with control group. Regarding cardiogenic values, antenatal betamethasone resulted in bradycardic effect, while its postnatal administration was related with tachycardia. Both results of respiratory and body temperature rates were significantly higher in newborns treated compared to the control. All lambs born whith bradycardia and bradypnea, reached normal values from 10 minutes of life. Hyperglycemia was observed in the treated groups, with statistically higher values in CORT PÓS group. The lactate value was statistically higher in CORT PÓST group compared to the control. Concerning the components of the acid-base balance, the CORT PRÉ showed significantly higher values of bicarbonate, while lower pressures of CO2 were observed from 60 minutes, although there were no differences in pH and BE values. The treatments did not determine changes in PO2 and SO2 values. However, the different protocols of steroid therapy influenced on neonatal blood profile, with significantly higher hematocrit values in CORT POST group, followed by CORT PRÉ. We also observed influence of postnatal treatment in SOD values as well as positive correlation between SOD and the hematocrit and hemoglobin values. Comparing the percentage of lambs submitted to mechanical ventilation, there were most ventilated neonates in the control group. Lower ventilation time was observed in the CORT PRÉ group. Then we conclude that, the postnatal or antenatal steroids improve neonatal clinical condition (vitality, muscle tone and vital functions), lung function (gas exchange and compensation to acid-base imbalances) and metabolic activity (glycemic control). The postnatal treatment increased the activity of SOD by reducing the risks of pulmonary damage. Moreover, treatment with postnatal betamethasone or prenatal maternal reduces the need for mechanical ventilation in extremely preterm lambs

Ziel: Gewinnung neuer Erkenntnisse auf dem Gebiet der Glucocorticoidforschung. Die Arbeit gliedert sich in zwei Teile: 1. Klinische Studie zu Wirkungen und Nebenwirkungen einer niedrig bis mittelhoch dosierten Methylprednisolon(MP)-Therapie bei Patienten mit entzündlich-rheumatischen Erkrankungen. 2. Durchflusszytometrische Untersuchungen mit humanen PBMC mit dem Ziel, membranständige Glucocorticoidrezeptoren (mGCR) nachzuweisen. Methodik: 1. In einer klinischen Studie wurden zwei Patientengruppen mit jeweils 20 Patienten miteinander verglichen. Alle Patienten hatten entzündlich-rheumatische Erkrankungen und bekamen eine MP-Therapie über mindestens ein Jahr. Die Dosierungen in der ersten Gruppen entsprachen einer low-dose GC-Therapie, die Patienten in der zweiten Gruppe bekamen eine medium-dose GC-Therapie. Erwünschte, unerwünschte Wirkungen sowie die Lebensqualität der Patienten wurden erhoben. 2. Humane PBMC wurden durchflusszytometrisch untersucht. Es wurden konventionelle Färbemethoden sowie eine hoch-sensitive Liposomenfärbung zur Detektion spezifischer membranständiger Antigene angewandt. Ergebnisse: 1. In den meisten Fällen waren die relativ niedrigen Dosierungen von MP geeignet, die Krankheitsaktivität der entzündlich-rheumatischen Erkrankung wirksam zu kontrollieren. Einzelne Exazerbationen waren allerdings zu verzeichnen. Bei den meisten unerwünschten Wirkungen zeigten sich keine Unterschiede zwischen den Dosisgruppen. Osteoporosetypische Rückenschmerzen traten signifikant höher in der oberen Dosisgruppe auf (p=0,04), bei dem erhöhten Augeninnendruck zeigte sich eine Tendenz (p=0,1). Häufige Nebenwirkungen auch bei niedrigen Dosierungen waren: Unterblutungen der Haut und Pergamenthaut (76,2 % bzw. 73,8 % aller Patienten) bzw. eine Cushing-Symptomatik (61,9 % aller Patienten). 2. Mit der Liposomen-Färbetechnik ließen sich erstmals mGCR auf humanen PBMC systematisch nachweisen. Bis zu 5 % der B-Lymphozyten und bis zu 7 % der Monozyten exprimierten mGCR bei Gesunden. Stimulationen des Immunsystems durch Impfungen oder eine aktive rheumatoide Arthritis führten zu einer deutlichen Erhöhung des Anteils mGCR-positiver Monozyten auf über 20 %. Schlussfolgerungen: 1. Niedrig bis mittelhoch dosierte Therapien mit MP können effektiv die Aktivität von entzündlich-rheumatischen Erkrankungen kontrollieren. Die unerwünschten Effekte sind vermutlich dosisabhängig, für die meisten ist jedoch nicht relevant, ob mit einer low-dose oder einer medium-dose Therapie behandelt wird. 2. mGCR werden auf humanen PBMC unter physiologischen Bedingungen exprimiert. Unter bestimmten immunologischen Bedingungen werden sie hochreguliert. Herkunft und Funktion der Rezeptoren müssen noch genauer geklärt werden. / Purpose: Gaining new knowledge in glucocorticoid research. The dissertation consists of two parts: 1. Clinical study on effects and side-effects of a low-dose / medium-dose therapy with methylprednisolone (MP) in patients with inflammatory rheumatic diseases. 2. Flowcytometric investigation of human PBMC in order to detect membrane-bound glucocorticoid-receptors (mGCR). Methods: 1. In a clinical study two groups of patients - 20 patients each - were compared. All patients had inflammatory rheumatic diseases and recieved MP-therapy for at least one year. The first group recieved a low-dose GC-therapy, the second group a medium-dose GC-therapy. 2. Human PBMC were examined. We used conventional and high-sensitive liposome staining technique for the detection of specific membrane-bound antigens. Results: 1. In most cases rather low dosages of MP were able to control the disease activitiy of inflammatory rheumatic diseaeses. However, we observed disease exacerbation in some cases. Most side-effects showed the same characteristics in both groups. There was a significant higher appearance of typical osteoporotic back pain in the higher dosage group (p=0,04) and a tendency to higher intraophtalmic pressure in this group (p=0,1). Common side effects with even low dosages were: skin hematoma and thin skin (76,2 % and 73,8 % respective) and a Cushing-Syndrome (61,9 % of all patients). 2. With the liposome staining technique we showed for the first time systematically mGCR on human PBMC. Up to 5 % of B-lymphocytes and 7 % of monocytes presented mGCR in healthy blood donors. Stimulation of the immunological system by vaccination or in case of an active rheumatoid arthritis led to a marked increase of mGCR-positive monocytes to more than 20 %. Conclusions: 1. Low-dose and medium-dose methylprednisolone therapy can effectivly control the activity of inflammatory rheumatic diseases. The side effects are probably dose-dependent. However, for most side effects it doesn''t matter if patients are treated with a low-dose or a medium-dose therapy. 2. mGCR are expressed on human PBMC under physiological conditions and are up-regulated under certain immunological conditions. The function of these receptors has to be examined more profoundly.